FR180204对PCOS患者卵巢颗粒细胞ERK丝氨酸磷酸化及GLUT-4蛋白表达的影响

发布时间：2020-03-31 07:33

【摘要】：目的:检测细胞外信号调节激酶(Extracellular signal regulates kinase,ERK)蛋白激酶抑制剂FR180204对多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者卵巢颗粒细胞ERK丝氨酸磷酸化及葡萄糖转运蛋白-4(Glucose transporters-4,GLUT-4)蛋白表达的影响,从分子水平探讨PCOS的发生机制。方法:收集行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的PCOS患者和非PCOS患者取卵当日卵泡液各20份,分离纯化得到黄素化颗粒细胞。将PCOS患者每份细胞样本一分为二,置于2个培养瓶中分别进行培养,其中一组培养液中添加FR180204为研究组,即PCOS+IN组(n=20);另一组不添加FR180204,作为PCOS组(n=20)。非PCOS患者的黄素化颗粒细胞进行培养作为对照组,即N-PCOS组(n=20)。采用Western blot方法对各个组别颗粒细胞中的ERK丝氨酸磷酸化进行测定,并分析GLUT-4蛋白的表达程度。结果:(1)PCOS组与非PCOS组在年龄、不孕年限、体重指数、基础雌二醇、卵泡刺激素、泌乳素、Gn启动量、Gn总用量方面比较,差异均无统计学意义(t值分别为0.000,1.870,0.828,1.480,0.099,0.261,1.376,0.924,均P0.05);相比于N-PCOS组,PCOS组有较高的基础促黄体生成激素、睾酮水平以及获卵数量,差异均有统计学意义(t值分别为7.582,4.577,2.330,均P0.05)。(2)三组患者ERK丝氨酸磷酸化及GLUT-4蛋白表达量比较均具有统计学差异(F值分别为36.773,593.955,均P0.05);相比于对照组,PCOS组的ERK丝氨酸磷酸化明显较高,但是其GLUT-4蛋白的表达程度较低(P0.05);FR180204处理后ERK丝氨酸磷酸化明显降低,GLUT-4蛋白表达量仍较N-PCOS组低,但较FR180204未处理组表达量高(P0.05)。结论:(1)FR180204在降低ERK丝氨酸磷酸化的同时还能够在一定程度上促进颗粒细胞中GLUT-4蛋白的表达;(2)胰岛素的两条信号通路之间存在相互联系,FR180204通过降低ERK丝氨酸磷酸化,可抑制MAPK/ERK通路活性,从而使得卵巢颗粒细胞中PI3K通路的活性得到一定的提升,进而促进下游蛋白GLUT-4的进一步表达;(3)PCOS的发生与MAPK/ERK通路异常激活密切相关。
【图文】：

换液后再观察，发现培养液中红细胞几乎全部去除。48 h及 72 h 后的颗粒细胞形态基本无明显变化。见图1.1,1.2(Fig.1.1,Fig.1.2)1注:PCOSGroup VS N-PCOSGroup,*P＜0.05

图 1.1 培养24小时的细胞形态（×100） 图 1.2 培养24小时的细胞形态（×400）Fig.1.1 The cells after 24 hours cultivation（×100） Fig.1.2 The cells after 24 hours cultivation（×4003 Western blot 蛋白印迹法检测各组ERK丝氨酸磷酸化及GLUT-4 蛋白表达3.1 三组患者的 ERK 丝氨酸磷酸化及 GLUT-4 蛋白表达比较PCOS组患者的ERK丝氨酸磷酸化较N-PCOS 组高，GLUT-4蛋白表达较N-PCO组低，差异具有统计学意义( P＜0.05)。见图2.1,2.2(Fig.2.1,Fig.2.2)。3.2 加入 FR180204 后三组患者的 ERK 丝氨酸磷酸化及 GLUT-4 蛋白表达比较FR180204 处理后 PCOS+IN 组的 ERK 丝氨酸磷酸化明显降低,但仍高于 N-PCOS组，GLUT-4 蛋白表达量较 PCOS 组升高，但仍低于 N-PCOS 组低，，差异具有统计学意义( P＜0.05)。见图 2.1,2.2(Fig.2.1,Fig.2.2)。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R714.8

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张晓薇,刘树铮;大鼠卵巢颗粒细胞单层培养及功能检定[J];中华内分泌代谢杂志;1988年02期

2 李攀;殷慧群;陈京京;刘迎春;姜宏;;间充质干细胞来源微囊泡对卵巢颗粒细胞的作用[J];生殖医学杂志;2016年12期

3 曾妮;王霞;郑洁;周春;马玲;洪志丹;张元珍;;双酚A干扰人卵巢颗粒细胞雌二醇生成的机制[J];武汉大学学报(医学版);2016年05期

4 叶婧;丁婷;杜小芳;杨书红;沈薇;石良艳;罗爱月;王世宣;;不同分离方法对人卵巢颗粒细胞体外培养的影响[J];中国现代医学杂志;2013年17期

5 高国龙;;血清饥饿法同步化牛卵巢颗粒细胞周期的研究[J];湖北农业科学;2012年08期

6 陈蕾;李敏;孙影;王伟周;王蔼明;;多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞凋亡基因的研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年06期

