TLR4和CD14基因多态性与川崎病易感性以及冠状动脉损伤之间的关系

发布时间：2020-08-02 19:19

【摘要】：目的探讨Toll样受体-4(toll-like receptor-4,TLR4)及脂多糖受体CD14基因多态性与川崎病(Kawasaki disease, KD)易感性以及冠状动脉损伤之间的关系。 方法应用双色荧光标记流式细胞技术检测76例川崎病儿童和118例健康儿童外周血白细胞TLR4的表达水平;采用聚合酶链反应限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)分析方法检测二组儿童TLR4基因(-896A/G),(-1196C/T)位点以及CD14基因(-260C/T)位点的基因型频率和等位基因频率及其与川崎病的关系;应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测二组儿童血清TNF-α的浓度。 结果 (1)川崎病组和健康对照组外周血白细胞TLR4表达的平均荧光强度(MFI)分别为2.87±0.96,10.55±4.87,23.36±8.28和3.26±0.65,7.55±1.21,25.41±6.97;二组TLR4均高表达单核细胞,低表达于中性粒细胞、淋巴细胞;但二组比较无统计学差异。 (2)在川崎病组和健康对照组均未发现TLR4基因(-896A/G)和(-1196C/T)的位点突变。 (3)川崎病组和健康对照组CD14基因(-260C/T)位点均有突变,其CC,CT,TT基因型分布分别为35.5%,30.3%,34.2%和38.1%,47.5%,14.4%(X2=11.62,P0.05),差异有统计学意义;其C,T等位基因频率则分别为50.7%,49.3%和61.9%,38.1%(X2=4.76,P0.05)差异有统计学意义;其等位基因频率的相对风险分析发现T等位基因携带者发生川崎病的风险是C等位基因的1.58倍。 (4)川崎病组血清TNF-α水平(73.9±21.7ng/ml)高于对照组(19.36±8.25ng/ml),差异有显著性(t=2.047,p0.05)。 (5) CD14基因(-260C/T)位点基因型频率和等位基因频率在川崎病冠脉损伤组和未损伤组之间比较差异无统计学意义(X~2= 0.921,P0.05)。但其等位基因频率的相对风险分析发现T等位基因携带者发生冠脉损伤的风险是C等位基因的1.256倍。 结论TLR4基因(-896A/G)和(-1196C/T)位点多态性与川崎病发病无关,CD14基因(-260C/T)多态性T等位基因与川崎病发病密切相关, T等位基因可能是川崎病冠脉损伤的遗传易感因素。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R725.4
【图文】：

南京医科大学硕士学位表1. TLR4 -896A/G，-1196C/T和CD14-260C/T基因位点酶切情况位点 总长度(bp) 内切酶 酶切产物(bp)-896A/G 249 NcoI AA AG GG249 249，223，26 223，26-1196C/T 406 Hinfl CC CT TT406 406，389，27 389，27-260C/T 497 AvaⅡ CC CT TT497 497，353，144 353，144

-260C/T 497 AvaⅡ CC CT TT497 497，353，144 353，144图2. TLR4 -896A/G位点PCR产物酶切后电泳图谱M：DNA分子量标准；1-12为纯合子AA

图4.CD14-260C/T位点PCR产物酶切后电泳图谱M：DNA分子量标准；1,2,5,6,9为纯合子TT；3,7,8,10为杂合子CT；4,11为纯合子CC8．4 质控(1)测序鉴定将PCR-RFLP鉴定出的TLR4-896A/G，-1196C/T和CD14-260C/T的PCR扩增产物送至上海英俊生物技术有限公司纯化后测序分析，结果显示三个基因型PCR产物测序结果与其PCR-RFLP结果完全一致。A B

【参考文献】

相关期刊论文 前6条

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本文编号：2778948