EPO对宫内感染脑白质损伤新生大鼠脑组织MBP、CD68表达的影响及神经行为学观察

发布时间：2017-08-17 00:28

  本文关键词：EPO对宫内感染脑白质损伤新生大鼠脑组织MBP、CD68表达的影响及神经行为学观察

  更多相关文章： 促红细胞生成素 新生 大鼠 宫内感染 脑白质损伤 MBP CD68

【摘要】：目的探讨重组人促红细胞生成素(reccmbinant human erythropoietin,rhEPO)对宫内感染导致的脑白质损伤(white matter damage,WMD)新生大鼠的神经保护作用。 方法25只受孕Wistar大鼠,按4：1随机分为感染组(n=20)、非感染组(n=5)。孕15天感染组腹腔注射脂多糖300ug/Kg一次,建立宫内感染动物模型；非感染组腹腔注射等量生理盐水。观察两组大鼠早产率、平均每胎活产数及仔鼠出生体重。孕鼠分娩后取胎盘组织行病理检查。感染组中早产鼠及足月仔鼠分别生后即刻随机取6只灌注取脑行HE染色,去除其它早产鼠后将剩余仔鼠随机分为EPO组(n=49,生后即刻腹腔注射5000IU/Kg rhEPO)和感染对照组(n=49,生后即刻腹腔注射等量生理盐水)；非感染组均为足月分娩,取新生鼠49只作为正常对照组(n=49,生后即刻腹腔注射等量生理盐水)。每组分别于生后1、3、7天各组随机选取10只灌注取脑,石蜡包埋,切片后行髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、CD68免疫荧光染色,生后30天利用旷场试验、悬吊试验、斜坡试验及拒俘试验进行神经行为学检测。 结果1、一般情况：感染组有3只孕鼠提前分娩(孕22天前分娩,共产19只仔鼠),早产分娩率为15%；共获得114只足月仔鼠,随后有10只死亡,存活率为91.22%。感染组平均每胎活产数及仔鼠出生体重较非感染组均明显下降,差异具有统计学意义(P0.05)。 2、胎盘病理检测：感染组孕鼠胎盘病理检测可见胎盘内血管明显充血、水肿,并有大量中性粒细胞浸润。 3、脑HE染色：早产鼠脑白质结构疏松化明显,可见神经元呈核小、体积小及少突起的欠分化形态；感染组足月鼠脑白质出现染色淡、结构疏松化改变；神经纤维粗细不均、走向紊乱；非感染组仔鼠脑组织结构清晰。 4、MBP免疫荧光染色：感染对照组、EPO组及正常对照组新生1、3日龄大鼠脑组织未见明显MBP染色,7日龄感染对照组、EPO组与正常对照组比较,MBP表达水平明显下降,各组间差异均具有统计学意义(P0.05)；EPO组较感染对照组MBP表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P0.05)。 5、CD68免疫荧光染色：各组新生1日龄大鼠脑组织未见明显CD68染色,3、7日龄感染对照组、EPO组与正常对照组比较,CD68表达水平明显升高,各组间差异均具有统计学意义(P0.05)；EPO组较感染对照组CD68表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P0.05)。 6、神经行为学检测：感染对照组、EPO组较正常对照组,各项神经行为学检测得分显著降低,各组间差异均具有统计学意义(P0.05)；EPO组各项神经行为学评分显著高于感染对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论1、宫内感染可导致孕鼠早产、仔鼠低出生体重及仔鼠低存活率。 2、腹腔注射LPS后可出现宫内感染相应的胎盘病理改变,成功建立孕鼠宫内感染模型。 3、宫内感染可导致新生大鼠脑白质损伤。 4、新生大鼠脑白质损伤主要表现为少突胶质细胞受损、髓鞘化障碍及小胶质细胞过度活化。 5、EPO可减轻宫内感染新生大鼠脑内少突胶质细胞损伤、髓鞘化障碍,有效抑制小胶质细胞活化,从而减轻脑白质损伤,并可改善神经行为学预后。
【关键词】：促红细胞生成素 新生 大鼠 宫内感染 脑白质损伤 MBP CD68
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R722.1
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 第一章 材料与方法9-14
• 1.1 材料9-10
• 1.1.1 实验动物9
• 1.1.2 实验药品和试剂9-10
• 1.1.3 主要实验仪器及设备10
• 1.2 方法10-14
• 1.2.1 动物实验的分组与处理10-11
• 1.2.2 标本采集11
• 1.2.3 制备脑、胎盘组织切片11-12
• 1.2.4 HE切片制作12
• 1.2.5 免疫荧光染色12
• 1.2.6 神经行为学观察12-14
• 第二章 数据采集与处理14-15
• 第三章 结果15-18
• 3.1 一般情况15
• 3.2 胎盘和脑组织HE染色结果15
• 3.3 MBP、CD68免疫组织化学染色结果15-17
• 3.4 神经行为学检测结果17-18
• 第四章 讨论18-23
• 第五章 结论23-24
• 附图表24-26
• 参考文献26-29
• 综述29-41
• 参考文献36-41
• 攻读学位期间的研究成果41-42
• 致谢42-43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄志恒;孙轶;陈超;;早产儿脑病的研究现状[J];中国当代儿科杂志;2011年10期

2 刘明花;韦红;;早产儿脑室周围白质软化发病机制的研究进展[J];儿科药学杂志;2011年01期

3 章乐;曹敏恺;蒋犁;;中国人群早产儿脑室周围白质软化危险因素的meta分析[J];临床儿科杂志;2011年01期

4 袁天明;新生儿脑白质损伤的病理特点和免疫学机制[J];国外医学.妇幼保健分册;2003年02期

5 康文清;朱长连;熊虹;程秀永;王小阳;;重组人促红细胞生成素治疗新生儿缺氧缺血性脑病的疗效[J];实用儿科临床杂志;2006年02期

6 宋燕燕;孙新;赵小朋;叶青青;李坚;黄志坚;肖华;李智华;杨默;;促红细胞生成素治疗早产儿脑损伤的效果[J];实用儿科临床杂志;2007年06期

7 胡燕;蒋犁;张敏;王婷;何农跃;;促红细胞生成素对脑室周围白质软化新生大鼠髓鞘磷脂蛋白和神经生长相关蛋白的影响[J];实用儿科临床杂志;2010年14期

8 潘广赉;杨明;莫坤梅;谢建红;黄常健;陈忠其;曾婷;;宫内感染与早产儿脑损伤的关系[J];实用儿科临床杂志;2011年05期

9 苏秀霞;;早产儿脑室周围白质软化的研究进展[J];实用全科医学;2006年03期

10 邝素华;史雪川;罗敏洁;李建宏;马廉;;促红细胞生成素对缺氧缺血新生鼠脑损伤学习记忆能力的影响[J];中国新生儿科杂志;2007年05期

，

本文编号：686308