CSA对流产模型鼠和先兆流产患者Th17、IL17mRNA及妊娠结局的调控作用研究

发布时间：2018-06-25 21:22

  本文选题：流产 + 环孢素A　； 参考：《青岛大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:研究妊娠早期注射环孢素A(CSA)对流产模型小鼠Th17细胞及妊娠结局的作用及白介素-17(IL-17)在早期自然流产发展中的作用及其临床意义。方法:构建正常妊娠小鼠模型(A组)及自然流产模型(B组),B组再随机分为5组,其中BO组为自然流产组,B1-4组为给药组)。在妊娠第4天给予B1、B2、B3、B4各组孕鼠行单次腹腔注射CSA,剂量分别为1、5、10、15mg/kg,于妊娠第14天取胚胎、外周血及脾脏组织。①计算各组孕鼠胚胎吸收率;②ELISA法测定IL-17、IL-6、IL-23在孕鼠外周血血清中的含量;③流式细胞仪检测孕鼠脾脏组织中CD4+IL-17A+/CD4+细胞比例;④qPCR检测孕鼠母胎界面RORyt mRNA的相对表达量;采用ELISA法分别检测先兆流产、难免流产、正常妊娠妇女、正常非孕妇女、先兆流产保胎成功后继续妊娠妇女及保胎失败妇女血清中IL-17浓度。采用化学发光免疫分析法(CLIA)分别测定先兆流产妇女、难免流产妇女和正常妊娠妇女血清孕酮水平;并采用实时PCR(real-time PCR)技术分别检测难免流产和正常妊娠者子宫蜕膜组织中IL-17mRNA的表达水平。结果:1、与正常妊娠组相比,自然流产组胚胎吸收率明显升高(P=0.03),外周血血清中IL-17、IL-6,IL-23浓度均明显升高(P均0.05),脾脏组织中CD4+IL-17A+/CD4+细胞比例明显升高(P0.05),母胎界面RORytmRNA表达量增高显著(P0.01)。2、与自然流产组相比,给药组胚胎吸收率均有所下降(B2、B3组下降P0.05);血清中IL-17、IL-6、IL-23均有不同程度降低;脾脏组织中CD4+IL-17A+/CD4+细胞比例均有不同程度下降,B2、B3组下降显著(P0.05);孕鼠母胎界面RORγt mRNA表达量较自然流产组均显著下降(P值均0.05)。3、与正常妊娠组相比,给药组胚胎吸收率、血清细胞因子的浓度、脾脏组织中CD4+IL-17A+/CD4+细胞比例和孕鼠母胎界面RORyt mRNA表达量均无明显差异(P 均0.05)。4、正常妊娠组、正常非孕组、先兆流产组及难免流产组血清中IL-17浓度逐渐升高,差异有统计学意义(P0.05);相对于正常妊娠组及正常非孕组,难免流产组血清IL-17浓度显著升高(P0.05),相对于先兆流产组,难免流产组IL-17呈上升趋势,相对于正常妊娠组和正常非孕组,先兆流产组血清IL17浓度呈上升趋势,但无统计学差异(P0.05);5、难免流产组患者的蜕膜组织中IL-17 mRNA的表达水平明显高于正常妊娠组(P0.05);6、正常妊娠组、难免流产组蜕膜组织中IL-17的表达量和外周血中IL-17浓度存在正相关性(P=0.049,P=0.034),且相关系数不佳(r=0.499,r=0.475);7、先兆流产保胎后,继续妊娠组血清IL-17含量较治疗前下降显著(P0.05);而保胎失败组患者血清IL-17浓度较治疗前有上升趋势;8、妊娠患者血清IL-17与血清孕酮水平的相关性为低度负相关(r=-0.498、-0.362、-0.435,P0.05)。结论:①流产可导致Th17细胞及其相关细胞因子异常增加。②孕早期腹腔注射CSA可抑制流产模型小鼠体内Th17细胞的分化和功能,改善妊娠结局。③CSA对流产模型小鼠体内Th17细胞及其相关细胞因子和妊娠结局的影响并未呈现出明显的剂量依赖性。综上提示CSA可能成为治疗妊娠失败的有效药物,但安全有效的剂量仍需进一步研究。④IL-17可能通过介导炎症细胞及介质聚集在母-胎界面,从而引起母-胎免疫耐受失衡,在流产的发生与发展中发挥一定作用;⑤血清IL-17可能主要来源于蜕膜;⑥妊娠早期孕酮可能通过孕激素受体抑制TH17细胞分泌IL-17,进而维持机体内环境的稳定及母胎界面免疫耐受的平衡,有利于妊娠的进展。
[Abstract]:Objective : To study the effect of early pregnancy injection of cyclosporin A ( CSA ) on Th17 cells and outcome of pregnancy and the clinical significance of interleukin - 17 ( IL - 17 ) in early spontaneous abortion . Methods : The normal pregnant mice model ( group A ) and spontaneous abortion model ( group B ) were constructed . The serum levels of IL - 17 , IL - 17 , IL - 6 and IL - 23 in normal pregnant women were significantly increased ( P = 0 . 05 ) , and the expression of IL - 17 , IL - 6 and IL - 23 in normal pregnant women were significantly lower than those in normal pregnancy group ( P < 0 . 05 ) . Compared with normal pregnancy group and normal pregnancy group , the levels of IL - 17 mRNA in decidual tissue were significantly higher than those in normal pregnancy group ( P = 0.049 , P = 0.034 ) , and the correlation coefficient was not good ( P = 0.049 , r = 0.434 ) . Conclusion : 鈶，

本文编号：2067536