自噬标记蛋白Beclin1、p62在宫颈癌中的表达及临床意义

发布时间：2018-02-14 14:09

本文关键词： 宫颈癌自噬 Beclin1 p62 免疫组化　出处：《安徽医科大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究背景：子宫颈癌(Cervical cancer)是全球女性常见的恶性肿瘤之一，发病率和病死率一直居高不下，各病理类型以子宫颈鳞状细胞癌最多见。其病因尚不明了，目前认为可能与多个性伴侣、初次性生活16岁、初产年龄小、多孕多产、吸烟、营养不良、卫生条件差以及高危型人乳头瘤病毒（High risk-human papillomavirus,HR-HPV）持续感染等有关。宫颈癌早期常无明显症状和体征，宫颈可光滑或难以与宫颈柱状上皮异位区别，颈管型宫颈癌患者常因宫颈外观正常发生漏诊或者误诊。宫颈癌的治疗采用以手术和放疗为主、化疗为辅的综合治疗方案。其预后与临床期别、病理类型等密切相关，有淋巴结转移的患者预后较差。总之，早期宫颈癌是一种可以“治愈”的肿瘤，宫颈癌越早期发现、早期治疗、预后就越好。因此，深入探索并揭示子宫颈癌变和进展的潜在的细胞和分子机制，是当前全球相关领域研究人员工作的重点。自噬(Autophagy)是一种存在于真核细胞中的“自我消化”过程，以在细胞质中形成包裹细胞器和大分子蛋白的双层膜结构的自噬小体（Autophagosome）为特征，自噬小体与溶酶体融合形成自噬溶酶体（Autolysosome），并对其包含的内容物进行降解，为细胞代谢和细胞器的更新提供能量和原料。自噬是真核细胞的一种非细胞凋亡性程序性死亡，又被称为Ⅱ型程序性细胞死亡。自噬参与生物的发育、生长等多种过程，它与细胞凋亡、细胞衰老一样，是十分重要的生物学现象。生理状态（如饥饿、营养不良）和各种应激状态（如接触放射线和细胞毒性物质）均能诱发自噬。在正常状态下，自噬可以调节蛋白质的新陈代谢，维持细胞内环境的稳态，抑制肿瘤形成。自噬功能异常时，通常与多种疾病的发生发展有关联，例如，自身免疫性疾病、神经变性疾病、衰老、肌细胞功能障碍和肿瘤等。 Beclin1蛋白由人类染色体17q21上的同名基因编码，相对分子质量为6×104，定位于高尔基体，主要通过与Ⅲ型磷脂酰肌醇3激酶（Type Ⅲ phosphatidylinositol3kinase，classIII PI3K）形成复合物来调控自噬小体的形成,正向调控自噬的活性。Beclin1也是一种准肿瘤抑制基因。p62是由原癌基因C-Myc编码，相对分子质量为6.2×104的磷酸化蛋白质，定位于细胞核，在细胞质中合成。自噬发生时，在细胞质中、p62与泛素化的蛋白质结合，然后与定位于自噬小体内膜上的微管相关蛋白1轻链3II(Microtubule associated protein1light chain3II, LC3II）形成复合物，一同在自噬溶酶体内降解。因此，p62是反映自噬活性的标记蛋白。本研究使用免疫组化SP法，在正常子宫颈上皮、子宫颈上皮内瘤变（Cervicalintraepithelial neoplasia, CIN）、子宫颈鳞状细胞癌组织中检测Beclin1、p62蛋白的表达，并结合临床病理资料进行分析，，探讨自噬活性与子宫颈鳞状细胞癌发生发展、转移和预后的关系。目的阐明Beclin1和p62在正常子宫颈上皮、CIN、子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达情况，分析这两种蛋白的表达与宫颈癌患者的年龄、组织分化、临床分期、淋巴结转移和肿瘤大小的关系及临床意义。由此探讨自噬活性的变化与宫颈鳞状细胞癌发生、发展的关系。方法采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)对20例正常子宫颈上皮、16例CIN1、18例CIN2/3、70例子宫颈鳞状细胞癌组织标本做Beclin1和p62蛋白标记，采用半定量评分方法判定阳性结果。Beclin1、p62在正常子宫颈上皮、CIN和子宫颈鳞状细胞癌之间的表达差异采用χ2检验；Beclin1、p62的表达与子宫颈鳞状细胞癌患者临床特征之间的关系使用χ2检验。采用χ2检验对各指标相关性进行相关分析。结果（1）Beclin1主要表达在子宫颈鳞状细胞癌细胞的细胞膜及细胞质中。Beclin1（膜）在20例正常子宫颈上皮、CIN1、CIN2/3、宫颈癌中阳性表达率分别为35%、37.5%、38.9%和22.9%。Beclin1（质）在20例正常子宫颈上皮、CIN1、CIN2/3、宫颈癌中阳性表达率分别为25%、18.8%、27.8%和2.9%。Beclin1在宫颈癌组织中的表达明显低于在正常子宫颈上皮和CIN，差异有统计学意义（P0.05）。Beclin1在宫颈癌组织中的表达与患者各项临床病理特征无关联。（2）p62（核）在正常子宫颈上皮、CIN1、CIN2/3和宫颈癌组织中的阳性表达率分别为70%、75%、77.8%、77.1%。 p62（质）在正常子宫颈上皮、CIN1、CIN2/3和宫颈癌组织中的阳性表达率分别为15%、18.8%、27.8%、84.3%。在正常子宫颈上皮、CIN组织中p62主要在细胞核中表达，在细胞质中表达极少；而在子宫颈鳞状细胞癌组织、p62主要在细胞质中大量表达。p62在子宫颈鳞状细胞癌组织细胞质中的表达明显高于正常子宫颈上皮和CIN（P＜0.05），其高表达与淋巴结的转移相关（P＜0.05）。（3）Beclin1与p62的阳性表达率之间无关联（P＞0.05）。结论（1）Beclin1的低表达和P62的高表达与子宫颈癌的发生、发展相关。（2）p62的高表达与子宫颈癌的预后相关。（3）p62的核浆转移与子宫颈癌的发生、发展相关。（3）子宫颈癌中的自噬活性明显低于正常子宫颈上皮、CIN。
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【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R737.33

【共引文献】