高IgE综合征的临床特征和分子诊断

发布时间：2020-09-29 12:47

　　背景高IgE综合征(Hyper-IgE syndrome,HIES)是一种罕见的原发性免疫缺陷病,主要表现为反复金黄色葡萄球菌、真菌感染,血清IgE和嗜酸性粒细胞异常增高。根据遗传方式、临床表现和分子机制不同分为常染色体显性遗传高IgE综合征(AD-HIES)和常染色体隐性遗传高IgE综合征(AR-HIES)。已报道的病例AD-HIES居多,大多数为散发,患者表现为免疫系统、骨骼和结缔组织的异常。近年研究发现信号转导与转录活化因子3(STAT3)突变是AD-HIES的病因,且该类患者外周血Th17细胞发育障碍,从而对胞外菌和真菌易感;根据美国国立卫生院(NIH)制定的评分系统,总分大于40可临床诊断HIES,在中国大陆,仅有极少数HIES病例报道。临床医生对本病诊断和治疗缺乏经验,常导致误诊误治。本文就2007年3月-2009年7月于我院就诊的5例HIES患儿的临床特征和分子诊断进行详细分析和总结,以提高临床医师对本病的认识。目的: 1.探讨本组高IgE综合征患儿的临床特征; 2.分析本组患儿外周血Th17细胞数量,为鉴别诊断,进一步基因诊断,治疗和评估预后提供依据; 3. STAT3基因突变分析,对家庭成员进行遗传咨询。方法: 1.用NIH评分系统分析5例高IgE综合征患儿的临床资料。 2.运用流式细胞术检测高IgE综合征患儿外周血PBMC CD4+T细胞中Th17细胞数量。 3.用RT-PCR及DNA-PCR直接测序法分析5例高IgE综合征患儿及家系成员STAT3基因。 4.用DNA-PCR直接测序法分析50名健康儿童STAT3基因多态性。 5.用T-A克隆方法分析1例患儿STAT3基因转录产物的多样性。结果: 1.临床特征本组5例患儿,4男1女,起病年龄为生后3天到2岁不等,平均起病年龄6个月,4例以皮肤表现起病(2例以新生儿皮疹起病,2例以湿疹起病),1例以皮肤和内脏脓肿起病。5例患儿均有反复湿疹,肺炎,血清IgE异常增高和嗜酸性粒细胞增多,NIH评分分别为60、48、72、48、45。本组患儿临床表现多样化:例1的主要特点是反复金葡菌肺炎伴肺脓肿及肺大泡形成,后发展为气胸,威胁生命;例2主要表现为全身多处反复金葡菌“冷脓肿”和皮肤粘膜真菌感染;例3既有反复金葡菌肺炎、肺脓肿、肺大泡形成及致命性液气胸,也有皮肤粘膜真菌感染;例4的临床特征为反复顽固难治的湿疹和牙龈肿胀,没有发生反复金葡菌和真菌感染;例5以反复皮肤和内部器官脓肿、严重支气管扩张为主要表现。本组患儿均为散发病例,3例定期随访,目前一般情况尚可,1例未遵医嘱治疗及随访,2年后肺大泡复发需再次手术治疗,1例死亡。 2.外周血单个核细胞Th17/CD4+T细胞数量分析检测3例患儿外周血单个核细胞CD4+T细胞中Th17细胞比例,例1和2分别为0.03%和0.13%,相比于正常对照(0.69%)几乎缺如,而例4为0.53%,在正常范围内(n=18,0.598%±0.374%)。其余2例没有标本检测Th17细胞。 3基因分析例1-3均有STAT3杂合的错义突变,包括1例新型突变(T620S), 2例热点突变(V637M和R382Q)。分析例1的父亲和例2的父母没有发现与患儿相同位点的突变。例4和例5 STAT3编码区基因分析没有发现突变。结论: 1.本组5例患儿NIH评分均40,临床诊断为的HIES。HIES临床表现为以免疫系统为主的多系统异常,典型AD-HIES有少见的金葡菌感染表现(不易局限的肺大泡和皮肤“冷脓肿”),皮肤粘膜真菌感染。实验室检查以IgE和嗜酸性粒细胞异常增高为主要特点,早期诊断的病例积极预防性治疗预后良好。 2.本组3例典型AD-HIES患儿中多数有Th17细胞数量减少,因此,Th17细胞数量分析是AD-HIES重要的分子诊断依据。 3.本组3例典型AD-HIES患儿中发现1例STAT3基因新型突变,2例热点突变,均为单个等位基因错义突变。 4.本组资料提示:NIH评分40分应高度怀疑HIES,但并非所有NIH评分40分的HIES患者都有STAT3基因突变;NIH评分40分,同时有Th17减少者多数有STAT3基因突变。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R725.9
【部分图文】：

流式,细胞,患儿

图2-1 HIES患儿及健康对照Th17细胞流式检测图Fig 2-1 Flow cytometric analysis fir the proportion of Th17 cells in HIES patients and healthycontrols.注：因PMA+ ionomycin联合刺激后，使CD4表达明显下降，而CD3和CD8不会有明显改变，故用CD3＋CD8－IL-17A+的细胞代表Th17细胞占CD4+细胞的比例0.40.60.811.21.4hT71(%foC4D)+

正常人,人类,细胞,患者

2-3 人类 Th17 细胞在正常人(a)和 HIES 患者(b)中的分化途3 (a) Differentiation and effector function of Th17 CD4 lymph(b) Impairment of Th17differentiation in HIES

信号通路,基因诊断,脐带血,错义突变

论IH 评分>40 不一定有 STAT3 突变，本组 5 例 NIH 评分>40 分的患 AD-HIES 有 STAT3 单个等位基因错义突变，包括 1 例为新型突变。基因诊断结果进一步证实 Th17 细胞数量低的患者有 STAT3脐带血分析 Th17 和 STAT3 基因诊断 HIES 提供依据。

【参考文献】