异紫堇碱在宫颈癌SiHa细胞中通过逆上皮间充质转化途径实现抗癌作用

发布时间：2017-11-28 23:20

  本文关键词：异紫堇碱在宫颈癌SiHa细胞中通过逆上皮间充质转化途径实现抗癌作用

  更多相关文章： Si Ha细胞 异紫堇碱(ICD) 逆上皮间充质转化(MET) 上皮间充质转化(EMT) 细胞周期阻滞

【摘要】：背景与目的:宫颈癌是全世界导致妇女死亡的最主要恶性肿瘤之一,近年来发病率呈明显上升趋势,发病年龄亦趋于年经化。宫颈癌的治疗目前仍以手术治疗为主,辅以化学药物治疗和放射治疗。但手术切除创伤较大,功能受损严重;放化疗常常伴有严重的并发症,且医疗费用昂贵,疗效不甚满意。近年来研究发现,HPV16亚型感染是激发宫颈上皮恶性转化的最主要因素,但目前尚无抑制HPV基因表达和功能活性的有效方法,若能解决这一难题,将是宫颈癌防治工作的一大突破。异紫堇碱(Isocorydine,ICD)是在秃疮花中发现的一种异喹啉类生物碱单体,可从植物中直接提取也可化学合成制得。已有研究发现异紫堇碱可以在体外抑制携带不同HPV亚型的人宫颈癌Hela和Si Ha细胞株中E6、E7基因的表达,本文旨在研究异紫堇碱抑制HPV16E6表达的具体作用和机制,此研究的深入可能使异紫堇碱成为一种治疗HPV感染和宫颈癌的新的有效中药单体,或为以其为基础设计一类新药提供理论依据。方法:体外培养携带HPV16E6的Si Ha细胞,利用MTT实验初步检测异紫堇碱对Si Ha细胞活性产生的影响,并通过流式细胞学方法检测处理后的Si Ha细胞凋亡和细胞周期的改变。采用全基因组基因芯片表达谱技术测定异紫堇碱处理后的Si Ha细胞株在转录基因水平上表达的改变,利用RT-PCR手段验证芯片结果后,通过Western-blot验证其在蛋白质水平发生的改变。结果:异紫堇碱对宫颈癌Si Ha细胞增生具有明显的抑制作用,MTT实验结果显示处理72h时最高抑制率可达68.69%。流式细胞术检测结果可发现异紫堇碱对Si Ha细胞在各个时间点及浓度的总凋亡率均在6%以下,细胞周期结果显示发生了G1/S期阻滞。由全基因组芯片结果中筛选出有意义的目的基因Caspase14,CLCA2,NDRG1以及CDH1均表达上调,并且经RT-PCR验证结果可靠,Western blot结果显示其对应的蛋白质水平上表达同步升高。此外,在Western blot实验中我们同时验证了Vimentin、HPV16E6以及PARP表达下调,E-Cadherin、P21以及P53表达上调。结论:异紫堇碱通过P53-P21途径引发Si Ha细胞周期阻滞,抑制细胞增殖,同时调控CLCA2,NDRG1,Caspase14等多个分子逆转上皮间充质转化作用,抑制细胞的侵袭和转移,促进宫颈癌Si Ha细胞向上皮细胞方向转化从而抑制肿瘤的发生发展,发挥其抗癌作用。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.33

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 徐艳红;;宫颈癌的致病因素及预防的研究综述[J];中国实用医药;2009年25期

2 毕建军;杨慧兰;;单纯疱疹病毒2型与宫颈癌相关性的研究进展[J];实用医学杂志;2011年03期

3 孟斐;;组织因子途径抑制物-2在宫颈癌中表达情况的研究分析[J];中国实用医药;2013年05期

4 刘威;高文霞;;宫颈癌患者组织及血清血管内皮生长因子的变化研究[J];中国药物经济学;2013年04期

5 拉莱·苏祖克;表皮生长因子受体和转化生长因子-α在宫颈癌中的表达[J];诊断病理学杂志;2000年04期

6 许争峰,胡娅莉,王迅美,戴鲁琴,韩克,束泽宝;宫颈组织标本中端粒酶活性检测及临床意义[J];江苏医药;2001年05期

7 邹红燕,姚安梅,杨栓雀,赵西侠;青年宫颈癌相关因素分析[J];陕西肿瘤医学;2001年03期

8 张忠福,李辉;宫颈癌合并妊娠的诊断与治疗[J];中国实用妇科与产科杂志;2004年07期

9 小松;;宫颈癌已成女性杀手[J];中国医药指南;2004年03期

10 李隆玉,李诚信;宫颈癌的预防及普查[J];继续医学教育;2005年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 谭文福;吴绪峰;陈惠祯;;年轻宫颈癌的临床特征及防治[A];全国子宫颈癌暨湖北省妇科肿瘤专业委员会第五次妇科肿瘤学术会议论文汇编[C];2006年

2 王勒渝;;宫颈Ⅰ号栓阻断宫颈癌发生的组织病理学、超微结构及免疫组织化学的研究[A];第八届全国中西医结合肿瘤学术会议论文集[C];2000年

3 段微;;超高频无线电波刀治疗宫颈癌前病变的研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

4 黄妙玲;陈R，

本文编号：1235367