RANKL对人子宫内膜癌细胞上皮间质转化的影响

发布时间：2019-03-03 17:16

【摘要】：目的:探讨RANKL对人子宫内膜癌细胞转移和上皮间质转化的影响。方法:体外构建针对细胞核因子κB受体活化因子(RANK)的过表达质粒载体(p IRES2-3FLAG-EGFP-RANK),脂质体法转染人子宫内膜癌HEC-1A细胞株,形成HEC-1ARANK细胞(过表达质粒组),并与HEC-1A~Control细胞(空白质粒组)相对照。给予1μg/ml可溶性细胞因子sRANKL处理后,细胞划痕试验检测细胞迁移能力,CCK-8试验检测细胞的增殖能力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot技术分别检测EMT相关指标E-cadherin、N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白的表达变化。结果:经1μg/ml sRANKL刺激后,HEC-1ARANK细胞迁移能力增强(P0.01),增殖效应没有明显改变(P0.05),上皮性标记物E-cadherin mRNA及蛋白的表达水平下降,间质性标记物N-cadherin、Vimentin mRNA及蛋白的表达水平显著上调(P0.01)。结论:RANKL可通过诱导HEC-1A细胞发生上皮间质转化促进子宫内膜癌的转移。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of RANKL on metastasis and epithelial stromal transformation of human endometrial carcinoma cells. Methods: the overexpression plasmid vector (p IRES2-3FLAG-EGFP-RANK) targeting nuclear factor 魏 B receptor activating factor (RANK) was constructed in vitro and transfected into human endometrial carcinoma cell line HEC-1A by lipofectamine method. HEC-1ARANK cells (overexpressed plasmid group) were formed and compared with HEC-1A~Control cells (blank plasmid group). After treated with 1 渭 g / ml soluble cytokine sRANKL, the cell migration ability was detected by cell scratch test, the proliferation ability was detected by CCK-8 assay, and the EMT related indexes were detected by real-time fluorescence quantitative PCR (qRT-PCR) and Western blot, respectively. The expression changes of N-cadherin, Vimentin mRNA and protein. Results: after stimulation with 1 渭 g / ml sRANKL, the migration ability of HEC-1ARANK cells was enhanced (P0.01), the proliferation effect was not significantly changed (P0.05), the expression level of E-cadherin mRNA and protein was decreased, and the interstitial marker N-cadherin was decreased. The expression of Vimentin mRNA and protein were up-regulated significantly (P0.01). Conclusion: RANKL can promote the metastasis of endometrial carcinoma by inducing epithelial stromal transformation of HEC-1A cells.
【作者单位】： 上海交通大学附属国际和平妇幼保健院妇科;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(No:81172477) 上海市科委自然基金(No:11ZR1440800) 上海市卫生系统优秀学科带头人培养计划(No:XBR2013097)
【分类号】：R737.33

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2433926