妊娠期糖尿病VCAM-1、AOPP的表达及相关性研究

发布时间：2018-01-15 06:14

  本文关键词：妊娠期糖尿病VCAM-1、AOPP的表达及相关性研究　出处：《河北医科大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的：妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)是妊娠期特有的代谢性疾病，是导致母儿不良结局的主要原因之一。其发病机理迄今尚不十分明确，目前认为多种因素导致的胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能障碍是其主要的发病原因，而血管内皮损伤是引起胰岛素抵抗的核心环节。血管细胞黏附分子-1(Vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)是免疫球蛋白超家族中的成员，是一类介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质相互结合，起黏附作用的膜表面糖蛋白，可介导白细胞黏附于血管内皮细胞表面，损伤血管内皮细胞。晚期氧化蛋白产物（Advanced oxidation proteinproducts, AOPP）是氧化应激对体内各种蛋白质氧化后形成的蛋白氧化终末产物，可介导脂质过氧化，激活单核细胞和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶，释放细胞内活性氧，诱发炎细胞因子及黏附分子的形成和释放，引起全身微炎症反应，损伤血管内皮。本研究通过测定妊娠期糖尿病患者VCAM-1、AOPP的表达水平，探讨VCAM-1、AOPP在妊娠期糖尿病发生发展中的作用，及与妊娠期糖尿病病情严重程度的相关性，进而为妊娠期糖尿病的临床诊断、预防及治疗提供一定的理论依据。 方法： 1研究对象：依据第8版《妇产科学》妊娠合并糖尿病诊断标准，随机选择2012-2至2013-12河北医科大学第二医院收治的妊娠合并糖尿病患者60例作为研究组，其中妊娠期糖尿病(GDM)、糖尿病合并妊娠（diabetesmellitus, DM）患者各30例，同期随机选取33例健康孕妇作为对照组。 2标本采集：入院后治疗前取空腹静脉血6ml，室温下2000rpm离心3ml血10分钟，取上清液置于EP管中，保存于-70℃冰箱，用于血浆VCAM-1、AOPP浓度测定。另外3ml当日检测血脂及空腹血糖等指标。胎盘娩出后15min内收取胎盘母体面近脐带根部直径3cm范围内的组织，约1cm3大小，生理盐水冲洗后用滤纸吸干水分，在4%福尔马林溶液中室温固定24h，并进行常规的脱水、石蜡包埋等。 3检验指标：测定所有研究对象血中VCAM-1、AOPP、高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）、载脂蛋白A（Apolipoprotein A, APOA）、载脂蛋白B（ApolipoproteinB, APOB）、糖化血红蛋白（hemoglobin A1c, HbA1c）及空腹血糖(Fastingblood glucose, FBG)的水平，并记录年龄、分娩孕周、身高、体重、及血压等指标。采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定血浆AOPP、 VCAM-1浓度；采用免疫组织化学技术(immunohistochemistry)显微镜下观察胎盘中VCAM-1、AOPP表达并进行图像分析；血脂及空腹血糖等生化指标送我院生化检验室测定。 4数据分析：采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。计量资料用均数±标准差表示，计数资料用百分率表示。对数据先进行方差齐性检验，多样本间均数进行比较采用方差分析，两两样本均数间比较采用t检验，若方差不齐用t，检验；比较样本率采用χ2检验；两变量之间的相互关系采用直线相关性分析（Pearson相关性分析）。P0.05为差异有统计学意义。 结果： 1①GDM组和DM组的VCAM-1、AOPP水平与对照组相比均明显升高（P0.05），但GDM组和DM组相比无显著性差异（P0.05）。②GDM组和DM组的入院时体重指数（body mass index, BMI）、新生儿出生体重、FBG、HbA1c、LDL及APOB水平与对照组相比均明显升高（P0.05），DM组与GDM组相比HbA1c明显升高（P0.05），其余指标在两组间无显著性差异（均P0.05）。③GDM组和DM组的HDL、APOA水平较对照组明显降低（均P0.05），但GDM组和DM组相比无显著差异（P0.05）。④对照组、GDM组和DM组间的孕前BMI没有显著性差异（均P0.05）。 2对照组孕妇血浆中VCAM-1、AOPP无明显相关性（P0.05），VCAM-1、AOPP分别与孕前BMI、入院时BMI、FBG、HbA1c、HDL、LDL、APOA、APOB、新生儿出生体重均无明显相关性（均P0.05）。 3GDM组血浆中VCAM-1、AOPP浓度呈正相关（r=0.406, P0.05）。①GDM组血浆中VCAM-1浓度与入院时BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相关（r=0.366, r=0.405, r=0.390, r=0.402, r=0.365, P0.05），与HDL、APOA呈负相关（r=-0.366, r=-0.380, P0.05），与孕前BMI、新生儿出生体重无明显相关性（均P0.05）；②GDM组血浆中AOPP浓度与入院时BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相关（r=0.400, r=0.412, r=0.449,r=0.387, r=0.394, P0.05），与HDL、APOA呈负相关（r=-0.385, r=-0.368,P0.05），，与孕前BMI、新生儿出生体重无明显相关性（均P0.05）。 DM组孕妇血浆中VCAM-1、AOPP呈正相关（r=0.481, P0.05）。①DM组血浆中VCAM-1与入院时BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相关（r=0.363, r=0.494, r=0.426, r=0.363, r=0.364, P0.05），与HDL、APOA呈负相关（r=-0.364, r=-0.380, P0.05），与孕前BMI及新生儿出生体重无明显相关性（均P0.05）；②DM组血浆中AOPP浓度与入院时BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相关（r=0.389, r=0.566, r=0.436,r=0.433, r=0.416, P0.05），与HDL、APOA呈负相关（r=-0.407, r=-0.393,P0.05），与孕前BMI、新生儿出生体重无明显相关性（均P0.05）。 