xCT调节肝癌细胞转移的作用机制研究

发布时间：2017-04-24 23:16

  本文关键词：xCT调节肝癌细胞转移的作用机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究目的： 肝癌是世界范围内最常见的10种恶性肿瘤之一,在我国肝癌是死亡率仅次于胰腺癌的第二大常见恶性肿瘤,肝癌初期症状不明显,晚期主要表现为肝痛、腹水、乏力、消瘦等症状。由于肝癌早期不易发现,晚期患者癌细胞易扩散,所以临床上一般采用的放化疗、外科手术与肝移植等手段治愈率较低,因此对于肝癌细胞转移机制的研究显得尤为重要,然而目前对于肝癌细胞转移的机制还不清楚。近期研究发现,很多肿瘤细胞中xCT的表达明显升高,xCT是Xc-氨基酸转运系统的功能性亚基,对于维持细胞内GSH(谷胱甘肽)的含量和细胞的氧化还原状态起着重要的作用。近年来,研究发现xCT与多种癌症的发生发展及转移有着密切的关系,但其与肝细胞癌的转移的关系尚未报道,因此本研究主要探讨人类肝细胞癌中xCT的表达对肿瘤细胞转移的影响及其机制。 研究方法： 用逆转录PCR检测不同转移能力的人乳腺癌、人肝癌和小鼠黑色素瘤细胞中xCT的表达水平,分析xCT的表达与三种癌细胞转移能力的关系；用xCT特异性抑制剂SASP处理高转移肝癌细胞,Western Blot和RT-PCR方法检测自噬标志物以及EMT过程相关标志物的表达水平,并用伤口愈合实验和Transwell检测xCT的活性与肝癌细胞转移能力的关系；将xCT抑制剂SASP分别与自体吞噬(自噬)抑制剂3-MA和还原剂B-ME联合用药处理细胞,抑制自噬的发生,进一步分析xCT的活性与自噬及EMT的关系。 结果： 第一部分： 1.人肝癌细胞与小鼠黑色素瘤细胞中xCT的表达水平高于人正常肝细胞与小鼠黑色素细胞中xCT的表达水平。 2.人高转移肝癌细胞、乳腺癌细胞和小鼠高转移黑色素瘤细胞中xCT的表达水平分别高于人低转移肝癌细胞和小鼠低转移黑色素瘤细胞中xCT的表达水平。 3.抑制高转移癌细胞中xCT的活性后,癌细胞的转移能力降低。 第二部分： 1.利用xCT的特异性抑制剂SASP处理人高转移肝癌细胞97H,可以降低细胞的转移能力。 2.用SASP处理97H细胞使xCT活性降低,能够诱导其发生自噬。 3.肝癌细胞97H的自噬过程伴随Snail的降解,并抑制细胞发生EMT过程。 4.在肝癌细胞97H中,通过抑制自噬的发生,可以减少Snail的降解以及减弱对EMT过程的抑制。 结论： 1.xCT在人乳腺癌、人肝癌和小鼠黑色素瘤细胞中的表达上调,而且与肿瘤细胞转移能力呈正相关。 2.xCT通过调节人类高转移肝癌细胞97H发生自噬,降解细胞中的转录因子Snail,从而减弱EMT过程的发生并降低人类高转移肝癌细胞的转移能力。
【关键词】：xCT 肝癌细胞 自噬 上皮间质化 转移
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R735.7;R730.44
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 目录8-10
• 缩略语10-11
• 前言11-14
• 研究现状、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 一、xCT与癌细胞迁移能力的关系14-27
• 1.1 对象和方法14-20
• 1.1.1 实验对象14
• 1.1.2 实验仪器及试剂14-17
• 1.1.3 实验方法17-20
• 1.2 结果20-24
• 1.2.1 xCT在正常细胞与癌细胞中的表达20-21
• 1.2.2 xCT在不同转移能力的癌细胞中的表达21-22
• 1.2.3 抑制xCT的活性可以抑制高转移潜能癌细胞的迁移22-24
• 1.3 讨论24-26
• 1.4 小结26-27
• 二、xCT调节肝癌细胞转移的作用机制研究27-46
• 2.1 对象和方法27-35
• 2.1.1 实验对象27
• 2.1.2 实验仪器及试剂27-30
• 2.1.3 实验方法30-35
• 2.2 结果35-41
• 2.2.1 xCT的表达与不同转移能力肝癌细胞的关系35
• 2.2.2 抑制xCT的活性可以抑制肝癌细胞97H的迁移和侵袭35-37
• 2.2.4 抑制xCT的活性可使肝癌细胞97H发生自噬37-38
• 2.2.5 抑制自噬的发生可以降低Snail的分解38-39
• 2.2.6 xCT通过自噬调节肝癌细胞97H迁移和侵袭39-41
• 2.3 讨论41-45
• 2.4 小结45-46
• 结论46-47
• 参考文献47-52
• 发表论文和参加科研情况说明52-53
• 综述 ROS调控自噬的发生53-69
• 综述参考文献63-69
• 致谢69

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 曹景利;朱学良;;上皮细胞极性的建立和维持[J];中国细胞生物学学报;2010年02期

  本文关键词：xCT调节肝癌细胞转移的作用机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：325177