叶酸受体靶向对比剂磁共振显像实验研究

发布时间：2020-05-08 13:58

【摘要】： 第一部分Folate-BSA-Gd-DTPA的制备目的：制备BSA-Gd-DTPA和folate-BSA-Gd-DTPA，测定成分并作叶酸受体磁共振显像和化学荧光显像。方法：DTPA与乙酸酐形成的DTPA双酸酐，以摩尔比50∶1与BSA合成BSA-DTPA，后者再与GdCl_3螯合，透析分离游离的Gd~(3+)，得到BSA-Gd-DTPA。叶酸与EDC反应，再以摩尔比10∶1共价耦联上BSA-Gd-DTPA。采用电感耦合等离子体原子发射光谱仪测量BSA-Gd-DTPA中Gd~(3+)的含量。采用紫外可见光分光光度仪测量folate-BSA-Gd-DTPA中叶酸的含量。人肝癌细胞SMMC-7721与folate-BSA-Gd-DTPA、BSA-Gd-DTPA和Gd-DTPA结合后行磁共振T1加权扫描，对其信号作定性分析。将BSA和folate-BSA标记上FITC，与SMMC-7721结合后作荧光显像。结果：成功制备了BSA-Gd-DTPA和folate-BSA-Gd-DTPA。BSA-Gd-DTPA中Gd~(3+)的含量为11.01mg，Gd~(3+)的联接率为70％，装载量为8.47％。Folate-BSA-Gd-DTPA中叶酸的含量为63.27mg。T1加权图像示SMMC-7721结合folate-BSA-Gd-DTPA产生的信号高于BSA-Gd-DTPA和Gd-DTPA，并且，结合folate-BSA-Gd-DTPA产生的信号随SMMC-7721浓度的减小而减小。FITC-folate-BSA可使SMMC-7721细胞膜荧光染色，而FITC-BSA则无明显荧光染色。结论：Folate-BSA-Gd-DTPA可作为叶酸受体靶向磁共振对比剂应用。第二部分Folate-BSA-Gd-DTPA对正常小鼠的磁共振显像目的：研究folate-BSA-Gd-DTPA对正常小鼠的磁共振显像表现、体内分布及代谢特点。方法：将30只小鼠随机分为三组，分别给予Gd-DTPA、BSA-Gd-DTPA和folate-BSA-Gd-DTPA。采用1.5T MRI行T2加权和T1加权平扫，以及注射这三种对比剂后15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、18h和24h的T1加权增强扫描，测量平扫与增强后各个时间点下腔静脉、肝脏、肌肉和肾脏皮质的T1加权信号，比较上述部位的相对强化率，并观察胆囊腔内对比剂的显示情况。结果：三组下腔静脉的相对强化率在增强后15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h和12h差异有统计学意义。三组肝脏的相对强化率在增强后15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、18h和24h差异有统计学意义。三组肌肉的相对强化率在增强后30min和1h差异有统计学意义。三组肾脏皮质的相对强化率在增强后15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、18h和24h差异有统计学意义。Folate-BSA-Gd-DTPA组肾脏皮质的相对强化率在增强后4h、6h、8h、12h、18h和24h高于BSA-Gd-DTPA组。BSA-Gd-DTPA组和folate-BSA-Gd-DTPA组在增强后18h和24h，分别有80％和90％在胆囊腔内显示高信号对比剂。结论：BSA-Gd-DTPA和folate-BSA-Gd-DTPA可使血管、肝脏和肾脏皮质明显持续地强化，部分可经肝胆途径排泄。Folate-BSA-Gd-DTPA可实现肾脏皮质的磁共振靶向显像。第三部分Folate-BSA-Gd-DTPA对肝癌原位移植裸鼠的磁共振显像目的：研究folate-BSA-Gd-DTPA对肝癌原位移植裸鼠的磁共振显像表现，探讨其对肝癌靶向诊断的价值。方法：人肝癌细胞SMMC-7721培养扩增，将含有1.0×10~7个活细胞的悬液0.2ml接种于裸鼠腋部背侧皮下。当皮下肿瘤形成后行手术切除，剪成0.5mm~3大小瘤块，接种于裸鼠肝脏。将肝癌原位移植术后3-4周的20只裸鼠随机分为两组，分别给予BSA-Gd-DTPA和folate-BSA-Gd-DTPA。采用1.5T MRI行T2加权和T1加权平扫，以及注射这两种对比剂后15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、18h和24h的T1加权增强扫描，测量平扫与增强后各个时间点肿瘤、肝脏和肾脏皮质的T1加权信号，比较肿瘤的相对强化率，并观察肿瘤—肝脏对比噪声比的变化规律。分析肿瘤在注射这两种对比剂后的强化表现，与病理结果作对照。结果：裸鼠肝癌原位移植均获得成功。所有20个肿瘤均被MRI检出，大小7.4mm×6.8mm-14.8mm×12.1mm。增强后2h、4h、6h、8h、12h、18h和24h，folate-BSA-Gd-DTPA组肿瘤的相对强化率高于BSA-Gd-DTPA组。Folate-BSA-Gd-DTPA组的肿瘤—肝脏对比噪声比在增强后8h达到高峰。Folate-BSA-Gd-DTPA组肿瘤内部强化超过肝脏实质，而BSA-Gd-DTPA组则始终低于肝脏实质。肿瘤的强化方式与其大小和病理有关。结论：Folate-BSA-Gd-DTPA可实现肝癌的磁共振靶向显像，具有定性诊断的价值。
【图文】：

信号,肾脏皮质,肌肉,肝脏

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【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R445.2

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