藏红花素对正常儿童外周血淋巴细胞DNA损伤及修复的影响

发布时间：2017-08-28 23:28

  本文关键词：藏红花素对正常儿童外周血淋巴细胞DNA损伤及修复的影响

  更多相关文章： 藏红花素 阿糖胞苷 维生素C 单细胞凝胶电泳实验 姐妹染色单体分化染色法 藏红花素 阿糖胞苷 维生素C 单细胞凝胶电泳实验 姐妹染色单体分化染色法

【摘要】：第一部分：藏红花素对正常儿童外周血淋巴细胞DNA损伤的影响 目的探讨藏红花素(crocin)是否对正常儿童外周血淋巴细胞DNA有损伤作用。方法无菌条件下用生理盐水配制crocin、阿糖胞苷(cytarabine,Ara-c)及维生素C(vitamin C, zel C)溶液,分为对照组及实验组,对照组包括空白对照A组(crocin.0)、阳性对照B组(Ara-c0.25mg/ml)、阴性对照C组(zel C0.4mg/ml);实验组为D组,按crocin浓度的不同分为D1(0.625mg/ml)、D2(1.25mg/ml)、D3(2.5mg/ml)、D4(5mg/ml)。Ficoll密度梯度离心法提取正常儿童外周血淋巴细胞,将提取的淋巴细胞分别培养于以上各组的培养液中,培养72小时后收获细胞,单细胞凝胶电泳观察淋巴细胞尾部DNA百分比(tail DNA%,TDNA)、尾矩(tail moment, TM)及尾长(tail length, XL),姐妹染色单体分化染色法测定姐妹染色单体交换数(SCE)。 结果 (1)淋巴细胞尾部DNA百分比对照组A、B、C组分别为(6.14±2.12)%、(12.67±3.36)%、(6.11±2.08)%,B组明显高于A、C组(p0.05),A组与C组之间无显著性差异(t=1.012,p0.05)。实验组D1-D4组分别为(6.15±2.1.4)%、(6.10±2.13)%、(6.13±2.12)%、(11.44±4.17)%,D4组明显高于Dl-D3组(p0.05),Dl、D2、D3组间无显著性差异(F=1.642,p0.05),与A组及C组比较亦无显著性差异(p0.05)。B组明显高于D1-D3组(p0.05),D4组与B组比较无显著性差异(t=1.305,p0.05)。 (2)尾矩对照组A、B、C组分别为1.25±0.46、2.41±0.75、1.28±0.46,B组明显高于A、C组(p0.05),A组与C组之间无显著性差异(t=1.412,p0.05)。实验组D1-D4组分别为1.27±0.47、1.26±0.45、1.25±0.45、2.36±0.77,D4组明显高于D1-D3组(p0.05),D1、D2、D3组间无显著性差异(F=1.752,p0.05),与A组及C组比较亦无显著性差异(p0.05)。B组明显高于D1-D3组(p0.05),D4组与B组比较无显著性差异(t=1.215,p0.05)。 (3)尾长对照组A、B、C组分别为1.04±0.30、3.47±0.71、1.06±0.39um,B组明显高于A、C组(p0.05),A组与C组之间无显著性差异(t=0.912,p0.05)。实验组D1-D4组分别为1.05±0.34、1.01±0.35、1.03±0.38、3.39±0.77um,D4组明显高于Dl-D3组(p0.05), D1、 D2、D3组间无显著性差异(F=2.012,p0.05),与A组及C组比较亦无显著性差异(p0.05)。B组明显高于Dl-D3组(p0.05),D4组与B组比较无显著性差异(t=1.105,p0.05)。 (4)姐妹染色单体交换数对照组A、B、C组分别为1.96±1.27、4.00±2.23、2.17±1.20,B组明显高于A、C组(p0.05),A组与C组之间无显著性差异(t=1.412,p0.05)。实验组D1-D4组分别为1.84±1.29、1.97±1.11、1.93±1.15、3.93±1.95,D4组明显高于Dl-D3组(p0.05),D1、D2、D3组间无显著性差异(F=1.732,p0.05),与A组及C组比较亦无显著性差异(p0.05)。B组明显高于D1-D3组(p0.05),D4组与B组比较无显著性差异(t=2.005,P0.05)。 结论1.当crocin浓度为0.625～2.5mg/ml时,淋巴细胞尾部DNA百分比、尾矩、尾长及组妹染色单体交换数与空白对照组(A)及阴性对照组(C)无显著性差异,提示该范围内crocin对正常儿童外周血淋巴细胞DNA无损伤作用：2.当crocin浓度为5mg/ml时,淋巴细胞尾部DNA百分比、尾矩、尾长及姐妹染色单体交换数均明显高于空白对照组(A)及阴性对照组(C),提示该浓度crocin对正常儿童外周血淋巴细胞DNA有损伤作用。第二部分：藏红花素对正常儿童外周血淋巴细胞DNA损伤后修复韵研究 目的探讨藏红花素(crocin)对阿糖胞苷(cytarabine, Ara-c)损伤后的淋巴细胞有无DNA修复作用。 方法无菌条件下用生理盐水配制crocin、阿糖胞苷(cytarabine, Ara-c)及维生素C(vitamin C, zel C)溶液,分A-E组：A组(crocin2.5mg/ml)、B组(crocin2.5mg/ml+Ara-c0.25mg/ml)、C组(zel C0.4mg/ml)、D组(Ara-c0.25mg/ml)、E组(zel C0.4mg/ml+Ara-c0.25mg/ml)。Ficoll密度梯度离心法提取正常儿童外周血淋巴细胞,将提取的淋巴细胞分别培养于以上各组的培养液中,培养72小时后分别收获细胞,行单细胞凝胶电泳实验观察淋巴细胞尾部DNA百分比(tail DNA%, TDNA).尾矩(tail moment, TM)、尾长(tail length,TL),行姐妹染色单体分化染色法测定姐妹染色单体交换数(SCE)。 结果 (1)淋巴细胞尾部DNA百分比A-E组分别为(6.13±2.12)%、(6.15±2.14)%、(6.10±2.13)%、(12.67±3.36)%、(6.14±2.14)%,各组间差异具有统计学意义(F=12.518,p0.05)。A-C组及E组均明显低于D组(p均0.05),而B组与E组比较,无显著性差异(p0.05)； (2)尾矩A-E组分别为1.25±0.46、1.28±0.45、1.24±0.45、2.41±0.75、1.22±0.45,各组间差异具有统计学意义(F=16.237,p0.05)。A-C组及E组均明显低于D组(p均0.05),而B组与E组比较,无显著性差异(p0.05)； (3)尾长A-E组分别为1.03±0.38、1.08±0.36、1.04±0.30、3.47±0.71、1.09±0.38umm,各组间差异具有统计学意义(F=11.971,p0.05)。A-C组及E组均明显低于D组(p均0.05),而B组与E组比较,无显著性差异(p0.05)； (4)姐妹染色单体交换数A-E组分别为1.93±1.15、2.33±1.41、2.17±1.20、4.00±2.23、2.21±1.39,各组间差异具有统计学意义(F=18.117,p0.05)。A-C组及E组均明显低于D组(p均0.05),而B组与E组比较,无显著性差异(p0.05)； 结论0.25mg/ml Ara-c可造成淋巴细胞DNA损伤,而2.5mg/ml crocin与Ara-C共同作用于淋巴细胞时,淋巴细胞尾部DNA百分比、尾矩、尾长及姐妹染色单体交换数均较Ara-c单独培养时降低,提示该浓度crocin寸Ara-c损伤后的淋巴细胞存在DNA修复作用。
【关键词】：藏红花素 阿糖胞苷 维生素C 单细胞凝胶电泳实验 姐妹染色单体分化染色法 藏红花素 阿糖胞苷 维生素C 单细胞凝胶电泳实验 姐妹染色单体分化染色法
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R285;R272
【目录】：

