细胞周期蛋白依赖性激酶16在卵巢浆液性癌细胞中的表达及其意义

发布时间：2019-03-20 21:51

【摘要】：目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶16(CDK16)在卵巢浆液性癌细胞中的表达情况及其对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的作用。方法:应用qRT-PCR方法检测卵巢浆液性癌细胞株(SK-OV-3,OVCAR-3和HO-8910)和卵巢浆液性癌组织中CDK16 mRNA的表达水平;应用免疫组化检测卵巢浆液性癌组织中CDK16蛋白表达水平。同时,构建2株CDK16干扰慢病毒载体si N1和si N2;将siN1感染卵巢浆液性癌细胞株(SK-OV-3,OVCAR-3和HO-8910),检测siN1在3株卵巢癌细胞株中的沉默效率;然后,干扰SK-OV-3细胞中的CDK16基因后,检测细胞的肿瘤生物学行为变化,采用MTT实验、Brdu实验、体外克隆实验检测细胞增殖能力;采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;采用Transwell和划痕实验分别检测细胞迁徙能力和运动能力。结果:与正常细胞293T相比较,CDK16 mRNA的表达量在卵巢浆液性癌细胞株SK-OV-3,OVCAR-3和HO-8910中分别为7.04±1.26,7.52±1.91,5.62±0.10,与正常细胞293T的表达量4.65±0.97相比,CDK16 mRNA在3株卵巢浆液性细胞中明显高表达(P0.01)。CDK16 mRNA和蛋白在非肿瘤卵巢组织中表达量为46.08±10.05和43.66±8.01,在卵巢浆液性癌组织中表达量为146.73±11.02和185.61±23.08,与非肿瘤卵巢组织相比,CDK16 mRNA和蛋白明显高表达于卵巢浆液性癌组织(P0.01)。手术病理分期I、II、III、IV期中CDK16 mRNA和蛋白的表达量分别是123.20±9.42和163±21.37,129.40±8.79和167.96±18.21,152.27±11.70和201.43±21.31,153.51±6.59和217.20±9.72,患者分期越晚CDK16 mRNA和蛋白表达越高(P0.01);组织学分级G1,G2,G3中CDK16 mRNA和蛋白的表达量分别为125.93±7.30和129.73±14.91,148.29±9.50和197.49±18.30,152.03±6.13和212.03±21.30,组织学分级越差CDK16 mRNA和蛋白表达越高(P0.01);由此可得,CDK16 mRNA的表达水平与浆液性卵巢癌病理分期、肿瘤分化水平之间存在显著负相关关系。CDK16蛋白表达阴性组、阳性组、强阳性组患者的生存时间分别为5.50±0.44,2.00±0.27,1.00±0.13,三组分别比较,差异有统计学意义(P0.05)。本研究成功构建CDK16干扰慢病毒载体siN1和si N2,并且在SK-OV-3细胞中的抑制效率分别为86.6%和85.0%,满足后续实验要求SK-OV-3细胞感染siN1慢病毒之后,从第2天开始细胞表现增殖减低,一直持续到第5天时其细胞增殖数量显著降低(P0.05);SK-OV-3细胞处于G1的细胞明显增多,G2的细胞明显减少,S期的细胞变化不大;SK-OV-3细胞的体外克隆形成能力明显减少(P0.01);SK-OV-3细胞凋亡明显增加(P0.01);SK-OV-3细胞侵袭率显著降低(P0.05);SK-OV-3细胞的运动能力明显降低(P0.01)。结论:CDK16在卵巢浆液性癌细胞株和癌组织中呈高表达;干扰CDK16基因能够抑制卵巢浆液性癌细胞SK-OV-3的增殖和迁徙能力,促进其凋亡;CDK16基因可能是一个促癌基因,为后续深入研究CDK16基因在卵巢浆液性癌发生发展的作用奠定了实验基础。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31

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本文编号：2444663