HMGB1-siRNA对卵巢癌细胞OV5生物学活性影响研究

发布时间：2018-06-29 21:42

  本文选题：卵巢癌OV + 高迁移率族蛋白B　； 参考：《中华肿瘤防治杂志》2015年14期

【摘要】：目的探讨高迁移率簇蛋白B1(high mobiligy group box-1,HMGB1)RNA干扰对人卵巢癌细胞株OV5生物学活性的影响。方法合成siRNA序列,构建HMGB1基因的慢病毒shRNA载体,转染卵巢癌OV5细胞。实验分为HMGB1-siRNA-1组、HMGB1-siRNA-2组、HMGB1-siRNA-3组、阴性对照组和空白组。采用Real-time RT-PCR和蛋白质印迹法等方法检测RNA干扰对HMGB1表达的影响;MTT法绘制生长曲线,检测细胞凋亡;Transwell小室检测卵巢癌细胞侵袭能力的变化。结果 HMGB1-siRNA-1组、HMGB1-siRNA-2组和HMGB1-siRNA-3组细胞中,HMGB1mRNA的表达量分别为1.261±0.131、1.109±0.074和0.483±0.059,明显低于阴性对照组的2.331±0.192和空白对照组的2.164±0.177,差异有统计学意义,P=0.005。实验组癌细胞生长明显受到抑制,与对照组相比,差异有统计学意义,P=0.007。HMGB1表达下调明显增加癌细胞的凋亡,HMGB1-siRNA-3组的凋亡率(16.89±1.13)%,明显高于阴性对照组的(5.87±0.47)%和空白对照组的(4.51±0.48)%,差异有统计学意义,P0.01。Transwell小室法检测细胞侵袭力显示,HMGB1-siRNA-3组穿膜细胞数明显减少,与阴性对照组和空白组比较,差异有统计学意义,P0.05。结论 HMGB1特异性siRNA序列可显著下调HMGB1的表达,抑制OV5细胞的增殖,促进细胞凋亡,也可明显降低OV5细胞的侵袭能力,HMGB1可能成为卵巢癌治疗的一个潜在靶点。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of high mobility cluster protein B1 (high mobiligy group box-1 HMGB1 RNA interference on the biological activity of human ovarian cancer cell line OV5. Methods siRNA sequence was synthesized and lentivirus shRNA vector of HMGB1 gene was constructed and transfected into ovarian cancer OV5 cells. The experiment was divided into HMGB1-siRNA-1 group, HMGB1-siRNA-2 group, HMGB1-siRNA-3 group, negative control group and blank group. Real-time RT-PCR and Western blot were used to detect the effect of RNA interference on the expression of HMGB1. MTT method was used to draw the growth curve and the apoptosis chamber was used to detect the invasion ability of ovarian cancer cells. Results the expression of HMGB1 mRNA in HMGB1-siRNA-2 group and HMGB1-siRNA-3 group was 1.261 卤0.131 卤1.109 卤0.074 and 0.483 卤0.059 respectively, which was significantly lower than that in negative control group (2.331 卤0.192) and blank control group (2.164 卤0.177). The growth of cancer cells in the experimental group was significantly inhibited, compared with the control group. The down-regulation of HMGB1 expression significantly increased the apoptosis rate of cancer cells in HMGB1-siRNA-3 group (16.89 卤1.13), which was significantly higher than that in negative control group (5.87 卤0.47)% and blank control group (4.51 卤0.48). The number of perforating cells in HMGB1-siRNA-3 group was significantly decreased. Compared with negative control group and blank group, the difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion HMGB1 specific siRNA sequence can significantly down-regulate the expression of HMGB1, inhibit the proliferation of OV5 cells and promote apoptosis. HMGB1 may be a potential target for the treatment of ovarian cancer.
【作者单位】： 菏泽市立医院妇产科;山东省肿瘤医院妇瘤科;
【基金】：山东省自然科学基金(ZR2013HL047)
【分类号】：R737.31

【参考文献】

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本文编号：2083463