全反式维甲酸对缺氧性肾小管上皮细胞Prohibitin1和Prohibitin2表达的影响

发布时间：2019-12-01 01:29

【摘要】：目的通过检测全反式维甲酸(All-Trans RetinoicAcid,ATRA)干预的缺氧性大鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cell,RTEC)抗增殖蛋白-1(Prohibitin1,PHB1)、抗增殖蛋白-2(Prohibitin2,PHB2)表达水平,初步探讨ATRA对缺氧性RTEC的PHB1和PHB2表达的影响。 方法实验细胞选用大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK-52E细胞,购自上海生物细胞库,培养NRK-52E细胞选用混有胎牛血清和双抗的高糖培养基(即在100ml高糖培养基中加入5ml胎牛血清和1ml双抗),然后置于37℃,5%二氧化碳培养箱中培养。传代3次后,分为3组,正常组、模型组、ATRA干预组。正常组细胞不做任何处理,模型组细胞置于真空罐中,负压吸引器吸尽残余空气,充入缺氧气体(95%N2和5%CO2)密封建立缺氧性RTEC损伤模型,ATRA干预组细胞中加入0.1μmol/L的ATRA后参照模型组的方法进行缺氧处理。采用实时荧光定量PCR法测定正常组、模型组、ATRA干预组缺氧24h、36h两个时间点NRK-52E细胞PHB1、 PHB2、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,a-SMA)的mRNA表达量,采用Western blot法检测3组NRK-52E细胞的PHB1、PHB2、TGF-β1、α-SMA的蛋白表达量。 结果1.与正常组比较,模型组、ATRA干预组2个时间点NRK-52E细胞PHB1和PHB2的mRNA表达量及其蛋白表达量均显著下降(P0.05),缺氧36h细胞的表达量较缺氧24h细胞的表达量下降更为显著；与模型组比较,ATRA干预组24h及36h NRK-52E细胞PHB1和PHB2的mRNA表达量及其蛋白表达量均显著增高(P0.05)。2.与正常组比较,模型组、ATRA干预组2个时间点NRK-52E细胞TGF-β1、α-SMA的mRNA表达量及其蛋白表达量均显著增高(P0.05),缺氧36h细胞的表达量较缺氧24h细胞的表达量增高更为显著；与模型组比较,ATRA干预组2个时间点NRK-52E细胞TGF-β1、α-SMA的mRNA表达量及其蛋白表达量均显著下降(P0.05)。3.相关性分析：模型组NRK-52E细胞PHB1、PHB2的蛋白表达量与TGF-β1及a-SMA的蛋白表达量均呈显著负相关(P0.05)。 结论在缺氧性RTEC损伤模型中,ATRA可显著增强RTEC中PHB1和PHB2蛋白表达量及其mRNA表达量,可能对缺氧性RTEC损伤具有保护作用。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R726.9

【参考文献】

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本文编号：2568161