• 摘要2-6
• Abstract6-12
• 缩略词索引表12-13
• 第一部分：藏红花素对正常儿童外周血淋巴细胞DNA损伤的影响13-24
• 引言13
• 第一章 材料与方法13-16
• 1.1 材料13-14
• 1.2 方法14-16
• 第二章 结果16-20
• 2.1 单细胞凝胶电泳实验结果16-17
• 2.2 姐妹染色单体分化染色法结果17-20
• 第三章 讨论20-22
• 第四章 结论22
• 参考文献22-24
• 第二部分：藏红花素对正常儿童外周血淋巴细胞DNA损伤后修复的研究24-33
• 引言24
• 第一章 材料与方法24-26
• 1.1 材料24-25
• 1.2 方法25-26
• 第二章 结果26-30
• 2.1 单细胞凝胶电泳实验结果26
• 2.2 姐妹染色单体分化染色法结果26-30
• 第三章 讨论30-31
• 第四章 结论31
• 参考文献31-33
• 综述33-41
• 综述参考文献39-41
• 攻读学位期间的研究成果41-42
• 致谢42-43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 熊桂兰,刘冰,刘军,刘洋;人参合剂的抗诱变作用[J];吉林大学学报(医学版);2005年05期

2 赵培;罗春丽;吴小候;胡宏波;吕纯芳;冀慧莹;;藏红花素对人膀胱移行细胞癌T24细胞裸鼠移植瘤的实验研究[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2008年03期

3 龚青;石丁波;蔡卫斌;杨中汉;谭维格;廖彩韵;彭超;刘畅;高国全;杨霞;;藏红花素诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其作用机制[J];中华肿瘤防治杂志;2009年19期

4 赵国华,董定龙,王德启,艾晓清,浦卫东,胡宝友,穆庆梅,李学东;接触低浓度苯系混合物作业工人细胞微核率及染色体断裂率的观察[J];现代预防医学;1997年04期

5 徐慧娟;仲任;赵艳霞;李学荣;卢愿;宋爱琴;庞秀英;姚如永;孙立荣;;藏红花素对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用及其机制[J];中国实验血液学杂志;2010年04期

6 吴强,施诚仁,沈敏,李敏,陈颖,顾鹤定;藏红花浸出液通过CD95/CD95-L途径诱导神经母细胞瘤发生凋亡[J];中华小儿外科杂志;2003年04期

7 周振英，，林琳，戴亮，蔡逸云，张军妮，余世俊;X射线工作者外周血细胞DNA含量检测和染色体畸变分析[J];中国优生与遗传杂志;1994年01期

本文编号：750124