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儿童急性白血病的实验、临床及循证医学研究

发布时间:2020-12-08 04:58
  目的:由于原代白血病细胞与体内白血病细胞的生物学性状相似,且遗传性状稳定,但原代细胞的培养存在培养条件要求高、细胞存活率低等缺点。为此,本文就儿童原代白血病细胞的分离及最优化的培养方法进行研究,为儿童急性白血病(AL)的体外研究提供细胞模型。方法:选取2008年8月-2009年9月本院儿科收治的25例初诊AL患儿作为研究对象。于治疗前抽取肝素抗凝的骨髓液或外周血2-3 ml于无菌离心管中,利用人淋巴细胞分离液即可分离出白血病细胞。在倒置光学显微镜下观察不同时间点的原代白血病细胞的形态变化,以及利用CCK-8法检测不同细胞密度、不同成分的培养液对原代白血病细胞增殖活性的影响。结果:细胞形态学观察及细胞增殖活力测定提示:原代白血病细胞在72 h以内存活率较高;高密度细胞[(4-10)×106/ml]培养低于密度细胞[(1-2)×106/ml];胎牛血清较患儿自身的血清更有利于原代白血病细胞生长。结论:利用人淋巴细胞分离液可以成功地分离出原代白血病细胞,而对于原代白血病细胞的体外培养,选择(4-6)×106/ml细胞密度接种于含10%胎牛血清的培养基中生长效果最理想。目的:探讨小檗碱诱导儿童... 

【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:126 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
缩略词表
中文摘要
英文摘要
第一部分 儿童急性白血病的实验研究
    前言
        参考文献
    (一) 儿童原代白血病细胞的分离与培养
        引言
        资料与方法
        结果
        讨论
        参考文献
    (二) 小檗碱对原代白血病细胞增殖、凋亡的实验研究
        引言
        材料与方法
        结果
        讨论
        参考文献
    (三) MDM2、P53的表达与小檗碱对原代白血病细胞生长抑制的关系
        引言
        材料和方法
        结果
        讨论
        参考文献
第二部分 儿童急性白血病的临床研究
    (一) 儿童急性白血病的细胞免疫分型与临床分析
        引言
        对象与方法
        结果
        讨论
        参考文献
第三部分 儿童急性白血病的循证医学研究
    (一) 亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与儿童急性白血病发生的Meta分析
        引言
        资料与方法
        结果
        讨论
        参考文献
    (二) 细胞色素P4501A1 MspI基因多态性与儿童急性白血病关系的Meta分析
        引言
        对象与方法
        结果
        讨论
        参考文献
    (三) 母亲怀孕过程中饮酒与儿童急性白血病关系的Meta分析
        引言
        对象与方法
        结果
        讨论
        参考文献
综述
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致谢


【参考文献】:
期刊论文
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[3]Bcl-2反义核酸联合化疗药对HL60细胞及原代白血病细胞的作用[J]. 林艳娟,吕联煌,陈志哲,张臣青,林振兴.  中国药理学通报. 2009(08)
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[6]孕期环境危险因素以及母亲MTHFR677C→T、血浆Hcy与儿童先天性心脏病的关系[J]. 宫婷,李芬,石建,冯竣,唐小妮,李学诚,任永惠.  中国妇幼保健. 2009(22)
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本文编号:2904497

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