miRNA-497通过调控FASN的表达抑制卵巢癌细胞的增殖的初步研究

发布时间：2017-03-23 02:19

  本文关键词：miRNA-497通过调控FASN的表达抑制卵巢癌细胞的增殖的初步研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[研究目的]通过研究：miRNA-497在上皮性卵巢癌组织／细胞中的表达情况,miRNA-497对卵巢癌细胞增殖能力的调控,以及miRNA-497对卵巢癌中FASN基因和蛋白的表达水平的影响,探讨miRNA-497与FASN之间的关系,为临床卵巢癌诊治以及选择性靶向药物应用提供新的实验研究依据。[研究方法]1.经东南大学附属中大医院伦理学委员会同意,收集东南大学附属中大医院卵巢癌患者的标本及正常卵巢标本进行本实验研究,所有标本均取自术前未经放化疗的患者且经病理学确诊。分别提取10例上皮性卵巢癌组织及10例相关正常卵巢组织中的RNA,qPCR技术分析不同卵巢组织中miRNA-497、FASN的表达情况,通过person相关性分析方法分析二者有无相关性。2.应用qPCR技术检测人卵巢癌细胞SKOV3、A2780中miRNA-497的表达水平。3.转染miRNA-497 mimics、miRNA-497 inhibitor至卵巢上皮性癌细胞株SKOV3中,转染miRNA-497 mimics control、miRNA-497 inhibitor control作为阴性对照,未转染组为空白对照,CCK8实验检测不同实验组的细胞增殖能力的变化情况。4.PCR方法检测转染后不同组别细胞中FASN的mRNA的表达情况。5. Western blot方法分析转染后不同实验组的细胞中FASN蛋白表达改变情况。[研究结果]1.与正常上皮性卵巢组织相比,miRNA-497在上皮性卵巢癌组织中是低表达的,FASN是高表达的。pearson相关性分析表明,卵巢癌组织中miRNA-497与FASN中mRNA的表达存在负相关(r=-0.45884,p0.01)。2.人卵巢癌细胞SKOV3、A2780中miRNA-497的表达结果显示：SKOV3中miRNA-497的表达低于A2780,具有统计学差异(p0.05),故选取SKOV3细胞作为后续研究的靶细胞。3. miRNA-497可以抑制卵巢癌细胞株SKOV3细胞的增殖。CCK8结果显示miRNA-497 mimics作用SKOV3细胞后,靶细胞的细胞增殖能力明显受到抑制,与对照组相比均具有统计学意义(p0.05)；miRNA-497 inhibitor作用SKOV3细胞后,靶细胞的细胞增殖能力也会相应地提升,与对照组相比均具有统计学意义(p0.05)；表明miRNA-497对SKOV3细胞的生长存在抑制效应(p0.05),但此效应不会随着作用时间的增加而增加(p0.05)。4. miRNA-497可以抑制FASN的表达。miRNA-497 mimics作用SKOV3细胞后,可下调FASN的基因和蛋白表达,与其它对照组相比均具有统计学意义(p0.05)；而miRNA-497 mimics组中FASN的mRNA及蛋白的表达是下调的。这说明在卵巢癌中,miRNA-497可以抑制FASN的表达。[结论]1. miRNA-497在上皮性卵巢癌组织中的表达较正常卵巢组织明显降低,而FASN基因在上皮性卵巢癌组织中却存在异常高表达,bearson相关性分析表明二者的表达水平存在负相关性。2. miRNA-497体外显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的生长、增殖,对卵巢癌细胞的生物学特性有一定影响,但此抑制效应与作用时间的长短无明显关联。3.卵巢癌中1niRNA-497可以调控FASN的表达水平,FASN是miRNA-497的靶基因。miRNA-497可能是通过抑制FASN的表达而影响卵巢癌细胞的增殖,但具体机制不甚明朗。本实验结果为深入了解miRNA497在卵巢癌中的作用提供了理论依据,也为临床上进一步研究卵巢癌的靶向治疗提供了实验依据。
【关键词】：miRNA-497 卵巢癌 脂肪酸合成酶 FASN 增殖
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 英文缩略词表9-13
• 前言13-15
• microRNA-497家族与疾病关系的研究进展 文献综述15-27
• 1. 材料与方法27-40
• 1.1 实验材料27-30
• 1.2 实验方法30-40
• 1.3 统计学分析40
• 2. 结果40-46
• 3. 讨论46-49
• 结束语49-50
• 结论50-51
• 主要成果、存在问题与展望51-54
• 作者简介54-56
• 致谢56-57
• 参考文献57-64

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