p38丝裂素活化蛋白激酶在新生大鼠高氧肺损伤中的作用

发布时间：2020-04-10 23:26

【摘要】： 目的 高浓度氧(简称高氧)指氧含量高于常压下空气的气体,在新生儿救治中具有重要作用,但因高氧长时间进入肺部后,产生大量活性氧,急性期引起急性肺损伤(ALI),继而引发慢性肺损伤而导致另一并发症支气管肺发育不良(BPD),严重影响患儿生活质量。肺脏是氧化应激性损伤的重要靶器官,目前新生儿高氧肺损伤的发病机制尚未完全清楚,有研究表明,中性粒细胞(PMN)的迅速激活、各种细胞因子(CK)的大量释放和转化生长因子-β1(TGF-β_1)的过度表达等在高氧肺损伤的发生发展及其转归中发挥重要的作用。本实验采用新生大鼠建立高氧肺损伤动物模型,检测p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达,并给予p38MAPK特异性抑制剂SB203580对新生大鼠高氧肺损伤进行干预治疗,检测SB203580干预前后新生大鼠高氧肺损伤模型中白细胞介素-8(IL-8)和TGF-β_1含量的变化,以及肺组织病理学和肺湿/干重比的改变,来探讨p38MAPK在新生大鼠高氧肺损伤中的表达和意义,及其特异性抑制剂SB203580对新生大鼠高氧肺损伤产生保护作用的机制。 方法 160只新生大鼠随机分为Ⅰ空气对照组、Ⅱ高氧组、Ⅲ高氧+SB203580组、Ⅳ高氧+生理盐水组。将Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组新生大鼠暴露于95% O2,共3 d,同时Ⅰ组置于正常空气中喂养。Ⅲ组从高氧暴露第1 d开始,给予SB203580 5 mg/kg腹腔注射,1/d,共3 d;Ⅳ组给予生理盐水5 mg/kg腹腔注射,1/d,共3 d。在12 h、24 h、72 h和1 w四个时相点处死新生大鼠,进行肺组织病理学检查和肺湿/干重比值(W/D)测定,以Western-blot法检测p38MAPK表达,以酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肺组织IL-8和TGF-β_1的含量。 结果 ①各实验组12 h、24 h肺组织病理学检查均无明显差异。高氧组及高氧+生理盐水组高氧暴露72 h时,肺组织光镜下观察表现为明显的急性炎症和出血,1 w时肺间隔明显增宽,组织结构紊乱。高氧+SB203580组72 h光镜下观察以急性炎症反应为主,1 w时光镜下观察肺泡内炎细胞基本吸收,肺泡发育及结构基本正常。②高氧组与空气对照组相比,肺W/D在12 h和24 h无明显差异,在72 h和1 w高氧组明显高于空气对照组;高氧+生理盐水组与高氧+SB203580组相比,肺W/D在12 h和24 h无明显差异,在72 h和1 w高氧+生理盐水组明显高于高氧+SB203580组。③新生大鼠暴露于高氧12 h时, p38MAPK开始表达,72 h达高峰,后逐渐降低。在高氧暴露72 h时,空气对照组未见p38MAPK表达,高氧组可见p38MAPK表达;高氧+生理盐水组p38MAPK表达明显强于高氧+SB203580组。④在高氧组和高氧+生理盐水组中,肺组织IL-8和TGF-β_1浓度随时间延长呈持续上升趋势,在各时相点均明显高于空气对照组和高氧+ SB203580组(P 0.01)。 结论 ①新生大鼠连续吸入高氧可导致ALI。②p38MAPK参与了新生大鼠高氧肺损伤的过程。③SB203580能够通过阻断p38MAPK表达,进而抑制IL-8和TGF-β_1表达来减轻新生大鼠高氧肺损伤。
【图文】：

2 h 24 h 72 h 1 wtimehyperxia saline gr图 1 新生大鼠暴露于高氧后不同时间肺湿/干重(W/D)比值测定 Lung W/D of new-born rats exposed to hyperoxia at different timern-blot 检测 p38MAPK 表达露于高氧 12 h 时，p38MAPK 开始表达；随着时间的延，72 h 达高峰，后逐渐降低 (图 2)。在高氧暴露 72 h 表达，高氧组可见 p38MAPK 表达；高氧+生理盐水组SB203580 组 (图 3)。12 h 24 h 72 h 1 w

3 不同处理组新生大鼠 72 h 时 p38MAPK 的 Western-blot 检测情空气对照组；B:高氧组；C:高氧+SB203580 组；D:高氧+生理盐水Fig 3 Expression of p38MAPK at time point of 72 h in different grouof new-born rats by Western-blot: air control group; B: hyperxia group; C: hyperxia + SB203580 groD: hyperxia + physiologic saline group)A 法检测 IL-8 浓度和高氧+生理盐水组中，，肺组织 IL-8 浓度均随时间延长呈，高氧组和高氧+生理盐水组 IL-8 浓度均高于空气(P < 0.01)(见表 3，图 4)。表 3 不同处理组新生大鼠肺 IL-8 含量测定(n=10, pg/ml, x ± s
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R722.1

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 赵锦宁,李华强,唐仕芳;γ-干扰素对新生大鼠高氧肺纤维化的影响[J];重庆医学;2004年04期

2 侯晓彬,易定华,李廷慧,段维勋,张金洲,胡沛臻,刘维永;P38丝裂原活化蛋白激酶和核转录因子κBP65在胸部爆炸伤致急性肺损伤中的作用[J];中华急诊医学杂志;2005年01期

3 徐洪涛;李华强;余健;聂国明;;高氧致新生鼠急性肺损伤及氧化应激反应的动态研究[J];中国小儿急救医学;2006年03期

4 陈奕,缪泽鸿,丁健;p38MAPKs在细胞周期调控中的作用[J];生理科学进展;2004年04期

5 蒋静,许峰;氧化应激与肺细胞损伤凋亡信号途径[J];实用儿科临床杂志;2005年03期

6 胡兰;许峰;;丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与高氧肺损伤的研究进展[J];实用儿科临床杂志;2006年12期

7 黄翠萍,张珍祥;内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织p38 mRNA及其蛋白质表达的变化[J];咸宁学院学报(医学版);2004年06期

8 绪广林,姚琳,余书勤,卜丹,王燕飞,龚祝南,张双全;表没食子儿茶素没食子酸酯对小鼠油酸型肺损伤的保护作用[J];药学学报;2005年03期

9 方向明,谢俊然,陈惠香,胡晓彤;p38 MAPK在机械通气所致肺损伤中的作用[J];中华麻醉学杂志;2002年09期

10 陈旭林,夏照帆,韦多,贲道锋,王广庆,韩圣;p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路在严重烧伤大鼠急性肺损伤中的作用[J];中华外科杂志;2004年07期

本文编号：2622837