TGM2在过敏性紫癜肾损伤中的意义

发布时间：2020-08-09 16:03

【摘要】：目的:从基因和蛋白水平探讨转谷氨酰胺酶2(transglutaminase-2,TGM2)在过敏性紫癜肾损伤中的表达及其临床意义,初步探讨过敏性紫癜患儿肾损害可能的发病机制,从而为临床对过敏性紫癜性肾炎的治疗提供新的方法和理论依据。方法:纳入2016年10月至2017年4月江西省儿童医院住院的初发的过敏性紫癜患儿,从中随机选取20例过敏性紫癜、20例肾性过敏性紫癜患儿作为实验组;从江西省儿童医院儿童保健科随机选取同期年龄、性别相匹配的20例健康体检儿童作为对照组,采用实时荧光定量PCR方法检测过敏性紫癜组、肾型过敏性紫癜组和健康对照组外周血有核细胞TGM2 mRNA的表达。从江西省儿童医院病理科随机选取同期年龄和性别匹配的5例肾母细胞瘤患者手术切除组织,分离肿瘤组织远端的正常组织作为对照组,应用免疫组化方法检测肾型过敏性紫癜组和正常对照肾组织TGM2蛋白的表达,并根据ISKDC分级标准对肾型过敏性紫癜组肾脏损害程度分组,分析TGM2的表达强度与肾脏病理损害程度的关系。结果:肾型过敏性紫癜组、过敏性紫癜组和健康对照组外周血有核细胞TGM2mRNA相对表达水平分别为(5.33±1.46)、(1.21±0.32)和(1.19±0.15),肾型过敏性紫癜组较过敏性紫癜组和健康对照组相对表达水平均高,且差异均具有统计学意义(P值分别为0.031和0.035),过敏性紫癜组与健康对照组比较无统计学差异。肾型过敏性紫癜组肾组织TGM2阳性表达评分四分位数(P_(25),P_(75))为2.25-3.00,正常对照组TGM2阳性表达评分四分位数为1.00-1.50,两组差异具有显著性(P=0.001);根据ISKDC分级,20例肾型过敏性紫癜患儿中包括Ⅱ级4例,Ⅲ级12例,Ⅳ级4例,其TGM2阳性表达评分四分位数分别为2.00-2.75、3.00-3.00和3.00-4.00,三组表达水平具有统计学差异,且其表达水平与肾型过敏性紫癜病理分级呈正相关(Kendall相关系数为0.659),即病理分级程度越重,TGM2表达水平越高。结论:TGM2的表达与过敏性紫癜肾脏受损有关,且与肾脏病理损害程度有关,TGM2可能参与了肾型过敏性紫癜的发病机制,其表达升高可能成为过敏性紫癜患儿肾脏损伤及损伤程度的一种反映指标。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R725.5;R726.9
【图文】：

琼脂糖凝胶电泳,特异性

14图 1 RNA 琼脂糖凝胶电泳性鉴定熔解曲线分析，内参 GAPDH 基因和 TGM2 基因的扩图 2.3 和图 2.4 所示：扩增曲线中基线整体平行性良好，示各标本扩增效率在，Tm 值一致，提示扩增产物特异性体）的产生。 2%琼脂糖凝胶电泳分析后，可见条带片段长度为 121bp，GAPDH 扩增片段长度，提示扩增片段的特异性良好（

扩增曲线,内参,基因,测序

第 3 章结果3）测序将 PCR 产物连接 pGEM -T Easy 载体（因目的片段较短，以提高测序的性）送检上海生工公司测序，其结果完全符合 GenBank 中 TGM2 mRNA 序图 4 所示。综合以上 3 种方法可确认扩增产物的特异性，即为实验目的产物。

熔解曲线,内参,基因,序图

性）送检上海生工公司测序，其结果完全符合 GenBank 中 TGM2 mRNA 序图 4 所示。综合以上 3 种方法可确认扩增产物的特异性，即为实验目的产物。图 2.1 内参基因 GAPDH 扩增曲线

【参考文献】