4GDM组和DM组发生肥胖及巨大儿的比例较对照组明显升高（P0.05），及DM组发生巨大儿的比例较GDM组明显增高（P0.05），差异有统计学意义，但发生肥胖的比例在GDM组和DM组无显著性差异（P0.05）。 5HE染色结果：对照组胎盘绒毛成熟良好，绒毛及绒毛间质的血管形态正常，绒毛最表层为细胞核排列较整齐的合体滋养层细胞；GDM组与DM组患者胎盘绒毛成熟不良，绒毛血管壁增厚及绒毛间质毛细血管充盈，绒毛表层的合体滋养层细胞细胞核排列紊乱。 6免疫组化染色结果: VCAM-1、AOPP在三组孕妇胎盘中均有表达。VCAM-1主要表达于胎盘绒毛表层的合体滋养层细胞及血管内皮细胞上,为胞浆着色。GDM组和DM组胎盘中VCAM-1的平均光密度值与对照组相比均明显升高，差异有统计学意义（均P0.05），GDM组和DM组相比无明显差异（P0.05），且在对照组、GDM组、DM组三组中血浆VCAM-1水平与胎盘组织中VCAM-1平均光密度值呈正相关(r=0.429, r=0.483,r=0.484, P0.05)。AOPP主要表达于胎盘的滋养层细胞及血管内皮细胞上,为胞浆着色。GDM组和DM组胎盘中AOPP的平均光密度值与对照组相比均明显升高，差异有统计学意义（均P0.05），GDM组和DM组相比无明显差异（P0.05），且在对照组、GDM组、DM组三组中血浆AOPP水平与胎盘组织中AOPP平均光密度值呈正相关(r=0.749, r=0.840,r=0.824, P0.05)。 结论： 1妊娠期糖尿病患者血浆中VCAM-1、AOPP浓度较对照组孕妇显著升高，提示与妊娠期糖尿病的发病过程相关，同时也说明血管内皮损伤在妊娠期糖尿病病理变化中起重要作用。 2妊娠期糖尿病患者血浆中VCAM-1、AOPP的水平与FBG、HbA1c的水平相关，说明VCAM-1、AOPP与妊娠期糖尿病病情的严重程度相关。 3妊娠期糖尿病患者血浆中VCAM-1、AOPP的水平与HDL、LDL、APOA、APOB的水平相关，进一步说明了血管内皮损伤在妊娠期糖尿病疾病的发生发展中起至关重要的作用。 4免疫组化显示VCAM-1、AOPP在妊娠期糖尿病患者胎盘滋养层细胞表达较对照组明显增高，说明妊娠期糖尿病患者胎盘中VCAM-1、AOPP的高表达可能与胎盘功能损伤有关。
[Abstract]:Objective: gestational diabetes mellitus (gestational diabetes, mellitus, GDM) is a pregnancy specific metabolic disease, is one of the main causes of adverse outcomes of mother and infant. The pathogenesis is still not very clear, it is believed that insulin resistance and islet beta cell dysfunction caused by a variety of factors is the main cause of disease, and vascular endothelial injury is caused by the core link of insulin resistance. Vascular cell adhesion molecule -1 (Vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1) is a member of the immunoglobulin super family, is a kind of mediated cell-cell interaction, cell extracellular matrix adhesion, membrane surface glycoprotein, can mediate leukocyte adhesion on the surface of vascular endothelial cells, vascular endothelial cell injury. Advanced oxidation protein products (Advanced oxidation, proteinproducts, AOPP) is a protein of oxidative stress on the body After the formation of protein oxidation oxidation end products, may be mediated by lipid peroxidation, activation of monocytes and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate, NADPH) oxidase, release of intracellular reactive oxygen species, the formation and release of inflammatory cytokines and adhesion molecules induced by systemic micro inflammation. In this study, vascular endothelial injury. By measuring the VCAM-1 of patients with diabetes during pregnancy, the expression level of AOPP on VCAM-1, AOPP role in the development of gestational diabetes, gestational diabetes and its correlation with the severity of the disease, and for clinical diagnosis of gestational diabetes, to provide a theoretical basis for prevention and treatment.
Method锛

本文编号：1427123