HA117调控DPF3在法洛四联症发生中对心肌细胞分化作用机制的研究

发布时间：2020-11-18 17:01

　　 背景:法洛四联症是一种典型的先天性心脏畸形,其约占全部先天性心脏畸形的3%-5%,右心室流出道梗阻几乎可以见于全部的法洛四联症患者。近年来右心室流出道发育异常和心肌细胞分化异常与法洛四联症的关系被广泛报道,然而,同时包括大规模临床样本和体外实验的研究很罕见。HA117是一个新的抗分化长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA),先前的研究表明HA117在体内和体外都与细胞分化密切相关。方法:为了探究HA117和法洛四联症的潜在关系,我们收集了84例行法洛四联症一期根治术患者的右心室流出道组织样本,我们检测了标本HA117表达量水平并且收集了术前基线水平、围术期数据、短期随访数据,用以完成涉及横断面和短期预后的研究。我们观察了HA117和其临近下游基因DPF3的表达量以及DPF3启动子区甲基化水平。在细胞实验中,我们利用5'-氮杂胞苷和全反式维甲酸诱导了间充质干细胞向心肌细胞分化,并对心肌细胞的标志物、细胞干性标志物和细胞行为学进行了检测。结果:McGoon比值、Nakata指数和左室末期舒张容积指数在HA117高表达组患者中降低,并且和HA117表达量呈负相关。HA117高表达组围手术期的住院天数和ICU时间都更长,患者术后6月动脉血气氧饱和度的提升在HA117高表达组相对较小。HA117高表达组DPF3启动子区甲基化水平升高。在细胞实验中,干扰HA117的表达可以使得心肌细胞标志物cTnT和Cx43表达升高,使得细胞干性标志物下调,同时可以促进细胞侵袭能力和迁移能力,降低增殖能力。结论:HA117是法洛四联症畸形严重程度的危险因素,是法洛四联症短期预后的风险因素,下调HA117可以促进干细胞向心肌样细胞分化,降低干细胞干性,并且影响细胞行为学。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R725.4
【部分图文】：

镜下观察。 和 ISH 检测 HA117 表达情况测右心室流出道组织中 HA117 的表达情况，我们采用了 QRNA 表达量，并通过原位杂交确认（图 1.1）。 原位杂交可心室流出道组织中 HA117 在胞核表达（图 1.1-A）。QPCR 得到者 HA117 表达量为 4.812 ± 1.319。为便于分组，取 84 名患者达量均值为 1.0（图 1.1-B）。根据 HA117 的相对表达将患者分组临界值。 在所有 84 位患者（55 位男性和 29 位女性）中，相对表达量超过 1.0。

35图 2.1 HA117 和 DPF3 mRNA 在组织的表达情况igure 2.1 Expression of HA117 and DPF3 in clinical sampl四联症患者右心室流出道组织中是否存在心肌细QPCR 检测了右心室流出道组织中的不成熟心 的表达量。TOF 组患者 GATA-4 mRNA 的相对表患者的表达水平在均值以上，49 例在均值以下。对量为 1.000±0.330。TOF 组和对照组 GATA-4 mRN

图 2.3 cTnT 蛋白在组织样本中的表达Figure 2.3 Expression of cTnT proteins by IHC2.3 苏木精-伊红染色检测组织结构为了观察TOF组和对照组患者右心室流出道的心肌结构，我们采用HE染色，可见法洛四联症患者心肌组织肥大、核分散，有不成熟细胞核。对照组心肌组织结构齐整、核集中（图 2.4）。
【参考文献】

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本文编号：2888959