肿瘤相关成纤维细胞高表达Twist1增强卵巢癌侵袭能力
本文选题：Twist基因 + 肿瘤相关成纤维细胞 ； 参考：《现代妇产科进展》2017年09期
【摘要】：目的:检测肿瘤相关成纤维细胞Twist1基因表达,探讨肿瘤相关成纤维细胞高表达Twist1对卵巢癌侵袭能力的影响。方法:CSIOVDB数据库检索Twist1基因在卵巢各种组织类型中的表达水平。分离原代正常成纤维细胞(NOF),以及卵巢癌患者的原代肿瘤相关成纤维细胞(CAF),免疫荧光实验验证Twist1基因在NOF和卵巢癌CAF细胞中的表达差异。TCGA数据库489例卵巢癌中从mRNA水平验证Twist1与CAF经典活化指标FAP的相关性,以及炎症因子IL-6的相关性。GSEA(Gene Set Enrichment Analysis)软件探究CAF高表达Twist1与IL-6通路富集的关系。Western blot法验证下调Twist1基因对IL-6表达的影响。Transwell实验探究卵巢癌CAF-肿瘤细胞共培养体系中IL-6对卵巢癌细胞系SKOV3侵袭能力的影响。结果:Twist1基因在卵巢癌CAF中的表达水平明显高于肿瘤细胞和正常成纤维细胞。TCGA数据库中Twist1基因和FAP及IL-6基因呈显著正相关(P0.0001)。GSEA软件分析结果示,卵巢癌患者中CAF高表达Twist1的同时,肿瘤上皮表现为IL-6通路明显富集(P0.05,FDR25%)。Western blot法结果表明,Twist1基因下调后,IL-6基因表达量明显降低。在共培养体系中加IL-6中和抗体,卵巢癌细胞侵袭力明显下降。结论:肿瘤相关成纤维细胞高表达Twist1,可能通过提高IL-6水平增强卵巢癌侵袭能力。
[Abstract]:Aim: to detect the expression of Twist1 gene in tumor-associated fibroblasts and to investigate the effect of overexpression of Twist1 on the invasiveness of ovarian cancer. Methods the expression level of Twist1 gene in ovarian tissues was searched by the: CSIOVDB database. Primary normal fibroblasts were isolated from normal fibroblasts and primary tumor-associated fibroblasts from patients with ovarian cancer were isolated. Immunofluorescence assay verified the difference of expression of Twist1 gene in NOF and ovarian cancer CAF cells. TCGA database from 489 cases of ovarian cancer The correlation between Twist1 and FAP, a classical activation index of CAF, was verified. Correlation of inflammatory Factor IL-6 .GSEA Gene Set Enrichment Analysis) Software to explore the relationship between CAF overexpression of Twist1 and enrichment of IL-6 Pathway. Western blot method to verify the effect of down-regulation of Twist1 gene on IL-6 expression .Transwell experiment to explore IL-6 in ovarian cancer CAF- tumor cell coculture system Effect on invasion ability of ovarian cancer cell line SKOV3. Results the expression level of Twist1 gene in ovarian cancer CAF was significantly higher than that in tumor cell and normal fibroblast. TCGA database showed that there was a significant positive correlation between Twist1 gene, FAP gene and IL-6 gene. GSEA software analysis showed that CAF overexpression of Twist1 was also found in ovarian cancer patients. The expression of IL-6 gene was significantly decreased after down-regulation of Twist1 gene. The invasiveness of ovarian cancer cells decreased significantly with the addition of IL-6 neutralizing antibody in co-culture system. Conclusion: Twist1 is highly expressed in tumor-associated fibroblasts, which may enhance the invasiveness of ovarian cancer by increasing the level of IL-6.
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No:81372801)
【分类号】：R737.31
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