CKS2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其抑制卵巢癌A2780细胞增殖

发布时间：2018-01-06 09:07

  本文关键词：CKS2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其抑制卵巢癌A2780细胞增殖　出处：《基础医学与临床》2016年02期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并探讨CKS2敲除对卵巢癌细胞A2780增殖的影响。方法根据siRNA原理设计两对靶向CKS2的shRNA序列(shRNA1、shRNA2)及阴性对照NC shRNA,并克隆到慢病毒表达载体PLKO.1/puro中;将上述质粒转染到293T细胞并包装出慢病毒,用慢病毒感染卵巢癌细胞A2780,实时定量PCR及Western blot检测CKS2表达;MTT法检测A2780细胞增殖;Western blot检测PARP-1的剪切;流式细胞术检测凋亡。结果成功构建CKS2 shRNA慢病毒表达载体能明显降低A2780细胞中CKS2 mRNA及蛋白表达(P0.05);能显著抑制A2780靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并包装出慢病毒;感染A2780细胞后,细胞增殖受抑(P0.05);能诱导PARP-1蛋白的剪切及凋亡(P0.05)。结论成功构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,能显著抑制A2780细胞增殖。
[Abstract]:Objective To construct shRNA lentivirus expression vector targeting CKS2 and to investigate the effect of CKS2 knockout on the proliferation of ovarian cancer cell A2780 .

【作者单位】： 三峡大学医学院;
【基金】：国家自然科学基金(81550029,30800410) 三峡大学人才启动基金(KJ2014B064);三峡大学教学研究重点项目(J2015023) 湖北省自然科学基金(2015CFB198) 大学生科技创新重点项目(2015YCX004) 肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室(三峡大学)开放基金课题(2015KZL02)
【分类号】：R737.31
【正文快照】： CKS2,又称CDC28蛋白激酶调节亚基2(CDC28protein kinase regulatory subunit 2),是CKS家族成员之一,其基因定位于人染色体9q22.2。最早由Rich-ardson等在人类细胞中克隆发现,其编码长度为240bp,其蛋白由79个氨基酸残基组成,相对分子质量约为9 ku[1]。近年来研究者在前列腺癌[2，

本文编号：1387197