A型肉毒毒素对SD孕鼠激素水平及胚胎发育的影响

发布时间：2018-03-02 08:06

  本文关键词： A型肉毒毒素 雌激素 孕激素 胚胎发育 孕鼠　出处：《遵义医学院》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：探讨肌肉注射A型肉毒毒素（BTX-A）对SD孕鼠血清雌激素、孕激素及其受体在生殖器官中表达的影响，了解BTX-A对胚胎的发育毒性，为BTX-A在临床用药的安全性提供理论依据和实验参考数据。 方法： 1．BTX-A急性毒性试验：对SD雄性大鼠肌肉注射BTX-A检测最小致死量（MLD）与半数致死量（LD50）。(1)选健康成年普通级雄性SD大鼠20只，随机分为4组，右侧腓肠肌肌肉注射15U/kg、30U/kg、60U/kg、90U/kgWB4个剂量的BTX-A，观察BTX-A对大鼠的最小致死剂量（在90U/kg）。(2)选雄性SD大鼠50只，随机分为5组，以MLD为基础设计右侧腓肠肌肌肉注射剂量62U/kg、77U/kg、96U/kg、120U/kg、150U/kgWB5个剂量组，观察各组大鼠中毒、死亡情况，根据孙氏综合法改进的查表法，计算出BTX-A对SD大鼠7天的LD50。 2．BTX-A对SD孕鼠血清雌激素、孕激素及受体表达、胚胎发育的影响：选SD孕鼠60只，随机分为6组每组10只。阴性对照组(NS，0.5ml/只)肌肉注射；A型肉毒毒素药物组分4个剂量（BTX-A30U/kg、60U/kg、90U/kg、120U/kgWB）肌肉注射；维甲酸药物对照组（100mg/kgWB灌胃）。各组孕鼠均于孕第8天给药1次，于孕18天麻醉取材。(1)孕鼠检测指标：测孕期体重增重率、卵巢与子宫重量指数、ELISA法测孕鼠血清雌激素、孕激素水平和IHC法测卵巢、子宫的雌激素受体与孕激素受体表达的情况。(2)胚胎检测指标：胚胎畸形、存活率、胎重、身长、尾长及四肢主要骨的骨长与骨化的检测。 结果： 1. BTX-A对大鼠急毒试验：(1)最小致死量检测(MLD)：正常成年雄性大鼠分4组肌肉注射BTX-A（15U/kg、30U/kg、60U/kg、90U/kg），当剂量为90U/kg时出现急性中毒症状并出现死亡，由此提示BTX-A对大鼠的MLD为90U/kg。(2)半数致死量检测(LD50)：在MLD基础上再设BTX-A62U/kg、77U/kg、96U/kg、120U/kg、150U/kg等5个剂量组，最高剂量组(150U/kg)中毒症状最严重，7天死亡率达100%，根据孙氏综合法改进的查表法计算得出BTX-A对大鼠的LD50为114.77U/kg。 2. BTX-A对SD孕鼠孕期体重增重率、血清激素水平、生殖器官重量指数及其激素受体的影响：孕第18天检测各组孕鼠：①各组孕鼠在孕15天时，除BTX-A30U/kg剂量组外，，BTX-A其余3个剂量组孕鼠体重均低于阴性对照组，孕18天时仅有120U/kg剂量组体重低于阴性对照组，相比均有显著性差异(P＜0.05)；②BTX-A4个剂量组的血清雌激素、孕激素值均低于阴性对照组，除30U/kg剂量组以外，其余3组与阴性对照组比较，均有显著性差异(P＜0.05)。③卵巢和子宫90U/kg、120U/kg剂量组的重量指数均低于阴性对照组，相比均有显著性差异(P＜0.05)。④BTX-A各剂量组孕鼠子宫内膜与卵巢黄体的ER、PR表达均高于阴性对照组，相比均有显著性差异(P＜0.05)。且随着BTX-A剂量增加而表达增强。 3. BTX-A对大鼠E18胚胎发育的影响：①BTX-A剂量为120U/kg时，胚胎活胎率低于与阴性对照组，两组相比有显著性差异(P＜0.05)。BTX-A60U/kg、90U/kg剂量组出现畸形胚胎。②BTX-A120U/kg剂量组胚胎体重、尾长与身长均低于阴性对照组，比较有显著性差异(P＜0.05)，BTX-A4个剂量组的胎盘重均低于阴性对照组，相比较均有显著性差异(P＜0.05)。③BTX-A剂量达60U/kg、90U/kg时前肢肩胛骨、肱骨、尺骨、桡骨及后肢髋骨长度小于阴性对照组，比较有显著性差异(P＜0.05)，而股骨、胫骨、腓骨长度在BTX-A剂量60U/kg、90U/kg时均低于阴性对照组，比较有显著性差异(P＜0.05)。上述所有骨的骨化点长度在BTX-A的剂量30U/kg、60U/kg、90U/kg时均小于阴性对照组，相比较均有显著性差异(P＜0.05)。 结论： 4.1大鼠肌肉注射BTX-A的最小致死剂量为90U/kg，而半数致死量为114.77U/kg。 4.2本实验条件下，孕鼠肌肉注射BTX-A剂量小于30U/kg时无母体毒性，无胚胎发育毒性。当剂量大于60U/kg时随剂量增加，孕鼠母体毒性与胚胎发育毒性逐渐加重，且有致畸作用。 提示：微量肌肉注射BTX-A在安全剂量范围内（小于30U/kg）无孕鼠母体毒性及胚胎发育毒性作用，无致畸作用。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of intramuscular injection of botulinum toxin type A (BTX-A) on the expression of estrogen, progesterone and its receptors in reproductive organs of SD pregnant rats, and to understand the developmental toxicity of BTX-A to embryos, and to provide theoretical basis and experimental reference data for the safety of BTX-A in clinical medication.
Method锛

本文编号：1555696