重要炎症介质基因多态性与自发性早产遗传易感性的关联研究

发布时间：2018-05-14 00:18

  本文选题：炎症介质 + 自发性早产　； 参考：《第二军医大学》2016年博士论文

【摘要】：背景:早产(Preterm Birth,PTB)是指在妊娠不满37周的分娩,是导致新生儿发病和死亡的重要原因,同时也是导致婴幼儿发生诸如脑瘫、发育迟缓、早产儿视网膜病变、慢性肺部疾病以及听觉和视觉障碍等并发症和后遗症的重要因素。PTB可分为自发性早产(Spontaneous Preterm Birth,SPTB)和治疗性PTB(Therapeutic Preterm Birth,TPTB)两种。约70%的PTB为SPTB,SPTB中有50%是胎膜早破(Premature Rupture of Membranes,PROM)导致的,又称为早产胎膜早破(Preterm Rupture of Membranes,PPROM)。流行病学研究表明SPTB具有家族聚集现象、明显的种族差异性以及复发性;关联研究也显示许多与感染、炎症和先天免疫反应相关的基因多态性是SPTB发生的危险因素,可见遗传因素在SPTB的发生机制中具有重要作用。SPTB的病因和发病机制仍不十分明确,研究表明,宫内感染和炎症性反应是导致SPTB及PPROM的重要原因。而且,不论是否有感染发生,SPTB及PPROM都与调节炎症和免疫反应的炎症细胞因子、趋化因子、金属蛋白酶等炎症介质的变化密切相关。炎症介质基因单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNPs)可以影响SPTB及PPROM发生的风险,是研究其遗传易感性很好的候选基因。目前,一些关于炎症介质基因的SNPs与SPTB遗传易感性的关联性研究普遍存在样本数量小、未校正混杂因素、结果不一致等问题。而且,由于基因的SNPs存在显著的种族差异性,国外人群中遗传易感性的研究结果也不一定适用于中国人群。因此,有必要在中国人群中进行大样本系统的SPTB遗传易感性的研究工作,鉴别出与SPTB的发生密切相关的易感基因和SNP,对于揭示PTB的发病机理、进行早期预防和干预都具有重要意义。目的:研究单核细胞趋化因子-1(Monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(Regulated on activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-15(Interleukin-15,IL-15)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶-8(Matrix metalloproteinases,MMP-8)这些重要炎症介质基因的SNPs与SPTB遗传易感性的关联性。以获得具有应用价值的易感基因和SNP,为高风险人群的鉴定、PTB的预防以及将来可能的个性化基因治疗提供新的生物学标记。方法:采用基于候选基因的病例—对照研究,病例组包括753例SPTB新生儿,对照组包括681例足月新生儿。病例组按照是否合并PROM,可分为:有PROM组(PPROM组)和无PROM组;按照SPTB新生儿出生时胎龄的大小,可分为3个亚组:超早产组(胎龄≤28周)、极早产组(28周胎龄≤32周)和轻度早产组(33周胎龄≤36周);超早产组和极早产组合并组成重度早产组(胎龄≤32周)。运用传统的PCR-RFLP(PCR-based restriction fragment length polymorphism analysis,PCR-RFLP)技术、PCR-测序技术和最新的Sequenom Mass ARRAY?SNP检测技术分别对候选基因的多态性位点进行SNP分型。每一个SNP位点的等位基因和基因型频率通过记数确定,用频数(百分率)表示,采用卡方(χ2)检验分析病例组和对照组中每个等位基因和基因型的分布频率。通过Logistic回归分析矫正母亲年龄和婴儿性别后,在五种遗传模式中对每个基因的SNP位点与SPTB发生的关联性进行风险评估,用所得的比值比(odds ratios,ORs)及95%的置信区间(confidence intervals,CIs)表示风险强度。所有的统计检验均为双侧概率,P0.05被认为有统计学意义。通过酶联免疫吸附实验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA),检测RANTES在SPTB新生儿和足月新生儿血清中的浓度,每一份血清标本都被重复检测两次。