宫颈癌细胞系Siha和C33a中RRM2表达水平与细胞对吉西他滨敏感性的相关分析

发布时间：2018-10-14 18:52

【摘要】：目的:研究宫颈癌细胞系C33a和Siha中核糖核苷酸还原酶小亚基M2(RRM2)表达与细胞对吉西他滨(Gem)敏感性的相关性。方法:以0.1~3.2μmol/L Gem处理C33a细胞,以0.5~512μmol/L Gem处理Siha细胞,72 h后用MTT法测定细胞活力,计算半数抑制浓度(IC50);使用Western blot法和逆转录-聚合酶链反应检测各细胞中RRM2表达;采用浓度梯度倍增和大剂量冲击相结合的方法对Siha细胞进行Gem耐药诱导培养,构建Siha/Gem耐药细胞株;在Siha/Gem细胞中,使用RNA干扰技术敲低RRM2表达并检测敲低前后Gem对细胞的IC50。结果:Gem对C33a、Siha细胞的IC50分别为0.63、16.8μmol/L。与C33a细胞比较,Siha细胞中RRM2的表达较高。与Siha细胞相比,Siha/Gem耐药细胞(耐药指数为16.26)中RRM2表达增强。Gem对敲低RRM2表达的Siha/Gem耐药细胞的IC50降低,其逆转耐药倍数为4.24。结论:宫颈癌细胞系中RRM2表达可能与细胞对Gem的敏感性呈负相关,敲低RRM2表达可增加细胞对Gem的敏感性。
[Abstract]:Aim: to investigate the relationship between the expression of ribonucleotide reductase small subunit M2 (RRM2) and the sensitivity to gemcitabine (Gem) in cervical cancer cell lines C33a and Siha. Methods: C33a cells were treated with 0.1 渭 mol/L Gem and Siha cells were treated with 0.5 渭 mol/L Gem. After 72 h, the cell viability was determined by MTT assay, the half inhibitory concentration (IC50) was calculated, and the expression of RRM2 was detected by Western blot and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The Siha cells were induced to be resistant to Gem by the combination of concentration gradient doubling and high dose shock. In Siha/Gem cells, RNA interference technique was used to lower the expression of RRM2 and to detect the IC50. of Gem on the cells before and after the knockout. Results: the IC50 of Gem on C33a Siha cells was 0.63n16.8 渭 mol/L., respectively. The expression of RRM2 in Siha cells was higher than that in C33a cells. Compared with Siha cells, the expression of RRM2 was increased in Siha/Gem resistant cells (drug resistance index was 16.26). The IC50 expression of Siha/Gem resistant cells with low RRM2 expression was decreased, and the reversal multiple of Gem resistance was 4.24. Conclusion: the expression of RRM2 in cervical cancer cell line may be negatively correlated with the sensitivity of the cell to Gem, and the low expression of RRM2 may increase the sensitivity of the cell to Gem.
【作者单位】： 中山大学附属第三医院
【分类号】：R737.33

【参考文献】

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本文编号：2271339