7 赵海波,罗丽兰,刘义;胰岛素样生长因子-I对人卵巢颗粒细胞DNA合成的影响[J];第四军医大学学报;2000年03期

8 蔚建斌;连方;;基于“肾主生殖”理论探讨卵巢颗粒细胞增殖机理研究[J];中国民族民间医药;2016年04期

9 杨正望;刘慧萍;陈明辉;王小玉;严青;;补肾活血方对离体培养卵巢颗粒细胞性激素分泌的影响[J];湖南中医杂志;2015年04期

10 张英;陆芝英;王婷;王佳佳;华克勤;;促性腺激素释放激素拮抗剂对卵巢颗粒细胞分泌抗苗勒管激素的影响[J];中国妇幼保健;2014年09期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 李碧侠;赵芳;任守文;付言峰;;SIRT1基因对猪卵巢颗粒细胞中生殖激素受体表达量的影响[A];江苏省遗传学会2016年学术年会论文摘要集[C];2016年

2 李荣芳;邬静;袁莉芸;文利新;袁慧;;氯丙嗪对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集（下册）[C];2011年

3 黄丽丽;;低剂量米非司酮对人卵巢颗粒细胞的影响[A];中华医学会第一届全球华人妇产科学术大会暨第三次全国妇产科中青年医师学术会议论文汇编[C];2007年

4 罗倩萍;罗子淼;张正红;王正朝;;AngⅡ对大鼠卵巢颗粒细胞增殖的作用[A];细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉论文摘要集[C];2013年

5 倪江;朱辉;;大鼠多囊卵巢颗粒细胞凋亡的实验研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展（下册）[C];1999年

6 罗新;陈舒;陈芳;王晓玉;蒋学风;帅翰林;;脐带间充质干细胞修复化疗所致卵巢颗粒细胞损伤的体外实验研究[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科肿瘤会场（妇科肿瘤学组、妇科病理学组）论文汇编[C];2012年

7 肖蕴祺;倪迎冬;;Kisspeptin-10对鸡卵巢颗粒细胞孕酮分泌的影响及机制研究[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年

8 何泓;王少晶;翁慧男;李翠兰;谭鹰;李维枢;苏静;陈见美;生秀杰;;卵巢颗粒细胞HOXA10基因的表达受睾酮调控[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科内分泌会场（妇科内分泌学组、绝经学组、计划生育学组）论文汇编[C];2012年

9 张正红;吴艳青;陈丽云;王正朝;;HIF在HCG诱导大鼠卵巢颗粒细胞ET-2表达中的调节作用[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年

10 邵康;吴小雪;盛晟;张佳;李维新;周杰;;组脂联素对皖南花猪卵巢颗粒细胞性激素生成的影响[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 陈曦;打破卵子数量生理限制只需给卵巢颗粒细胞喝点“饮料”[N];科技日报;2020年

2 记者 李哲;生殖衰老治疗研究获突破[N];健康报;2020年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 林嘉鹏;绵羊卵巢颗粒细胞miRNA的鉴定和功能研究[D];石河子大学;2019年

2 高可心;RUNX1和RUNX2在奶山羊卵巢颗粒细胞中的表达调控机理及功能研究[D];西北农林科技大学;2018年

3 马海东;MiR-101-3p通过靶基因STC1对奶山羊卵巢颗粒细胞调控机理的研究[D];西北农林科技大学;2019年

4 孟绿荷;MicroRNA-28-5p对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞功能调控的分子机制实验研究[D];南方医科大学;2019年

5 王楠;XBP1在卵巢颗粒细胞及子宫内膜功能调节中的作用研究[D];西北农林科技大学;2018年

6 项云改;miR-483靶向调节IGF1进而调控PCOS抑制人卵巢颗粒细胞增殖的研究[D];郑州大学;2018年

7 窦云德;STMN1、DENND1A在卵巢颗粒细胞中的作用研究[D];山东大学;2018年

8 郑琴;PCOS对卵巢及母胎界面生殖功能的影响及调控机制[D];大连医科大学;2018年

9 李沛霖;补肾调冲含药血清对离体大鼠卵巢颗粒细胞分泌功能与结构的影响[D];天津中医学院;2005年

10 夏天;补肾调冲方对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分泌及其相关基因表达的影响[D];天津中医学院;2005年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张嘉欧;BMAL1对人卵巢颗粒细胞中雌激素合成的影响及其与PCOS相关性的研究[D];上海交通大学;2016年

2 王金萍;FR180204对PCOS患者卵巢颗粒细胞ERK丝氨酸磷酸化及GLUT-4蛋白表达的影响[D];青岛大学;2018年

3 周圆圆;全氟辛酸（PFOA）对人卵巢颗粒细胞间缝隙连接通讯的影响及其与细胞凋亡的关系[D];浙江大学;2019年

4 刘进;mTOR/RPS6信号通路与PCOS的相关性研究[D];南华大学;2019年

5 张淑娜;miR-17-5p通过靶向E2F1基因调控猪卵巢颗粒细胞功能的研究[D];华中农业大学;2019年

6 杨静;基于PI3K/AKT信号通路探讨左归丸含药血清对顺铂所致的人卵巢颗粒细胞损伤的保护机制研究[D];暨南大学;2017年

7 张妮娜;花生四烯酸（AA）对牛卵巢颗粒细胞的作用研究[D];西北农林科技大学;2019年

8 曹贺然;TGIF1对奶山羊卵巢颗粒细胞E2/P4分泌及凋亡作用的研究[D];西北农林科技大学;2019年

9 裴承斌;FSH在ERS介导的卵巢颗粒细胞凋亡中的作用及分子机制[D];宁夏医科大学;2017年

10 蒋小涵;LRH-1对牛卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇激素分泌的调控[D];西北农林科技大学;2019年

本文编号：2608769