OTR、PKCβ及CPI-17在子宫腺肌病患者子宫结合带中的表达及意义

发布时间：2018-04-15 10:18

本文选题：子宫腺肌病 + 子宫结合带　；参考：《郑州大学》2017年硕士论文

【摘要】：子宫腺肌病(AM)是一种常见的妇科良性疾病,在育龄期妇女中,大多发生在30-50岁经产妇,同时合并子宫肌瘤患者约为50%,约15%同时合并其他部位的子宫内膜异位症。在组织学上,它的特点是子宫肌层中存在异位的子宫内膜组织(内陷的子宫内膜组织侵入肌层的深度至少为子宫内膜基底层2.5mm以下),从而导致了周围肌层细胞的代偿性增生和肥大形成结节和团块,它可以引起子宫局灶性或者弥漫性增大,通常是不对称的。近2/3患者具有临床表现,表现为:周期性和进行性加重的痛经、月经增多、经期延长,子宫逐渐增大(弥漫性增大或者局限性增大)、不孕等情况,严重影响着患病妇女的生活质量及身心健康。目前认为,子宫腺肌病的发病机制可能与体内激素紊乱,免疫因素失调及遗传物质失调有关,但其具体病因及致病机制目前尚不明确,随着MRI和其他成像检查等影像学检查在妇科疾病中的应用和发展,对于AM发病机理的研究进一步深入于子宫结合带(junctional zone,JZ),近年来关于JZ的定义即是子宫内膜与肌层交界处的内层肌层组织,在MRI上呈低信号强度。JZ组织解剖结构异常与AM的发生发展密切相关。MRI显示正常的育龄期妇女JZ厚度大约2-8mm,而JZ厚度大于12mm则将会被认为是诊断AM的阈值。节律性、周期性的子宫结合带(JZ)的收缩维持着子宫正常的结构和功能。目前研究认为,AM的发生发展可能与JZ的异常收缩有关。但其具体机制目前尚未明确。缩宫素受体(oxytocin receptor,OTR)作为一个G蛋白偶联受体家族中的一员,并参与调节子宫JZ组织中肌肉收缩,蛋白激酶Cβ(PKCβ)可调控细胞生长、增生、分化、凋亡等多种信号通路,蛋白激酶C磷酸酶抑制蛋白17(CPI-17)是PKCβ的主要作用底物,是调节钙敏感性的重要分子。本实验拟通过研究AM患者JZ中OTR、PKCβ、CPI-17表达的改变及其三者之间的关系,进而有助于解释子宫腺肌病的发病机制。目的本实验采用免疫组化和荧光定量PCR法检测缩宫素受体(OTR)、PKCβ及CPI-17在AM组JZ及正常子宫对照组JZ中的表达情况,分析OTR、PKCβ、CPI-17在AM发生发展中的作用及其三者的相关性,为AM创新性治疗研究提供新的参考依据。材料与方法1.实验对象:于2015年5月至2015年12月在郑州大学第三附属医院妇科入院的患者中,选择因子宫腺肌病行子宫全切或者次全切除术者45例为实验组(年龄34~50岁,平均45.6岁),选择同期因宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ累腺或者卵巢良性肿瘤等行子宫全切除术者45例为对照组年龄35~55岁,平均42.2岁)。以上两组患者术前3个月均未采用激素治疗。两组患者年龄无统计学意义(P0.05)。全部标本取材均由郑大三附院伦理委员会批准,所有病人均知情同意。术后病理结果均由病理医师严格确诊。2.实验方法:采用免疫组化法检测俩组患者JZ中OTR、PKCβ、CPI-17及磷酸化CPI-17蛋白的表达水平及其相关性,采用实时荧光定量PCR技术检测俩组患者JZ中OTR、PKCβ、CPI-17mRNA的表达水平及其相关性。3.统计方法:数据选用SPSS21.0统计软件进行分析,计量数据用均数?标准差(?x±s)表示。组间比较懫用独立样本t检验、秩和检验,免疫组化结果定性数据分析采用卡方检验和Fisher确切概率法。定量数据相关性分析采用Pearson相关分析进行。分类变量资料的相关性分析采用Pearsonχ2检验法,检验水准α=0.05。结果1.免疫组化结果:OTR在AM组及对照组JZ中阳性表达率分别为77.8%和17.8%,差异有统计学意义(P0.05);PKCβ在AM组及对照组JZ中阳性表达率分别为84.4%和22.2%,差异有统计学意义(P0.05);CPI-17在AM组及对照组JZ中阳性表达率分别为71.1%和60.0%,差异无统计学意义(P0.05);磷酸化CPI-17在AM组及对照组JZ中阳性表达率分别为82.2%和20.0%,差异有统计学意义(P0.05)。2.荧光定量PCR结果:OTR mRNA在AM组及对照组JZ中的相对表达量分别为1.437±0.605和0.879±0.293,差异有统计学意义(P0.05);PKCβmRNA在AM组及对照组JZ中的相对表达量分别为1.775±0.874和0.943±0.289,差异有统计学意义(P0.05);CPI-17 mRNA在AM组及对照组JZ中的相对表达量分别为1.166±0.876和0.994±0.382,差异无统计学意义(P0.05)。3.AM组JZ中OTR、PKCβ、磷酸化CPI-17蛋白相关性分析。免疫组化结果:AM组JZ中OTR与PKCβ蛋白表达,PKCβ蛋白与磷酸化CPI-17蛋白的表达均呈正相关性(r=0.453,P0.05;r=0.516,P0.05)。荧光定量PCR结果:AM组JZ中OTR与PKCβmRNA表达呈正相关(r=0.617,P0.05)。结论1.子宫腺肌病组子宫结合带中OTR、PKCβ及磷酸化CPI-17高表达,可能与子宫腺肌病发生发展有关。2.OTR可能通过激活PKCβ/CPI-17信号通路,增加收缩蛋白钙敏感性,导致子宫结合带收缩异常,从而参与AM的发生发展。
[Abstract]:In this study , it is believed that the pathogenesis of uterine adenomyopathy may be related to the abnormal contraction of JZ . The effect of CPI - 17 in the development of AM and the correlation between them were provided . It provides a new reference for AM ' s innovative therapeutic research . 45 cases of hysterectomy or subtotal hysterectomy in the Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University from May 2015 to December 2015 were selected as experimental groups ( aged 34 - 50 years , mean 45.6 years ) . 45 cases of hysterectomy were selected for the same period of hysterectomy ( age 34 - 50 years , mean 45.6 years ) , and 45 cases were selected for the control group ( aged 35 - 55 years , mean 44.2 years ) . The expression levels of OTR , PKC尾 , CPI - 17 and phosphorylated CPI - 17 in JZ group were analyzed by Pearson correlation analysis . Results : There was positive correlation between OTR and PKC尾 mRNA expression in AM group ( r = 0.617 , P0.05 ) . Conclusion 1 . The expression of OTR , PKC尾 and phosphorylated CPI - 17 in UTR , PKC尾 and phosphorylated CPI - 17 may be related to the development of uterine adenomyopathy .

【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R711.71

【参考文献】