uPA与PAI-1在川崎病冠状动脉损伤中的作用研究

发布时间：2020-07-14 17:59

【摘要】：第一部分uPA与PAI-1在川崎病并发冠状动脉损伤中的变化 目的:探讨川崎病并发冠状动脉损伤损害可能的发病机制及尿激酶型纤溶酶原激活因子(urokinase-type plasminogen activator, uPA)与纤溶酶原激活剂抑制因子-1(plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)对川崎病冠状动脉病变的影响。 方法:川崎病病例46例,其中冠状动脉损伤组(coronary artery lesions, CALs)21例,非冠状动脉损伤组(no coronary artery lesions, NCALs)25例,健康对照组20例,收集临床资料和静脉血标本。临床资料检测川崎病并发冠状动脉损伤可能高危因素及出凝血指标,白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、血小板(PLT)、红细胞沉降率(ESR)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、纤维蛋白原降解产物(P-FDP);酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血浆uPA和PAI-1浓度;实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time quantitative polymerase chain reation, RT-qPCR)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)上uPA、PAI-1mRNA的表达强度。 结果: 1 WBC、CRP、PLT、ESR、APTT、PT、FIB、P-FDP在CALs组与正常对照组有统计学意义(P0.01),在CALs组都高于正常对照组;ESR和FIB在三组之间的表达有统计学意义(P0.05),CALs组的ESR比NCALs组和正常对照组高,CALs组中FIB较NCALs组低; 2 CALs组uPA血浆浓度(5580.31±2712.98 pg/ml)高于NCALs组(3822.74±2059.40 pg/ml)和正常对照组(1579.81±592.99 pg/ml),P0.05;CALs组PAI-1血浆浓度(18.37±4.26ng/ml)高于NCALs组(11.56±1.14ng/ml)与正常对照组(3.70±1.65ng/ml),P0.05;相关分析提示川崎病CALs组uPA与PAI-1血浆浓度有负相关性(r=-0.657, P=0.02); 3 CALs组uPA血浆浓度与PT呈负相关(P0.05),PAI-1血浆浓度与检测的临床指标无相关性(P0.05); 4 CALs组uPA mRNA表达(0.0623±0.0520)高于NCALs组(0.0411±0.0211)与正常对照组(0.0103±0.0035),P0.05;CALs组PAI-1 mRNA表达(0.1767±0.0235)高于NCALs组(0.1365±0.0189)与正常对照组(0.0231±0.0261),P0.05;相关分析提示川崎病CALs组uPA与PAI-1 mRNA无相关性(P0.05); 5 CALs组uPA与PAI-1mRNA表达强度与临床指标无相关性(P0.05)。 结论:uPA及PAI-1表达升高与KD并发CALs有关;通过检测uPA及PAI-1表达水平,可成为早期诊断KD并发CALs的指标之一。 第二部分IVIG和阿司匹林治疗对川崎病并发冠状动脉损伤患儿uPA与PAI-1的影响 目的:探讨uPA和PAI-1在川崎病并发CALs发生发展中的作用及静脉用丙种球蛋白(IVIG)和阿司匹林治疗的可能机制,为川崎病并发CALs治疗提供依据。 方法:检测21例川崎病并发CALs患儿在急性期与IVIG和阿司匹林治疗后恢复期WBC、CRP、PLT、ESR、AST、APTT、PTP-FDP、FIB;ELISA检测IVIG和阿司匹林治疗前后uPA及PAI-1血浆浓度。 结果:川崎病并发CALs患儿在IVIG和阿司匹林治疗后恢复期WBC、CRP、ESR、APTT、PT、FIB、P-FDP较急性期降低(P0.05);PLT和AST在两组之间的表达无明显变化(P0.05);恢复期uPA和PAI-1血浆浓度较急性期降低(uPA:t=4.174, P0.01;PAI-1:t=6.697, P0.01)。 结论:IVIG及阿司匹林治疗可能通过降低血浆uPA和PAI-1浓度,控制高凝状态以及减轻机体炎症反应,从而达到防治血管受损。
【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R725.4
【图文】：

辣根过氧化物酶标记亲和素工作液 100μl，，弃去孔内液体，每孔加 200μl 洗涤液，浸泡 后在吸水纸上拍干；孔加底物溶液 90μl，37℃避光显色；孔加终止液 50μl，终止反应；仪在 450nm 波长测量光密度（OD 值）。准品和待测标本的 OD 值减去零孔的 OD 值；xper1.3 软件绘制标准曲线图并得出方程，以标作纵坐标，绘制出拟合曲线图（图 1）（图 2）

图 2 PAI-1 标准曲线图注：X 轴表示浓度，Y 轴表示 OD 值方程最终求出结果。光定量聚合酶链反应 (real-time quantitative poly-qPCR）原理链反应（polymerase chain reaction, PCR）可对特级的扩增，在 RT-qPCR 反应中，引入了一种荧光应的进行，PCR 反应产物不断累计，荧光信号强就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从线图。实时荧光定量 PCR 的化学原理包括探针类

ss21 -0.108 ＞0.05 -0.308 21 -0.544 ＞0.05 -0.166 21 -0.313 ＞0.05 -0.217 21 0.196 ＞0.05 -0.508 21 0.559 ＞0.05 -0.307 21 0.637 ＞0.05 -0.298 21 0.675 ＜0.05 -0.120 21 -0.403 ＞0.05 0.332 21 0.189 ＞0.05 0.324 提取总 RNA 浓度在 0.5-2.0μg/μl 之间，其 OD260/O间；所有标本在凝胶电泳图上均可见清晰 28S、18 条带的亮度达到了 18S 亮度的两倍以上（图 5），

【参考文献】

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1 李小青;周南;宋e

本文编号：2755304