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人胎盘间充质干细胞对妊娠期糖尿病大鼠血糖及胰岛细胞形态学影响的研究

发布时间:2020-04-14 22:41
【摘要】:目的目前妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是影响妊娠结局的重要疾病之一,妊娠期血糖增高会产生一系列不良妊娠结局:巨大儿、新生儿低血糖、剖宫产增加等。目前对于妊娠期糖尿病的治疗主要依靠胰岛素干预,但其无法从发病机制上治疗妊娠期糖尿病。近年来,关于疾病的生物学治疗越来越引起人们的重视,尤其是间充质干细胞的相关研究。因此,为了间充质干细胞能够早日用于妊娠期糖尿病的治疗,相关基础研究尤为迫。因此我们利用妊娠期糖尿病鼠模型,来研究人胎盘来源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)能否改善血糖水平,以及干预后胰岛细胞形态学改变。方法本实验所有胎盘均来自于正常足月剖宫产分娩的人胎盘组织。从胎盘中提取出间充质干细胞,进行分离、培养及鉴定。倒置显微镜下观察人胎盘来源间充质干细胞形态学特征妊娠期糖尿病模型的制备采用“高脂高糖饮食+低剂量STZ腹腔注射”的方法。所有成模的鼠模型随机分组。其中正常孕鼠组(A组)10只、GDM鼠未经干预组(B组)10只、GDM鼠生理盐水干预组(C组)10只、GDM鼠人胎盘来源干细胞干预组(D组)10只,然后实验组给予人胎盘来源间充质干细胞干预,对照组给予等量的生理盐水干预。所有大鼠于妊娠第6天、12天、18天检测空腹血糖,并于妊娠第18天解剖取出各组大鼠胰腺组织做石蜡切片,于显微镜下观察各组胰岛细胞形态学变化。结果1、分离获得人胎盘来源间充质干细胞呈梭形贴壁生长,生长状态良好。通过流式细胞仪检测其表面抗原表达情况,阳性表达CD44、CD105、CD1172、GDM各组与正常孕鼠组(A组)血糖比较:GDM各组血糖在妊娠第6天、12天、18天均高于正常孕鼠组,差异有统计学意义(P0.05);GDM各组间比较:未干预组(B组)与生理盐水干预组(C组)之间血糖水平相比较,差异无统计学意义(P0.05);与B、C组相比,hPDMSCs干预组(D组)血糖水平降低,差异有统计学意义(P0.05);3、各组不同时间点空腹血糖变化:自妊娠第4天起GDM各组血糖趋于稳定;给予人胎盘来源间充质干细胞干预组空腹血糖自妊娠第6天起呈下降趋势。4、各组GDM大鼠胰岛组织有不同程度细胞坏死,胰岛严重破坏,胰岛细胞镜下数量明显减少;但人胎盘来源间充质干细胞移植组的胰岛细胞炎性反应可见明显减轻,炎性细胞浸润明显减少。结论尾静脉途径将人胎盘来源间充质干细胞植入GDM鼠体内,能够改善其血糖水平,病理结果提示可能通过修复受损的胰岛细胞发挥作用。
【图文】:

间充质干细胞,胎盘,倒置显微镜,来源


未见明显细胞悬浮,培养基屮未见明显杂质(见图1)。逡逑?邋?邋'逡逑图1邋3代人胎盘来源间充质干细胞镜卜'观察逡逑倒置显微镜下观察,融合度约70%邋(放大倍数分别为100X、400X)逡逑(二)

孕鼠,生理盐水,光镜,细胞


与B、C组比较,hPDMSCs干预组(D组)血糖水平降低,差异有统计学逡逑意义(尸<0.05);逡逑3.空腹血糖变化逡逑自妊娠第4天起GDM各组血糖趋于稳定;给予人胎盘来源间充质干细胞逡逑干预组空腹血糖自妊娠第6天起呈下降趋势;逡逑(四)人胎盘来源间充质干细胞移植后大鼠胰岛组织病理变化逡逑细胞移植后丨4灭,正常孕鼠疽鹊盒翁#史岣唬扪仔韵赴螅义弦认儋拗翁嬖颍峁菇裘堋I硌嗡福吭ぷ橐鹊菏棵飨约跎伲饰踝矗义闲翁芳眩峁顾缮ⅲ赴呓绮磺澹罅苛馨拖赴蟆8上赴ぷ橐认馘义献橹鹊何趺飨愿纳疲仔韵赴竺飨约跚帷#螅矗╁义

本文编号:2627794

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