内毒素血症对大鼠肺肾功能及水通道蛋白表达的影响

发布时间：2017-09-01 15:20

  本文关键词：内毒素血症对大鼠肺肾功能及水通道蛋白表达的影响

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【摘要】：目的研究内毒素血症大鼠肺肾组织相关损伤指标及水通道蛋白（AQPs）表达变化，探讨AQPs在急性肺肾损伤中的作用及肺肾间可能存在的交互作用机制 方法将SPF级二月龄雄性wistar大鼠48只按完全随机法分为对照组（NC）、脂多糖组(LPS)，通过尾静脉注射脂多糖（LPS）5mg/kg构建内毒素血症大鼠模型，NC组同时注射相应剂量生理盐水。各组于造模成功后2h、6h、12h、24h处死，采集血液标本及肺肾组织标本，观察肺脏大体标本，，通过肺湿/干重比（W/D）及HE染色观察肺脏病理检测肺功能损伤指标；通过血生化仪测定血清肌酐、尿素含量及HE染色观察肾脏病理检测肾功能损伤指标；酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清TNF-α水平；用荧光定量PCR（Real-Time PCR）检测肺组织AQP1、AQP5和肾组织AQP1mRNA的表达；用Western印迹、免疫组化染色检测肺组织AQP1、AQP5和肾组织AQP1蛋白的表达。 结果1.肺组织W/D显示2h、6h、12h点LPS组明显高于对照组（P0.01），12h升高最明显；2.大体标本观察示LPS组较对照组肺体积增大，6h、12h明显，肺组织表面可见点状出血灶，以24h明显；HE染色示LPS组6h、12h肺组织出现明显肿胀性改变，至12h、24h出现出血灶、炎症细胞团聚集的病理性改变；3.各时点LPS组血清UREA及CRE明显高于对照组(P0.01，P0.05)；4.肾脏组织病理示在LPS造模后6h、12h肾小管出现明显水肿性改变；5.2h、6h、12h点LPS组血清TNF-α明显高于对照组（P0.01，P0.05）；6.LPS组各时点肺组织AQP1及AQP5mRNA、肾脏AQP1mRNA表达水平均较对照组明显下调（P0.01）。7.Western blot显示LPS组各时点肺组织AQP1及AQP5蛋白、肾脏AQP1蛋白表达水平均较对照组明显下调（P0.01），免疫组化亦显示LPS组各时点肺肾组织AQP1蛋白表达较对照组明显减弱。8.相关分析显示：肺组织AQP1mRNA、AQP5mRNA表达水平与肾组织AQP1mRNA表达水平间存在直线正相关（P0.01）；肺组织AQP1mRNA、AQP5mRNA表达水平与肺W/D比值存在直线负相关（P0.01）；肾组织AQP1mRNA表达水平与血清肌酐存在直线负相关（P0.01）；肺组织AQP1mRNA、AQP5mRNA表达水平及肾组织AQP1mRNA表达水平与血清TNF-α存在直线负相关（P0.01） 结论1.内毒素血症早期即同时存在肺肾损伤。2.内毒素诱导急性肺肾损伤下存在水通道蛋白表达改变，水通道蛋白可作为临床早期监测指标。3.急性肺肾同时损伤下肺肾间水通道蛋白改变具有一定相关性。4.内毒素可促发TNF-α释放，TNF-α等炎症因子可能通过影响水通道蛋白变化，进一步加重ALI/AKI。
【关键词】：内毒素 水通道蛋白 急性肺损伤 急性肾损伤 肺肾交互作用
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R725.6;R726.9
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料和方法11-26
• 1. 实验材料11-15
• 2. 实验方法15-25
• 3. 统计学处理25-26
• 结果26-47
• 讨论47-52
• 结论52-53
• 参考文献53-59
• 致谢59-60
• 综述60-69
• 参考文献65-69

【参考文献】

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1 焦光宇,李尔然,于润江;内毒素诱导的急性肺损伤大鼠呼吸膜AQP1及AQP5表达的研究(英文)[J];Chinese Medical Journal;2002年07期

2 谭利平;许峰;匡凤梧;;水通道蛋白5在高氧肺损伤中的表达及调节机制[J];中国危重病急救医学;2006年08期

本文编号：772848