低剂量分次照射通过VEGF、mTOR逆转卵巢癌顺铂耐药机制的研究

发布时间：2020-04-02 15:15

【摘要】：目的:卵巢癌在妇科肿瘤中是多发癌症之一,在以往的10年中其发病率在我国增加了近30%,而死亡率也有近18%的增长。卵巢癌的临床医治多采取癌细胞减灭术结合以铂类为基本用药的化疗,但卵巢癌细胞对一线细胞毒性药物--顺铂,容易产生耐药性,致使70%的患者经过规范的治疗后仍会复发,其复发的首要原因就是化疗耐药,导致五年生存率在30%~50%的范围徘徊。因此,本实验采用卵巢癌荷瘤裸鼠为实验模型,开展研究,目的在于探究低剂量分次照射是否能够通过VEGF、m TOR改善卵巢癌的顺铂耐药及其相关机制。方法:大量培养顺铂耐药的卵巢癌细胞(SKOV3/DDP),将该种细胞接种于BALB/C裸鼠,制造卵巢癌荷瘤裸鼠模型。成瘤后把所有的荷瘤裸鼠随机分成三个组,即低剂量分次照射组、常规剂量照射组以及对照组。对照组的裸鼠不给予照射。低剂量分次照射组的裸鼠在每周的第1、2天给予照射,一天分割2次照射,每次剂量0.5Gy,间隔6个小时;共照射4周,总剂量8.0Gy。常规剂量照射组的裸鼠仅于每周的第1天进行1次照射,每次剂量为2.0Gy,共照射4周,总剂量8.0Gy。隔天测量瘤体的最大长径(a)和垂直径(b),依据肿瘤的体积,制作其生长曲线。4周照射终止后,剥离裸鼠的瘤体,计算其抑瘤率。运用RT-PCR技术在基因水平检测VEGF和mTOR mRNA的相对表达量,借助Western Blotting技术检测相应蛋白(VEGF,m TOR,p-mTOR)的表达量。结果:经过绘制肿瘤的生长曲线可知:低剂量分次照射和常规剂量照射均可达到抑制肿瘤细胞生长的效果,二者与对照组比较存在明显差异(P0.05),差异具有统计学意义。低剂量分次照射组抑瘤率(37.5603%)低于常规剂量照射组抑瘤率(47.4446%),二者之间无显著差异(P㧐0.05)。与对照组和常规剂量照射组相比,低剂量照射组中VEGF的mRNA表达水平明显降低(P0.05),差异存在统计学意义,而常规剂量照射组与对照组之间VEGF的mRNA表达不存在统计学差异;三个组中m TOR的基因表达水平均无显著差异,但p-mTOR蛋白的表达在低剂量分次照射组中明显降低(P㩳0.05)。Western Blotting技术从蛋白水平印证了上述结论。结论及意义:PI3K/AKT信号通路是国际公认的抗凋亡、促存活的信号通路,其上下游因子VEGF、mTOR在该通路中发挥极为重要的作用。经本实验研究发现,低剂量分次照射能够对抗卵巢癌细胞的生长。此外,低剂量分次照射可以发挥逆转卵巢癌顺铂化疗耐药的作用,这与低剂量分次照射调节VEGF、mTOR的表达息息相关。该研究为耐顺铂卵巢癌患者的临床医治指明了新的研究方向。
【图文】：

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图 1：卵巢癌荷瘤裸鼠图片鼠生存率的比较图 2：各组裸鼠的生存率成瘤之后至末次照射结束，整个过程中，对照组：3 只裸剂量分次照射组：2 只死亡，生存率 80%；常规剂量组：经统计研究，各组中裸鼠生存率无统计学差别（P＞0.05）瘤抑制率的比较h 后，剥离瘤体，如图 3 所示，称重，据公式计算其抑制率

裸鼠,生存率

17图 2：各组裸鼠的生存率自裸鼠接种成瘤之后至末次照射结束，整个过程中，对照组：3 只裸鼠死率 70%；低剂量分次照射组：2 只死亡，生存率 80%；常规剂量组：3 只存率 70%。经统计研究，各组中裸鼠生存率无统计学差别（P＞0.05）。3.1.3 各组肿瘤抑制率的比较末次照射 24h 后，剥离瘤体，如图 3 所示，，称重，据公式计算其抑制率，抑照组肿瘤组织平均质量-实验组肿瘤组织平均质量)/对照组肿瘤组织平100%。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.31

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