Notch信号通路在小鼠椎间盘细胞中的差异表达调控作用

发布时间：2017-08-16 10:41

  本文关键词：Notch信号通路在小鼠椎间盘细胞中的差异表达调控作用

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【摘要】：目的 探讨Notch信号转导通路相关分子在小鼠脊椎生长发育过程中的差异性表达谱，并进一步研究Notch信号分子Dll-1和Jag-1对BMP-2诱导椎间盘髓核（nucleus pulpous, sNP）细胞体外成软骨分化的影响。 方法 采用RT-PCR检测各不同发育年龄段小鼠椎间盘的Notch信号分子表达情况，分析筛选出对调控脊椎正常生长发育的重要信号分子Dll-1、Jag-1，并采用免疫组织化学方法进一步验证。重组腺病毒介导Dll-1、Jag-1、BMP-2在HEK293细胞中包装扩展获得高滴度病毒，，将NP细胞分为Ad-GFP+Ad-RFP对照组（A组）、Ad-BMP-2+Ad-RFP组（B组）、Ad-BMP-2+Ad-Dll-1组（C组）、Ad-BMP-2+Ad-Jag-1组（D组），RT-PCR检测BMP2、Dll-1、Jag-1在其中的表达水平，检测软骨细胞特征性产物蛋白聚糖（aggrecan,ACAN）和Ⅱ型胶原（collagen typeⅡ,COL2A1)的表达，甲苯胺蓝染色检测软骨基质分泌情况。 结果 1、小鼠脊椎生长发育过程中，Notch信号分子表达总体呈下降趋势，其中Dll-1、Dll-3、Jag-1下降趋势尤其显著，在调节脊椎发生过程中起重要调节作用。 2、BMP-2过表达可促进NP细胞成软骨分化，致使ACAN和COL2A1表达增高，甲苯胺蓝染色阳性增强。 3、Dll-1、Jag-1二者间有一定的协同刺激表达作用，并且其过表达可显著抑制BMP-2诱导的成软骨分化效应。 结论 Notch信号分子尤其是Dll-1、Jag-1在正常脊椎发生过程中发挥重要调节作用，并对椎间盘软骨细胞的成熟分化有明显负性调节作用。为进一步研究Notch信号转导通路与脊椎发育性疾病的关系奠定了重要基础
【关键词】：Notch信号通路 椎间盘 软骨细胞 BMP-2 重组腺病毒
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R726.8
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-15
• 参考文献12-15
• 第一部分 Notch 信号分子在不同发育阶段的小鼠椎间盘细胞中的差异性表达15-30
• 1 材料与方法15-22
• 2 结果22-26
• 3 讨论26-28
• 参考文献28-30
• 第二部分 Notch 信号对椎间盘软骨细胞调控的研究30-45
• 1 材料与方法30-34
• 2 结果34-40
• 3 讨论40-43
• 参考文献43-45
• 全文总结45-47
• 文献综述47-54
• 参考文献51-54
• 致谢54-55
• 攻读学位期间发表论文55-56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：682853