NF-κB、TNF-α、IL-8及细胞免疫在儿童社区获得性肺炎的表达

发布时间：2020-11-16 02:55

　　 目的:检测核因子-κB ( nuclear factor-кB,NF-κB )在社区获得性肺炎( community-acquired pneumonia,CAP )患儿外周血、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)的表达;探讨外周血NF-κB-mRNA的表达水平是否可作为评价CAP患儿气道炎症的有效指标;研究NF-κB与CAP患儿病原学、病情变化及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)表达的关系;分析细胞免疫功能变化在儿童CAP发病机制中的作用。 方法:选取苏州大学附属儿童医院呼吸科2010年5~2010年12月间收治的258例CAP患儿及ICU2010年6月~2010年12月间收治的29例重症肺炎患儿,并选取30例健康患儿为对照组。完善病原学检测,收集并整理临床资料。留取患儿外周血标本,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其中NF-κB-mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-8的水平,流式细胞仪检测患儿淋巴细胞亚群。其中的52例患儿进行电子支气管镜检查及支气管肺泡灌洗,留取BALF标本,RT-PCR测定其中NF-κB-mRNA的表达水平。 结果:(1)与正常对照组比较,病毒感染组、细菌感染组、MP感染组及混合感染组患儿外周血NF-κB-mRNA表达水平明显增高,具有显著统计学差异(P﹤0.01);细菌感染组、MP感染组及混合感染组NF-κB-mRNA表达水平又高于病毒感染组,差异有统计学意义(P﹤0.05);而细菌感染组、MP感染组及混合感染组组间比较无统计学差异。 (2)RSV、Pinf-3、HboV、SP、HI感染患儿NF-κB-mRNA的表达水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。SP、HI组NF-κB-mRNA表达水平均高于RSV、Pinf-3、HboV组(P﹤0.05),而RSV、Pinf-3、HboV三组两两比较NF-κB-mRNA的表达水平均无统计学差异,SP、HI组间比较也无统计学差异。SMPP及普通MPP两组患儿外周血NF-κB-mRNA的表达水平均明显均高于正常对照组, SMPP组又高于普通MPP组(P﹤0.05)。 (3)52例CAP患儿BALF NF-κB-mRNA的表达水平高于外周血,二者表达水平呈正相关(r=0.6705,P﹤0.01);其中MP感染、细菌感染及混合感染患儿外周血NF-κB-mRNA与BALF NF-κB-mRNA的表达均呈正相关;病毒感染患儿外周血NF-κB-mRNA与BALF NF-κB-mRNA表达水平相仿。 (4)CAP患儿外周血NF-κB-mRNA、TNF-α及IL-8表达水平均表现为重症肺炎组﹥普通肺炎组﹥正常对照组,各组间三种因子的表达差异均有统计学意义(P﹤0.05);外周血TNF-α、IL-8及NF-κB表达的相关分析均呈正相关。 (5)外周血CD3~+、CD3~+CD8~+淋巴细胞百分比均表现为正常对照组﹥普通肺炎组﹥重症肺炎组,三组比较均有总体性差异(P﹤0.01)。重症肺炎组及普通肺炎组CD3~+、CD3~+CD8~+淋巴细胞百分比与正常对照组比较均有统计学差异(P﹤0.05),但重症肺炎组与普通肺炎组组间CD3~+淋巴细胞百分比差异无统计学意义。CD3-CD19~+、CD19~+CD23~+淋巴细胞百分比均表现为重症肺炎组﹥普通肺炎组﹥正常对照组,组间比较差异均有统计学意义(P﹤0.05)。CD4~+CD25~+淋巴细胞百分比在三组间统计学结果为普通肺炎组﹥正常对照组﹥重症肺炎组,组间比较也均有统计学差异。三组间CD3~+CD4~+、CD3-CD(16~+56) ~+淋巴细胞百分比差异均无统计学意义。 (6)NF-κB、TNF-α、IL-8分别与CD3~+、CD3~+CD8~+淋巴细胞表达呈负相关,与CD3-CD19~+、CD19~+CD23~+淋巴细胞表达呈正相关,与CD3~+CD4~+、CD4~+CD25~+、CD3-CD(16~+56) ~+淋巴细胞表达无相关性。 结论:NF-κB、TNF-α、IL-8参与儿童CAP的发病机制;不同病原感染NF-κB表达水平存在差异,同种病原感染因个体NF-κB表达水平不同,出现不同的病情变化;测定外周血NF-κB-mRNA表达水平可作为评价CAP患儿肺部炎症的指标;CAP患儿存在细胞免疫功能紊乱,与NF-κB、TNF-α、IL-8相互作用共同影响病情变化。
【学位单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R725.6
【部分图文】：

图 1 病毒、细菌、MP 及混合感染 CAP 患儿 NF-κB-mRNA 基因扩增片段凝胶电泳图注：1a～5a 为内参，M 为 Marker，1b、2b、3b、4b、5b 分别为正常对照组、病毒感染组、MP 感染组、细菌感染组及混合感染组 NF-κB-mRNA 片段。00.511.522.5正常对照组病毒感染组细菌感染组支原体感染合感染组混F-Nκ-mRNAB

分组NF-κB mRNA WBC 计数（x109） CRP（mg/L）正常对照组 0.39±0.185.80±2.25 1.49±1.32RSV 1.09±0.20*5.65±2.83 3..01±2.48Pinf-3 0.79±0.19*6.01±2.96 2.69±1.24HBoV 0.86±0.18*7.09±3.01 1.81 ±1.03SP 1.54±0.63*▲▼■12.13±6.06*▲▼■13.19±6.18*▲▼■HI 1.47±0.46*▲▼■11.39±4.88*▲▼■14.35±6.77*▲▼■FP18.3﹤0.0111.46﹤0.019.96﹤0.01注：与正常对照组比较 P*﹤0.05，与 RSV 组比较 P▲﹤0.05，与 Pinf-3 组比较 P▼﹤0.05，与 HboV 比较 P■﹤0.05。

四. 普通 MPP 及 SMPP 患儿 NF-κB-mRNA 的表达水平65 例 MP 感染 CAP 患儿中，普通肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniaepneumonia,MPP）47 例，重症肺炎支原体肺炎（serious mycoplasma pneumoniaepneumonia,SMPP）18 例。普通 MPP 与 SMPP 组患儿外周血 NF-κB-mRNA 的表达水平分别为 1.26±0.37、1.80±0.51，均明显高于正常对照组(F=64.10,P﹤0.01)，两组间比较差异有统计学意义(t=-3.97,P﹤0.01)。见图 8。
【参考文献】

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本文编号：2885535