缺氧对体外培养大鼠O2A Tau蛋白的影响

发布时间：2021-06-18 10:42

　　目的:培养、纯化以获得较高纯度的大鼠少突胶质前体细胞（O2A）,观察各个时期细胞的形态学变化;在模拟缺氧条件下培养不同的时间,观察O2A在缺氧条件下的形态学变化,采用免疫组化和Western blot等技术,测定各个缺氧时间段Tau蛋白的强度,探索缺氧对O2A Tau蛋白的影响。方法:采用两次恒温摇床振荡培养法培养、纯化O2A,A2B5免疫荧光染色法进行细胞鉴定,倒置荧光显微镜拍照,并观察计算细胞纯度。以低糖缺氧环境模拟体内缺氧缺血状态,建立大鼠O2A体外缺氧模型,观察O2A在各个时间点的形态学变化,并开展Western blot和免疫组化实验,利用激光共聚焦显微镜测定荧光强度,反映Tau蛋白量的变化。结果:纯化后O2A细胞胞体呈圆形,有单极或双极突起,形成克隆球,A2B5标记阳性,免疫荧光鉴定细胞纯度可达85%以上。随着暴露在低糖缺氧环境中时间的延长,O2A细胞数量逐渐减少,突起逐渐缩短,免疫荧光强度和灰度值均逐渐减弱,Tau蛋白量呈减少趋势。结论: 1.通过体外进行纯化、培养,可以获得较高纯度的O2A细胞;2.随着低糖缺氧时间的延长,O2A形态发生变化;到缺氧12小时,大部分的O2... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

重悬后混合胶质细胞大多数细胞为单细胞状态，细胞较透亮

混合培养第2d细胞贴满培养瓶底壁，部分细胞开始铺展成片

混合培养第3d细胞开始出现分层现象

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3236520