MicroRNA-210参与子痫前期发病的作用机制研究

发布时间：2017-10-18 02:05

  本文关键词：MicroRNA-210参与子痫前期发病的作用机制研究

  更多相关文章： MicroRNA-210 胎盘 子痫前期 钾离子通道调控因子1 1型血小板反应蛋白7A 肿瘤坏死因子-α 细胞侵润

【摘要】：先兆子痫(Preeclampsia, PE),也称子痫前期,是妊娠期间特有的重大疾病之一,大约危害到世界范围内7-10%的妊娠妇女,它的临床症状主要表现为妊娠妇女在20周以后出现高血压并伴随有蛋白尿。研究者们一致公认,胎盘发育障碍是引起子痫前期发病的重要原因。到目前为止,许多研究者已经发现有许多miRNAs分子在子痫前期患者的胎盘及外周血中异常表达,这些研究结果提示我们miRNAs的异常表达可能参与子痫前期疾病的发生。近年来,研究者们发现microRNA-210 (miR-210)在子痫前期患者的胎盘中异常高表达。然而,miR-210如何参与子痫子痫前期的发生仍需进一步探究。所以本研究重点在于探究miR-210参与子痫前期发生的作用机制。在本研究中,miR-210、钾离子通道调控因子1(Potassium Channel Modulatory Factor 1, KCMF1)和1型血小板反应蛋白7A (Thrombospondin Type I Domain Containing 7A, THSD7A)在子痫前期患者胎盘中的表达与其在正常妊娠患者胎盘中的表达进行了比较。并且进一步在人类永生化滋养层细胞系HTR8/SVneo研究了miR-210通过调控KCMF1和THSD7A的表达从而影响到滋养层细胞的侵润功能。与正常妊娠胎盘相比,KCMF1和THSD7A在子痫前期患者胎盘中显著下调,并与miR-210的表达情况呈负相关。通过利用生物信息学预测、实时定量PCR、蛋白免疫印迹以及双荧光素酶报告实验,miR-210在滋养层细胞系HTR8/SVneo中靶向调控KCMF1和THSD7A。MiR-210抑制滋养层细胞的侵润,并且过表达KCMF1可以挽救miR-210对滋养层细胞侵润功能的抑制作用。MiR-210的抑制剂对滋养层细胞的侵润功能具有促进作用,并且此促进作用可以通过THSD7A特异的小干扰RNA得以挽救。在HTR8/SVneo细胞中,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α, TNFα)能促进miR-210的表达却抑制KCMF1的表达。低氧能够诱导miR-210表达水平的上升,却抑制THSD7A的表达。本研究的结果表明,在人类胎盘中,异常高表达的miR-210可能通过干扰KCMF1和THST7A所介导的信号通路从而参与子痫前期疾病的发生。本研究为进一步探究子痫前期的发病机制提供了新思路。
【关键词】：MicroRNA-210 胎盘 子痫前期 钾离子通道调控因子1 1型血小板反应蛋白7A 肿瘤坏死因子-α 细胞侵润
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714.244
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一篇 文献综述9-17
• 第一章 人类胎盘滋养层细胞分化的途径概述9-13
• 1.1 滋养层细胞的融合-向多核合胞体滋养层细胞分化的途径进行分化10
• 1.2 滋养层细胞沿着入侵途径进行分化10-13
• 第二章 子痫前期发病机制概述13-17
• 2.1 子痫前期疾病概述13-14
• 2.2 由缺氧-复氧导致的组织损伤概述14-15
• 2.3 MicroRNAs差异表达与子痫前期发生之间的关系概述15-17
• 第二篇 研究论文17-53
• 第一章 材料和方法17-27
• 1.1 受试者17-18
• 1.2 细胞培养与瞬时转染18-19
• 1.3 RNA提取、反转录以及实时定量PCR(qRT-PCR)19-22
• 1.4 蛋白免疫印迹实验22-23
• 1.5 质粒、抗体及试剂23-24
• 1.6 表达载体的构建24
• 1.7 双荧光素酶报告实验,即Luciferase activity assay24-25
• 1.8 细胞侵润实验25-26
• 1.9 免疫组织化学实验26
• 1.10 统计学分析26-27
• 第二章 MicroRNA-210通过靶向调控KCMF1参与子痫前期的发生27-43
• 前言27-29
• 结果与讨论29-43
• 结果29-40
• 2.1 KCMF1和miR-210在先兆子痫患者以及正常妊娠妇女胎盘中差异表达的研究29-31
• 2.2 KCMF1在胎盘中的定位研究31-33
• 2.3 MiR-210在滋养层细胞中的靶向调控KCMF1基因33-35
• 2.4 MiR-210影响HTR8/SVneo功能研究35-37
• 2.5 过表达KCMF1能够“拯救”miR-210对HTR8/SVneo细胞侵润功能的抑制作用37-38
• 2.6 MiR-210对KCMF1的抑制作用受TNF-α所调控38-40
• 讨论40-43
• 第三章 低氧诱导的miR-210通过靶向调控THSD7A从而抑制滋养层细胞的侵润功能43-53
• 前言43-44
• 结果与讨论44-53
• 结果44-51
• 3.1 THSD7A在先兆子痫患者胎盘以及正常妊娠妇女胎盘之间的差异表达研究44-45
• 3.2 THSD7A分子在人类胎盘中定位研究45-46
• 3.3 MiR-210在HTR8/SVneo细胞中能够靶向调控THSD7A46
• 3.4 在HTR8/SVneo细胞中,THSD7A是miR-210的功能性靶基因46-49
• 3.5 MiR-210对THSD7A的靶向作用受低氧所诱导调控49-51
• 讨论51-53
• 结论与展望53-54
• 参考文献54-63
• 缩略词表63-65
• 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果65-66
• 致谢66

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 桑翠琴;张震宇;王淑珍;刘浩;郭淑丽;;重度子痫前期/子痫合并急性呼吸窘迫综合征的诊断与处理[J];中国医刊;2006年10期

2 赵桂花;;重度子痫前期与子痫82例临床分析[J];临床医药实践杂志;2007年01期

3 杨小颀;严妮子;;子痫前期与血钙水平相关性研究[J];实用临床医学;2007年04期

4 杨小颀;严妮子;;子痫前期与血钙水平相关性研究[J];四川生理科学杂志;2007年01期

5 陈茜;王泽华;;子痫前期的预测及预防[J];华中医学杂志;2007年03期

6 朱倩;;对38例子痫前期(重)、子痫治愈的体会[J];实用预防医学;2007年05期

7 梁英;周丽丽;甘娟;姜碧洋;杨承东;;重度子痫前期在产科ICU监护救治的临床分析[J];中国妇幼保健;2008年19期

8 詹卫星;郑九生;;血管紧张素转换酶基因多态性与重度子痫前期及肾功能损害的关系[J];江西医药;2008年08期

9 蔡颖;尹国武;姜锋;李怡;闵保华;王s，

本文编号：1052315