MiR-29b在紫癜性肾炎肾组织中的表达及其功能研究

发布时间：2018-05-20 01:27

  本文选题：紫癜性肾炎 + 新月体　； 参考：《南京医科大学》2013年硕士论文

【摘要】：第一部分MiR-29b在紫癜性肾炎肾组织中的表达 目的检测miR-29b在儿童紫癜性肾炎（Henoch Sch nlein purpura nephritis，HSPN）肾组织中的表达，并探讨其与HSPN病理损伤的关系。 方法35例HSPN患儿活检肾组织，光镜和电镜下观察各患儿的病理变化，按病理变化有无新月体形成、肾小球硬化、间质纤维化、血栓形成、毛细血管袢坏死各分为两组。采用real-time PCR的方法定量检测肾活检组织中miR-29b的表达水平，并记录患儿入院后首次检查的实验室指标，用SPSS17.0软件分析两组间miR-29b表达水平及实验室指标的差异，进一步联合miR-29b及实验室指标建立Logistic回归模型，分析其与HSPN新月体形成的关系。 结果（1）与无新月体组相比，有新月体组miR-29b表达水平增加（P0.05），其他病理改变组miR-29b表达水平无变化。（2）无新月体组和有新月体组的入院后实验室指标比较中，血小板计数（PLT）、中性粒细胞百分比（N%）、嗜酸性粒细胞百分比（E%）、尿白细胞计数（UWBC）、尿红细胞计数（URBC）、体重校正后24h尿蛋白定量（24hUPro/kg）、血清胆固醇（CHOL）及血IgG水平在两组间有统计学差异（P0.05）。（3）联合miR-29b与有统计学差异的实验室指标进行Logistic回归分析，结果发现miR-29b（OR=2.166，P=0.041），24hUPro/kg（OR=5.296，P=0.042），URBC（OR=6.016，P=0.033）进入Logistic回归模型（LogP=-4.633+0.773miR-29b+1.66724hUPro/kg+1.794URBC），作为预测新月体形成的独立危险因素。 结论伴新月体形成的HSPN肾组织中miR-29b表达水平增加。miR-29b、24hUPro/kg及URBC是紫癜性肾炎新月体形成的独立危险因素，提示临床医师对有上述指标异常时应警惕新月体形成可能，并给予积极治疗，以减轻肾脏损害。 第二部分MiR-29b在血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞活化中的作用 目的探讨miR-29b在血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）介导的肾小球系膜细胞活化（增殖和炎症介质表达）中的作用及其机制。 方法体外培养人类肾小球系膜细胞（Human glomerular mesangial cells，HGMCs），，100nmol/L AngⅡ刺激HGMCs；或稳定转染LV-hsa-miR-29b-1载体过表达miR-29b；或稳定转染LV-hsa-miR-29b-3p-inhibition载体抑制miR-29b表达后再应用AngⅡ刺激。采用real-time PCR和western blot检测miR-29b、细胞间粘附分子-1（intracellular adhesion molecule-1，ICAM-1）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α诱导蛋白质3（tumor necrosisfactor, alpha-induced protein3，TNFAIP3）、NF-κB抑制因子（NF-κB repressionfactor，NKRF）、细胞周期蛋白（CyclinA2、CyclinD1）的表达；ELISA检测IL-1β、IL-8的表达；流式细胞术检测细胞周期；CCK8法检测细胞增殖。 结果（1）AngⅡ刺激后miR-29b、炎症介质ICAM-1、IL-1β、IL-6、IL-8及细胞周期蛋白CyclinA2、CyclinD1的表达显著增加，细胞周期中S+G2/M期的比例增加（P0.05）。（2）miR-29b过表达诱导炎症介质ICAM-1、IL-1β、IL-6、IL-8的释放、细胞周期蛋白CyclinA2、CyclinD1的表达增加及细胞增殖（P0.05），并且抑制靶基因TNFAIP3、NKRF的表达。（3）miR-29b表达抑制阻断AngⅡ诱导的炎症介质释放、细胞周期蛋白表达增加及细胞增殖（P0.05），并且诱导靶基因TNFAIP3、NKRF的表达增加。 结论miR-29b通过抑制靶基因TNFAIP3和NKRF的表达而促进炎症介质的释放，通过调节细胞周期蛋白而促进HGMCs增殖。
[Abstract]:Expression of MiR - 29b in renal tissue of Henoch - Schonlein purpura nephritis

Objective To investigate the expression of miR - 29b in renal tissue of Henoch Schnlein purpura nephritis ( HSPN ) and to explore its relationship with HSPN pathological injury .

Methods The expression level of miR - 29b in renal biopsy was measured by real - time PCR , and the difference between the expression level of miR - 29b and the laboratory indexes was analyzed by means of real - time PCR . The relationship between the expression level of miR - 29b and the laboratory indexes was analyzed by SPSS 17.0 software , and the relationship between the expression level of miR - 29b and the new moon body of HSPN was further analyzed .

Results ( 1 ) The expression level of miR - 29b was increased ( P0.05 ) , and the expression level of miR - 29b in other pathological changes was not changed . ( 2 ) There was statistical difference between the two groups ( P0.05 ) .

Conclusion The expression level of miR - 29b in HSPN renal tissue with new moon body is increased . miR - 29b , 24hUPro / kg and URBC are independent risk factors formed in the crescent body of Henoch - Schonlein purpura nephritis .

Role of the second part MiR - 29b in the activation of angiotensin II - induced mesangial cells

Objective To investigate the role and mechanism of miR - 29b in the activation of mesangial cells ( proliferation and inflammatory mediators ) mediated by angiotensin II ( Ang 鈪

本文编号：1912585