RMPP患儿BALF中喘息相关细胞因子水平变化及远期肺功能随访研究

发布时间：2020-06-14 04:32

【摘要】：第一部分难治性肺炎支原体肺炎患儿BALF中L-4、INF-γ及LTs水平的变化 目的：检测难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、INF-γ以及LTs水平,探讨RMPP患儿局部细胞因子水平的变化及其与特应性体质的关系。 方法： 1.对象及分组：选择2008年9月-2010年3月在湖南省人民医院儿科医学中心住院,起病4周内双份血清MP抗体的滴度有4倍以上升高,并留有BALF的RMPP患儿(42例)为研究对象。根据是否有湿疹、过敏性鼻炎、荨麻疹及相关过敏性疾病家族史等将RMPP患儿分为特应性组(11例)和非特应性组(31例)。以同期因支气管异物在本院住院,异物取出4周后纤维支气管镜复查的患儿为对照(12例,双份血清确诊无MP感染,支气管异物取出后近1个月均无呼吸道症状,肺部体检正常,胸片正常)。 2.对RMPP患儿及对照患儿采用FQ-PCR检测BALF中MP 16S rRNA基因； 3. BALF行细胞学成分分析； 4.采用ELISA方法检测RMPP患儿及对照患儿BALF中IL-4、INF-γ及CysLT、LTB4水平； 5.同时测定BALF标本的蛋白含量含量。 结果： 1.使用FQ-PCR检测BALF中MP 16S rRNA基因42例RMPP患儿均阳性；且BALF标本采集时间均早于血清MP抗体滴度4倍升高时的时间,即第二份血清采集时间。 2.RMPP患儿与对照儿童BALF细胞学成份分析结果显示：与对照儿童相比,RMPP患儿BALF中细胞总数上升(P0.05),其中以中性粒细胞上升为主(P0.01)。 3.与对照组儿童比较,RMPP患儿BALF中INF-γ、IL-4均有显著升高(P0.05),INF-γ/IL-4比值变化无差异(P0.05)。与对照组儿童比较,特应性组BALF中INF-γ、IL-4均有显著升高(P0.05),非特应性组INF-γ有显著升高(P0.05),IL-4无差异(P0.05)。特应性组与非特应性组比较INF-γ、IL-4均无差异(P0.05)。特应性组、非特应性组及对照组两两比较,INF-γ/IL-4比值均无差异(P0.05)。 4.RMPP组患儿BALF中LTB4及CysLTs较对照组儿童均有升高,其中LTB4显著升高(P0.05)。特应性组及非特应性组BALF中CysLTs较对照组无显著差异(P0.05)。特应性组较非特应性组BALF中CysLTs有显著升高(P0.05)。特应性组及非特应性组BALF中LTB4较对照组均有升高,以特应性组升高为甚,各组间两两相比,差异均有显著性(P0.05)。。 5.RMPP组患儿BALF中中性粒细胞百分比与LTB4浓度呈正相关(γ=0.742, P0.01). 结论： 1. FQ-PCR检测BALF中MP 16 SrRNA基因可能是早期MPP病原诊断的可靠方法。 2. RMPP患儿BALF细胞数显著增加,尤以中性粒细胞为甚,LTB4与其发生可能相关;在具有特应性体质患儿LTB4的水平高于非特应性体质者。 3. RMPP患儿BALF1中INF-γ、IL-4水平明显升高,但INF-γ/IL-4比值无变化,提示RMPP患儿病变局部炎症反应明显,但尚不能证实RMPP患儿存在Th2占主导的炎症反应。 4. RMPP患儿BALF中CysLTs升高不明显；但具有特应性体质患儿CysLTs含量升高明显,提示CysLTs的水平可能与机体的过敏状态相关。 第二部分难治性肺炎支原体肺炎患儿临床治愈后远期肺功能随访 目的：对RMPP患儿出院9-12月后进行临床随访及肺功能检测,来探讨RMPP的预后及其对肺功能的远期影响。 方法： 1.对象及分组：选择2008年9月-2010年3月在湖南省人民医院儿科医学中心住院,起病4周内双份血清MP抗体的滴度升高有4倍以上,并留有BALF的RMPP患儿(42例)为研究对象；于出院后9-12月进行临床症状随访(35例)及肺功能检测(29例)；根据是否有湿疹、过敏性鼻炎、荨麻疹及相关过敏性疾病家族史等,将随访的RMPP患儿分为：特应性组(10例接受临床随访及肺功能检测)及非特应性组(接受临床随访25例,接受肺功能检测19例)；以既往无支原体、衣原体感染病史,无喘息病史,接受肺功能检测时肺部听诊无罗音,近2周内无疾病史的健康儿童为肺功能检测对照组(12例) 2.临床随访：均于出院后9-12月间进行电话随访。 3.肺功能检查：于出院后9-12月进行检测。0-4岁行潮气呼吸检查,4-6岁行IOS检查,6-14岁行常规通气检查。 结果： 1.接受电话随访共35例患儿,均于出院后1-2月左右复查胸部X-ray或胸部CT提示原病灶吸收。8例患儿(21.74%)出院后至随访时有咳嗽病史,其中3例(8.70%)慢性咳嗽;5例患儿(13.04%)有喘息发作,均已诊断为哮喘。1例患儿(4.35%)于出院后1月余诊断患有过敏性紫癜,并住院治疗,已治愈。 2.电话随访患儿,特应性组较非特应性组喘息(哮喘)的发生率有升高(P0.05),其余情况无差别；各年龄段间各种疾病发生率无差别(P0.05)。 3.接受肺功能检测共29例患儿,接受潮气呼吸检测者9例,异常2例,接受IOS检测者11例,异常1例,均为小气道阻力轻度增高；接受常规通气检测者9例,异常0例；对照组12例,均无异常发现；RMPP患儿与对照组患儿肺功能异常发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。 4. RMPP患儿肺功能检测,特应性组较非特应性组肺功能异常发生率有升高,两组间差异有统计学意义(P0.05);各年龄段肺功能异常发生率无差别(P0.05)。 结论： 1. RMPP病情重,易遗留肺部后遗症,但早期明确诊断,并通过积极的治疗仍能取得较好的疗效； 2.尚不能认为RMPP感染后对患儿的肺功能将造成长期的影响。 【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R725.6

【图文】：

3.BALFFQ一PCR检测Mp165rRNA基因结果(见图l一l，l一2，l一3)在阂值之_卜出现扩增曲线，Ct值<30(>1护/ml)，实验结果为阳性，由于每个患儿回收的灌洗液为0.5m呱g，，因而由仪器自动算出DNA含量(基因拷贝数/0.5m呱g);ct值岁。(>103/ml)，实验结果为阴性。用求算术平均值方法计算MP一DNA平均拷贝数，阴性结果不参加计算。用检测试剂盒自带检测阴性质控，结果阴性。FQ一PCR检测MP165rRNA基因重复性好，批内CV值为0.95%，批间CV值为3.04%，MP阳性质控标准品FQ一PCR后，标准曲线的斜率为一2.844，线性相关系统产0.968，且具有较好的重复性。Y二一2.844X十38.873ORMPP组患儿BALF标本42例共检测出阳性结果42例，阳性标本的拷贝数波动在9.99x103一4.03、109copies/m1，取对数后，计算其平均值及标准差为6.21士1.72。对照组BALF标本12例，拷贝数均为0。

图1一3质控品(含阴性阳性质控)以及部分样品的扩增曲线且BALF标本采集时间均早于第二份血清采集时间，即血清MP抗体滴度4倍升高时的时间。如图1一4:0544 000555 322311

本文编号：2712282