重组人IL-17D对上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及VEGF-C表达的影响

发布时间：2018-05-01 18:23

  本文选题：SKOV3细胞 + IL-17D　； 参考：《河北医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:通过研究重组人IL-17D(r-hIL-17D)对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及VEGF-C表达的影响,探讨IL-17D对卵巢癌增殖及淋巴转移的作用。方法:1体外培养SKOV3(人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞)并连续传代,于倒置显微镜下观察细胞形态。2取对数生长期的SKOV3细胞,分别以不同浓度(0ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)r-hIL-17D作用于细胞0h、24h、48h、72h、96h、120h,以MTS法检测不同浓度r-h IL-17D在不同时间对卵巢癌SKOV3细胞的增殖的影响,并绘制生长曲线。3 Transwell小室实验检测不同浓度r-hIL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50ng/ml、100 ng/ml)对SKOV3细胞迁移能力的影响。4分别以不同浓度(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)r-h IL-17D作用SKOV3细胞48h后,提取各组细胞RNA,以RT-qPCR法检测不同浓度r-hIL-17D对SKOV3细胞VEGF-C mRNA表达的影响。5分别以不同浓度(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)r-h IL-17D作用SKOV3细胞48h后,收集细胞上清液,ELISA法检测上清液中VEGF-C的含量。结果:1成功培养并传代卵巢癌SKOV3细胞,获得对数生长期细胞。2 MTS法显示:10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml组SKOV3细胞增殖速度快于0ng/ml组,差异有统计学意义(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml组SKOV3细胞增殖速度快于10ng/ml组,差异有统计学意义(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml组SKOV3细胞增殖速度无统计学意义(P0.05)。3 Transwell小室实验显示:在不同浓度IL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)作用下,SKOV3细胞的迁移数目分别为118.80±13.66、144.20±12.70、180.80±20.54、176.60±18.15,经单因素方差分析,差异有统计学意义(P0.05)。两两比较,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml组SKOV3细胞的迁移能力强于0 ng/ml组(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml组SKOV3细胞的迁移能力强于10 ng/ml组(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml组SKOV3细胞的迁移能力无统计学差异(P0.05)。4 RT-qPCR结果显示:在不同浓度r-hIL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50ng/ml、100 ng/ml)作用下,SKOV3细胞VEGF-C mRNA相对表达量分别为1.00±0.18、1.54±0.22、2.26±0.18、2.11±0.26,经单因素方差分析,差异有统计学意义(P0.05)。两两比较,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml组VEGF-C mRNA表达量高于0 ng/ml组(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml组VEGF-C mRNA表达量高于10 ng/ml组细胞(P0.05)。50 ng/ml、100ng/ml组VEGF-C mRNA表达量差异无统计学意义(P0.05)。5 ELISA结果显示:不同浓度(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)组细胞上清液中VEGF-C的含量分别为4095.09±105.25ng/ml、4439.84±133.87 ng/ml、4755.66±64.24 ng/ml、4646.59±111.92 ng/ml,经单因素方差分析,差异有统计学意义(P0.05)。两两比较,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml组VEGF-C含量高于0 ng/ml组(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml组VEGF-C含量高于10ng/ml组(P0.05)。50 ng/ml与100 ng/ml组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:R-hIL-17D可以促进SKOV3细胞增殖,提高SKOV3细胞的迁移能力,在不同水平增加SKOV3细胞VEGF-C的表达。IL-17D可能因此而增加卵巢癌细胞淋巴转移的机会。
[Abstract]:Objective : To investigate the effects of recombinant human IL - 2 ( IL - 3 ) on proliferation , migration and expression of VEGF - C in human epithelial ovarian carcinoma . The expression of VEGF - C mRNA was 1 . 00 卤 0 . 18 , 1 . 54 卤 0 . 22 , 2 . 26 卤 0 . 18 , 2 . 11 卤 0 . 26 in 100 ng / ml group . The levels of VEGF - C mRNA in 100 ng / ml and 100 ng / ml group were 4095.09 卤 105.25ng / ml , 4439.84 卤 133.87 ng / ml , 4646.59 卤 11.92 ng / ml , respectively .

【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.31

【参考文献】

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本文编号：1830547