青少年特发性脊柱侧凸两侧椎旁肌的不平衡及其形成机制研究

发布时间：2018-05-01 07:47

本文选题：青少年特发性脊柱侧凸 + 椎旁肌　；参考：《第二军医大学》2017年硕士论文

【摘要】：一、研究目的研究主胸弯青少年特发性脊柱侧凸患者两侧椎旁肌在肌容积和脂肪浸润率的分布差异及microRNA对椎旁肌不平衡的调控机制。二、研究方法1.影像学测量通过MRI检查测量34例主胸弯AIS患者主弯的顶椎、上、下端椎3个水平两侧椎旁肌的肌容积和脂肪浸润率,比较两侧差异并分析其与各影像学参数如顶椎旋转等的相关性。2.microRNA高通量测序选取3例在发病年龄、手术年龄、Lenke分型、角度大小、Risser征等参数较匹配的AIS手术患者两侧椎旁肌组织,进行高通量RNA测序,筛选两侧差异表达的mi RNA,并进行生物信息学分析预测其功能。3.临床样本验证选取测序中变化倍数最大的6个miRNA,采用实时荧光定量PCR实验验证其在22例AIS手术患者顶椎、上、下端椎的表达情况,将患者的临床信息与miRNA表达差异量进行相关性分析研究其临床意义。4.差异表达机制研究选择两侧肌肉组织中hsa-miR-516a-5p和hsa-miR-517a-3p相对表达差异最大且与测序结果一致的4例患者两侧椎旁肌组织,通过甲基化测序手段研究其差异表达是否受到C19MC基因簇上游CpG岛甲基化修饰的调控。三、研究结果1.影像学测量MRI检查发现主胸弯AIS患者椎旁肌两侧的肌容积和脂肪浸润率存在差异-凸侧椎旁肌容积更大,而凹侧肌肉脂肪浸润率更高。相关性分析提示顶椎水平肌容积差异指数与顶椎偏移成显著性负相关(r=-0.749,p=0.032),而脂肪浸润率差异指数与顶椎偏移和Cobb角大小均呈显著性正相关(r=0.727,p=0.041;r=0.866,p=0.005)。2.mi RNA高通量测序高通量测序手段筛选出在AIS患者两侧椎旁肌中差异表达的miRNA有18个,其中在凹侧表达较凸侧升高的有12个,凸侧表达较凹侧升高的有6个,并发现部分miRNA与骨骼肌的再生、纤维化相关。3.临床样本验证实时荧光定量PCR实验结果显示,在AIS手术患者顶椎水平两侧肌肉组织中hsa-miR-495-3p、hsa-miR-516a-5p和hsa-miR-517a-3p的表达量凸侧较凹侧升高,差异方向与测序结果一致,而上、下端椎水平差异无统计学差异。另外,相关性分析提示顶椎水平左右两侧肌肉组织miR-516a的表达差值与手术年龄呈显著负相关(r=-0.342,p=0.026),而miR-517a的表达差值则与主弯Cobb角呈显著负相关(r=-0.340,p=0.023)。4.差异表达机制研究在检测的C19MC基因簇上游CpG岛39个位点中,发现第1-2个测序位点甲基化修饰水平存在不同,凹侧高于凸侧,余位点无明显差异。四、研究结论1.影像学测量主胸弯AIS患者主弯两侧椎旁肌的肌容积和脂肪浸润率存在差异。2.miRNA高通量测序AIS患者两侧椎旁肌中miRNAs存在差异表达,这些差异表达的miRNAs可能参与调控两侧椎旁肌形态学的不平衡。3.临床样本验证验证实验显示AIS患者顶椎水平凹、凸两侧多裂肌中miRNA-517,516,495有差异表达。4.差异表达机制研究肌肉组织中miRNA-516,517的差异表达可能与该位点的DNA甲基化水平改变有关。总之,我们从影像学测量和miRNA两个层面阐述了青少年特发性脊柱侧凸两侧椎旁肌的不平衡,另外甲基化测序实验也提示表观遗传因素参与了对椎旁肌不平衡的调控。
[Abstract]:1 . The expression of hsa - miR - 516a - 5p and hsa - miR - 517a - p on both sides of AIS patients was investigated by means of methylation sequencing . Conclusion 1 . Differential expression of miRNA - 517,516,495 in bilateral paravertebral muscle of AIS patients is shown to be related to the change of DNA methylation level in bilateral paravertebral muscle .

【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R726.8

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