组蛋白H3乙酰化介导TGFβ2上调H9C2细胞转录因子的研究

发布时间：2017-09-20 11:47

  本文关键词：组蛋白H3乙酰化介导TGFβ2上调H9C2细胞转录因子的研究

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【摘要】：目的： 探讨转化生长因子β2（transforming growth factor beta2，TGFβ2）对大鼠胚胎心肌细胞H9C2心脏发育相关核心转录因子Mef2c和GATA4表达的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系。 材料与方法： 比较TGFβ2对细胞生长的影响。利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏发育相关核心转录因子Mef2c和GATA4mRNA的相对表达量，筛选合适的TGF-β2干预浓度。采用Western blot检测H9C2细胞组蛋白H3乙酰化水平乙酰化H3（acetylated histone H3，acH3）的差异。染色质免疫共沉淀（Chromatin immunoprecipitation，ChIP）Real-timePCR检测Mef2c和GATA4启动子区与acH3结合DNA的相对表达水平。比色分析法检测TGF-β2对心肌细胞的总体组蛋白乙酰化酶（histoneacetyltransferase，HATs）活性的影响。 结果： ①TGF-β2干预组相对于对照组心肌细胞的增殖能力增强（P0.05）。②心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4mRNA的相对表达量随着TGF-β2浓度的升高呈现先升高后降低的趋势，，在5μg/L的浓度时均达到最高，Mef2c mRNA相对表达量是对照组的1.8倍，GATA4mRNA是对照组的2.3倍（P0.05）。③T GF-β2干预72h后acH3水平是对照组的4倍（P 0.05），HATs活性是对照组的1.34倍（P 0.05）。④TGF-β2干预组Mef2c和GATA4启动子区组蛋白H3的乙酰化水平分别是对照组的2.56和2.16倍（P 0.05）。 结论： TGF-β2可以促进心肌细胞H9C2的分裂与增殖，并上调心脏相关转录因子Mef2c和GATA4的表达,该作用可能由组蛋白H3乙酰化介导。
【关键词】：TGF-β2 心肌细胞H9C2 组蛋白H3 乙酰化 表观遗传学
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R725.4
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 TGF-β2 对 H9C2 心脏核心转录因子 Mef2c 和 GATA4 mRNA 表达和细胞增殖的影响13-28
• 1 材料与方法13-18
• 2 实验结果18-26
• 3 讨论26-27
• 4 小结27-28
• 第二部分 TGFβ2影响H9C2心脏发育核心转录因子的组蛋白H3乙酰化的调控机制28-50
• 1 材料与方法28-40
• 2 实验结果40-47
• 3 讨论47-49
• 4 小结49-50
• 全文总结50-52
• 参考文献52-56
• 文献综述56-68
• 参考文献63-68
• 致谢68-69
• 攻读硕士期间发表的论文69-70

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 朱静;冯川;李莉;邓兵;田杰;张晓萍;;干扰组蛋白乙酰化引发间充质干细胞心肌定向分化特定蛋白的异常表达[J];第三军医大学学报;2008年04期

2 常在;杨中州;;心脏发育过程中的信号调控机制研究[J];生命科学;2007年04期

本文编号：887873