鼻咽部S.p培养阳性对RSV肺炎住院患儿的影响及其机制研究

发布时间：2020-04-25 23:57

【摘要】：第一部分RSV肺炎合并鼻咽部S.p培养阳性住院患儿临床特征目的:呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿下呼吸道感染最常见的病毒病原体,肺炎链球菌(S.p)是婴幼儿鼻咽部最常定植的细菌之一。本文通过回顾性分析RSV肺炎合并鼻咽部S.p培养阳性(RSV+S.p)住院患儿的人口学特点及临床特征,为进一步探索两种病原体的相互作用机制及防治两种病原混合感染性疾病提供科学的理论依据。方法:纳入≤36月龄的住院肺炎患儿,进一步分为≤12月龄组和13-36月龄组。根据前期鼻咽抽吸物(NPA)病毒学检出结果及细菌培养结果分为RSV、S.p及RS V+S.p三个检出组,收集患儿的相关临床资料,主要包括:一般资料、现病史、个人史、家族史、临床症状、体征、辅助检查、诊断及治疗等。结果:1.鼻咽部检出S.p组与RSV组相比,S.p组比RSV组既往多次呼吸道感染阳性率、慢性/迁延性肺炎阳性率、入院时发热阳性率、外周血白细胞计数、中性粒细胞计数及CRP等炎性指标均明显增加,差异有显著性;而RSV组比S.p组入院时呼吸频率明显加快,紫绀和三凹征的表现更为突出;2.RSV+S.p组与RSV组相比,慢性/迁延性肺炎阳性率、入院时发热阳性率均明显增高,差异有显著性;3.RSV+S.p组与S.p组相比,两组间各项指标的差异不明显;4.RSVA+S.p组与RSVB+S.p组相比,前组重症肺炎的阳性率明显升高。结论:RSV肺炎(包括RSVA/RSVB肺炎)或合并鼻咽部S.p检出患儿临床表现各有特点,鼻咽部S.p检出阳性组(S.p组和RSV+S.p组)的气道及全身炎症表现较阴性组明显升高,尤其是年龄小于1岁的患儿差异更为明显。第二部分RSVA/RSVB肺炎患儿鼻咽部S.p对青霉素的耐药性差异及机制研究目的:已知RSV和S.p共同感染是通过RSV G蛋白与S.p细胞壁的青霉素结合蛋白1A(PBP1A)结合,从而明显增强S.p的侵袭性。其中G蛋白是RSVA和RS VB两种亚型重要的分型蛋白;PBP1A是青霉素等β-内酰胺类抗生素作用的靶点,其氨基酸位点突变是影响S.p对青霉素耐药的重要因素。本文探索住院肺炎患儿NP A检出RSVA+S.p和RSVB+S.p组中S.p对青霉素的耐药性差异及可能的作用机制,为临床预防和治疗两种病原混合感染的相关疾病提供重要的理论依据。方法:纳入≤36月龄且NPA检出为RSVA+S.p、RSVB+S.p及S.p组的住院肺炎患儿,回顾性分析各组S.p对青霉素的耐药性,并进一步分析RSVA+S.p、RSVB+S.p及S.p各组中S.p的PBP1A、PBP2B和PBP2X催化活性的中心保守位点及裂隙开口处氨基酸位点突变情况。结果:1.RSVA+S.p与RSVB+S.p组相比,前组S.p对青霉素的耐药性明显升高;2.在青霉素敏感、中介及耐药三个大组中,S.p、RSVA+S.p和RSVB+S.p组中S.p的PBP1A、PBP2B、PBP2X催化活性中心的保守位点STMK及裂隙开口处氨基酸位点均发生突变,各组间相比差异不明显;3.在青霉素耐药组中,RSVA+S.p和RSV B+S.p 组中 S.p 的 PBP1A 多个氨基酸位点 A391TI、P407VY、T420LQ、D473KK、T495Y Y、H503KV、S517NV、D533MM存在不同的突变趋势。结论:NPA检出RSVA+S.p和RSVB+S.p组中S.p对青霉素的耐药性明显不同,两组S.p的PBP1A多个氨基酸突变位点存在明显不同的分布趋势,推测RSVA和RS VB两种亚型G蛋白与S.p的PBP1A相互作用机制可能是不同的。第三部分RSV+S.p肺炎患儿鼻咽部S·p的血清型分布差异及细菌菌属特点目的:RSV是1岁毛细支气管炎住院患儿最常见的病毒病原体,感染后与远期哮喘的发病密切相关。研究表明1岁RSV和HRV毛细支气管炎患儿NPA检出细菌菌属的组成是截然不同的,推测不同的病毒与细菌菌属之间可能存在特定的关系。本文通过分析RSV及HRV肺炎患儿鼻咽部检出S.p血清型的分布差异,了解并比较RSV+S.p和HRV+S.p的NPA细菌菌属的特点,为进一步探索RSV+S.p患儿的发病机制提供重要的理论依据。方法:纳入≤12月龄且NPA检出RSV+S.p、HRV+S.p的住院肺炎患儿,采用mPCR+测序检测S.p的血清型。随机选择18例RSV+S.p和12例HRV+S.p患儿的N PA,进行16SrDNA检测了解细菌菌属情况。结果:1.RSV常与19F型S.p共检出,与HRV组相比有显著性差异;2.RSV+S.p和HRV+S.p肺炎患儿NPA 16SrDNA检测提示:两组细菌菌属均以链球菌属为主,嗜血杆菌属和莫拉克斯氏菌属也占较大比例,三种菌属在两个组间比较无明显差异,其他菌属含量相对较低。结论:RSV+S.p/HRV+S.p组和RSV/HRV组的NPA细菌菌属明显不同,细菌可能在RSV+S.p/HRV+S.p组肺炎患儿中起更为重要的作用。RSV和HRV与鼻咽部不同血清型S.p的关系是不相同的,RSV及其亚型与不同血清型S.p之间可能存在特定的关系及致病机制。
【图文】：

图 1.1 研究对象纳入排除流程图Figure 1.1 The screening, eligibility and enrollment of children with pneumonia

※※:催化活性中心保守位点 ；****：催化活性中心裂隙开口处氨基酸位点图 2.1 青霉素耐药组 S.p、RSVA + S.p 和 RSVB + S.p 的 PBP1A 氨基酸位点突变情况比较Figure 2.1 Comparison of PBP1a amino acid variation among S. p ,RSVA+ S. p and RSVB+ S. p in penicillin resistant groups
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R725.6

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本文编号：2640842