脂多糖对新生小鼠肺血管内皮细胞的影响及机制探讨

发布时间：2020-09-16 18:11

　　 目的:该文旨在研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对新生小鼠肺血管内皮细胞的影响和机制。方法:将分离培养的肺血管内皮细胞进行系列鉴定后随机分为空白对照组和LPS组;LPS组用10ug/ml的LPS处理细胞,对照组不做处理;分别于0h、6h、12h、24h、48h时间点收集细胞标本进行检测,采用划痕实验观察LPS对肺血管内皮细胞迁移的影响;用荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)检测白介素-1β(IL-1β)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA水平变化;Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)相关蛋白P65水平的变化。结果:体外分离培养的肺血管内皮细胞成鹅卵石样排列,VIII因子相关抗原和CD31表面抗原荧光染色阳性。划痕实验中LPS组细胞在12h的迁移高于对照组(P0.001);荧光定量PCR检测到LPS组分泌的炎症因子IL-1β、TNF-α和趋化因子MIP-1α、MCP-1表达的mRNA明显高于对照组(P0.001);Western blot示LPS组与对照组相比,VEGF蛋白24h、48h明显降低(P0.05),VEGFR2蛋白表达明显降低(P0.001),同时,NF-κB相关蛋白P65活性显著升高(P0.05)结论:脂多糖诱发的炎症反应影响肺血管内皮细胞的发育,其机制可能与NF-κB通路激活,诱导炎症因子、趋化因子表达升高和VEGF/VEGFR2表达下降及有关。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R722.1
【部分图文】：

倒置显微镜下细胞呈不规则形Fig.1-1Thecellsareirregularunderaninvertedmicroscope

倒置显微镜下细胞呈铺路石样Fig.1-2Undertheinvertedmicroscope,thecellsarepavingstones

倒置显微镜下可见细胞形成脉管结构

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 陈斌;陈余清;蔡映云;;抗血管生成治疗肿瘤研究的进展[J];国外医学(内科学分册);2006年07期

2 杨红,斯琴,孙仁宇;肺血管内皮细胞在大鼠急性肺损伤发生中的作用[J];中国病理生理杂志;2000年09期

本文编号：2820190