环境内分泌干扰因子DEHP与隐睾发病相关性的实验研究

发布时间：2020-09-10 18:48

　　背景：随着现代工业的发展，环境污染对人体和动物的危害已成为国际性的研究热点。前期研究提示，某些广泛存在于生活环境中的外来化合物(主要是人工合成化合物)可通过各种途径富集于人和动物体内，干扰内源性激素的合成、分泌、释放、运输、结合、效应及清除等各个环节，表现出模拟或拮抗内源性激素的作用，从而导致生殖功能下降、生殖畸形和恶性肿瘤发病率增加。该类化合物被称为环境内分泌干扰因子(Environmental endocrine disruptors，EEDs)。在众多的外来化合物中，邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(Di(2-ethylhexyl)phthalate，DEHP)作为一种广泛应用于塑料及化工产业的工业添加剂，近年来已被认为是一种重要的EEDs。隐睾(Cryptorchidism)在足月男婴中的发生率高达4％，可导致男性生殖功能障碍、产生不育，其睾丸恶变率也较正常睾丸高出20-46倍，但其病因及发病机制至今尚不明确。结合欧美及我国工业发达地区，隐睾等男性生殖畸形发生呈明显上升趋势的现象，我们推测EEDs可能与隐睾的发生具有相关性。为此通过动物实验证实重要环境内分泌干扰因子DEHP与隐睾发病的关系，对针对性治理相关的环境污染、预防和减少男性生殖畸形、促进人类健康具有重要的意义。目的：研究环境内分泌干扰因子DEHP与小鼠隐睾发生的相关性，探讨其致病机制。重庆医科大学硕士研究生学位论文方法:健康KM孕鼠随机分为五组:正常对照组、玉米油刘一照组(玉米油 Zpl/Kg/d)、雌激素对照组(DES 100pglKg/d)、DEHp低剂量实验组(DEHp loomglKgld)、oEHP高剂量实验组(DEHp 500mg/Kg/d)。各组分别于孕鼠妊娠期第12天至分娩后3天(雄性仔鼠性腺发育的关键时期)持续经口给予相应处理。除记录每组孕鼠体重变化、产仔数、仔鼠雌/雄比例外，各绍.均在生后一月进行以下检查:测量雄性仔鼠体重、身长、肛门一外生殖器问距(Anogenjta! diatance，AGO);观察摹丸、附翠位置;对翠丸、附翠组织进行光镜和电镜检查;测量翠丸大小、翠丸重量、平均曲精细管直径(MSTO)、进行肇丸活检评分 (TBS);收集血液，采用放射免疫法测定血清翠酮(丁)、雌激素(乓)、黄体生成素(L日)和卵泡刺激素(FS日)水平;采用免疫组织化学法检测翠丸雄、雌激素受体的表达水平。另外，选择OE日尸高剂量组和OES对照组隐翠小鼠，于生后两月龄进行交配实验，一i己录每组致孕率及产仔数，评价雄性隐翠仔鼠生育状况。结果:(1) OE日尸孕期给药对孕鼠的妊娠时间、妊娠期增重、每胎活产数均没有明显影响。(2)初生时各组仔鼠体重和性别比无明显差异，而尸NO3O OEH尸高剂量组和OES对照组雄性仔鼠体重、体长均明显低沂对照组，AGO缩短。(3)OE日P低剂量、OE日P高剂量组、OES对照组，仔鼠除攀发生率分别为 12.5%、25.8%和52%;隐翠鼠的辜丸、附翠重量及翠丸体积较非隐翠鼠明显降低。(4)光镜下，OE日户高剂量组和OES对照组隐皋均出现曲细精管上皮明显萎缩和间质细胞功能异常;其MS丁O明显减小，丁BS降低。电镜观察，以上两组隐辜曲细精管上皮和间质细胞均出现明显的超微结构改变。(5)OE日尸高剂量组和OES对照组血清丁、L日水平降低，FS日水平升高。(6)OE日尸高剂量组和 OES对照组隐皋雌激素受体表达水平降低，而雄激素受体表达水平无明显改变。 (7)OEHP高剂量实验组隐皋鼠(PNO60)生育力下降。结论:环境内分泌干扰因子OEH尸具有与OES类似的作用，是一种诱发隐翠的重要因子。在孕期及哺乳初期接触OEH尸后可能通过干扰几垂体促性腺激素的分泌和间质细胞攀酮合成、影响攀丸雌激素受体的表达，引起雄性仔鼠的性分化异环境内分泌干扰因子OE日P与隐辜发病相关性的实验研究常、诱导隐翠发生和翠丸生精上皮损害和生精过程障碍，从而使雄性小鼠生育力减退。OE日尸诱发隐翠的作用，与其剂量呈正比，存在明确的量效关系{〕
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2003
【中图分类】：R726.92

【引证文献】