结果:1.MCP-1基因G-2518A多态性位点与SPTB的患病风险无显著的遗传学关联;与合并或不合并PROM的SPTB的患病风险均无显著的遗传学关联。然而,与携带至少一个-2518G等位型(GG+GA基因型)的个体相比,携带-2518AA基因型的个体发生超早产(OR 2.74;95%CI,1.10-6.72;P=0.014)和极早产(OR 2.07;95%CI,1.27-3.36;P=0.005)的风险显著升高。即使将超早产和极早产新生儿合并起来,携带-2518 AA基因型的个体发生SPTB的风险仍然显著升高(OR 2.23;95%CI,1.40-3.54;P0.001)。2.RANTES基因In1.1T/C多态性位点的CC基因型可显著增加SPTB的患病风险(OR 1.44;95%CI,1.01-2.05;P=0.043)。相对于T等位型(TT+TC基因型),CC基因型与不合并PROM的SPTB的患病风险升高有临界的相关性(OR 1.48;95%CI,1.00-2.19;P=0.05);另外,早产儿血清中RANTES的浓度要明显低于足月儿;而在早产儿中,携带In1.1CC基因型的早产儿,其血清中RANTES的表达水平显著降低(P0.001)。3.在所有样本中,TNF-α基因G-308A多态性位点各等位基因分布频率和基因型的构成比在病例组和对照组之间无显著性差异,TNF-αG-308A位点与SPTB的患病风险无显著的遗传学关联(OR 0.85;95%CI,0.61-1.19;P=0.35);与合并或不合并PROM的SPTB的患病风险均无显著的遗传学关联(OR 0.77;95%CI,0.45-1.31;P=0.32;OR 0.88;95%CI,0.62-1.27;P=0.51);与超早产(OR 0.39;95%CI,0.12-1.28;P=0.08)、极早产(OR 0.68;95%CI,0.38-1.19;P=0.16)和轻度早产(OR 1.02;95%CI,0.71-1.46;P=0.92)的患病风险也均无显著的遗传学关联。4.在所有样本中,IL-15基因rs10833多态性位点与SPTB的患病风险无显著的遗传学关联,与超早产、极早产和轻度早产的患病风险均无显著的遗传学关联。然而,不论是否合并PROM,A等位型(GA+AA基因型)都与SPTB的患病风险显著相关(OR 0.46;95%CI,0.23-0.92;P=0.017;OR 1.47;95%CI,1.04-2.09;P=0.031)。5.与携带IL-1β基因C+3953T多态性位点的CC基因型的个体相比,携带至少一个T等位基因型(CT+TT基因型)的个体发生SPTB(OR 1.63;95%CI,1.02-2.59;P=0.036)、合并PROM的SPTB(PPROM)(OR 2.36;95%CI,1.32-4.23;P=0.005)和轻度早产(OR 1.79;95%CI,1.09-2.94;P=0.022)的风险显著升高。6.与携带MMP-8基因C-799T多态性位点-799 CC基因型的个体相比,携带至少一个-799 T等位型(CT+TT基因型)的个体发生SPTB(OR 0.79;95%CI,0.63-0.97;P=0.027)、合并PROM的SPTB(PPROM)(OR 0.67;95%CI,0.49-0.92;P=0.014)以及轻度早产(OR 0.78;95%CI,0.61-0.99;P=0.037)的风险显著降低。与携带至少一个C等位型(CC+CT基因型)的个体相比,TT基因型与不合并PROM的SPTB的患病风险的降低有临界的相关性(OR 0.71;95%CI,0.50-1.00;P=0.049)结论:1.MCP-1基因G-2518A多态性位点、RANTES基因In1.1 T/C多态性位点、IL-15基因rs10833多态性位点、IL-1β基因C+3953T多态性位点和MMP-8基因C-799T多态性位点,这些SNP位点可以影响SPTB的遗传易感性。2.早产儿血清中的RANTES浓度要明显低于足月儿,RANTES In1.1 T/C位点的CC基因型和早产儿血清中RANTES的低表达相关,提示RANTES基因In1.1 T/C多态性位点可通过调控血清中RANTES的表达水平来影响个体对SPTB的易感性。3.在中国人群中,IL-1β基因C+3953T多态性位点与SPTB的患病风险的增加存在显著的遗传学关联。这一SNP位点的发现对于预防SPTB的发生,阐明SPTB的病因和发病机制具有重要意义。
[Abstract]:鑳屾櫙:鏃╀骇(Preterm Birth,PTB)鏄�鎸囧湪濡婂�犱笉婊，

本文编号：1885471