nsPEFs诱导宫颈癌细胞免疫原性死亡及消融实体瘤激发免疫应答的研究

发布时间：2020-04-22 12:36

【摘要】：目的:(1)探究nsPEFs对不同种源宫颈癌细胞的杀伤作用及是否能诱导宫颈癌细胞免疫原性死亡。(2)观察nsPEFs对小鼠皮下宫颈癌移植瘤的消融作用及其激发的特异性免疫应答作用。方法:(1)采用不同场强的nsPEFs刺激人宫颈癌HeLa细胞和小鼠宫颈癌U14细胞悬液。通过CCK-8法、流式细胞术和ELISA法分别检测电刺激后肿瘤细胞的细胞活性、凋亡率和损伤相关分子模式(DAMPs)的表达情况。(2)构建小鼠宫颈癌皮下移植瘤动物模型,分别观察nsPEFs消融实体瘤效应及检测激发小鼠机体的免疫应答。实验分为空白对照组、肿瘤组及刺激组三组。观察nsPEFs消融实体肿瘤后小鼠的体重及肿瘤生长变化等情况。流式细胞术检测nsPEFs对皮下移植瘤消融后小鼠淋巴结、脾脏和实体肿瘤组织中DCs的分化成熟、T细胞的分化活化以及T细胞释放细胞因子的情况。结果:(1)随着场强的提高和时间的增加,nsPEFs刺激后细胞的活力逐渐降低,凋亡率明显升高;在场强10 kV/cm以上的nsPEFs刺激后分别在24 h和3h检测到HeLa和U14细胞的钙网蛋白(CRT)、热休克蛋白70(HSP70)以及高迁移族蛋白-1(HMGB1)的表达上调。(2)小鼠皮下宫颈癌实体瘤建模后,小鼠体重速度增长减缓;肿瘤体积逐渐增大,在nsPEFs消融后迅速增大至高峰,同时脾脏指数显著性升高。nsPEFs消融皮下移植瘤后,实体瘤组织中DCs的分化成熟、CD8~+分化活化以及CD4~+和CD8~+细胞中释放的IFN-γ、TNF-β和GzB等细胞因子在刺激组比肿瘤组中均有显著性上升;淋巴结和脾脏组织中DCs的频率和细胞因子TNF-β的表达在刺激组比肿瘤组中均有显著性上升,而CD4~+细胞的活化明显下降。结论:(1)nsPEFs对不同来源宫颈癌细胞的杀伤效果具有差异性;nsPEFs刺激后能诱导凋亡的宫颈癌细胞释放DAMPs信号从而激活细胞发生免疫原性死亡。(2)nsPEFs能够有效消融小鼠移植实体瘤,抑制肿瘤的生长。(3)nsPEFs消融小鼠移植实体瘤后,通过促进DCs的分化成熟、T细胞的分化活化以及IFN-γ、TNF-β和GzB等多种免疫细胞因子的释放等进而激活机体局部和全身性免疫系统的应答。
【图文】：

遵义医科大学硕士学位论文 刘剑英况下，机体各脏器的重量和体重的比值是相对恒定的。当动物受到肿瘤侵袭后，局部或者全身免疫系统被激活，而脾脏作为全身免疫系统的主要器官之一可能发生脏器充血、水肿或增生肥大等，，因而脾脏指数也会发生相应的变化。如图 7B所示，小鼠建模后肿瘤组和刺激的脾脏指数与空白对照组相比都增大，说明脾脏对肿瘤的存在产生了应激或免疫反应。同时刺激组和肿瘤组相比无显著性差异，说明 nsPEFs 对肿瘤消融电刺激后激发机体以脾脏为代表的全身免疫系统反应在宏观上表现不明显。
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R737.33

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 常凯凯;杨慧丽;周文洁;李明清;谢锋;;缺氧通过刺激胸腺基质淋巴细胞生成素分泌促进宫颈癌细胞体外侵袭[J];中国临床医学;2017年02期

2 陈观娣;范格英;游可理;钱德英;岑坚敏;舒焰红;李志刚;;5-氮杂-2'-脱氧胞苷对宫颈癌细胞的基因表达调控[J];实用医学杂志;2016年18期

3 李娟;多重PCR分析宫颈癌细胞中16型HPV的状态[J];国外医学(预防、诊断、治疗用生物制品分册);2004年03期

4 贺帅;吴彦萍;蔡湘仪;陈红波;王丽君;黄来强;;姜黄素对宫颈癌细胞生长与增殖的影响研究[J];现代生物医学进展;2017年01期

5 李晶;魏枫;杨帆;郑禹;赵华;任秀宝;;宫颈癌细胞高迁移率族警报素的分泌与肿瘤浸润淋巴细胞的相关性[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2017年03期

6 冯思佳;崔静;杨璐;赵二趁;柴婕;杨丹丹;张翠翠;王志慧;郜培琼;千新来;;集聚蛋白基因在不同宫颈癌细胞中的表达[J];新乡医学院学报;2016年05期

7 李晓兰;谢环;刘云;;宫颈癌细胞凋亡逃逸与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体的表达[J];中国妇幼保健;2016年13期

8 刘霏;李浩然;程玺;李梦娇;王子良;杨莉;;蟾蜍灵对宫颈癌细胞的增殖抑制作用及其机制研究[J];中国癌症杂志;2015年10期

9 潘惠艳;赵群;詹阳;赵丽红;张卫华;吴玉梅;;电压门控钠离子通道表达对宫颈癌细胞增殖侵袭转移作用的研究[J];中国肿瘤临床;2012年04期

10 马旭;朱艳;杨青;秦书俭;白光;;枸杞多糖对小鼠宫颈癌细胞增殖的影响[J];江苏医药;2016年07期

相关会议论文 前10条

1 潘惠艳;赵群;詹阳;;电压门控钠离子通道对宫颈癌细胞侵袭转移作用的研究[A];第七届全国医学生物化学与分子生物学和第四届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术研讨会暨医学生化分会会员代表大会论文集[C];2011年

2 郑秀惠;陈竹钦;李力;梁培禾;;~(252)锎中子放疗对宫颈癌细胞凋亡和增殖的影响[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年

3 田小飞;彭芝兰;;VEGF-C对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响研究[A];中华医学会第九次全国妇科肿瘤学术会议论文汇编[C];2006年

4 郑秀惠;李力;陈竹钦;郭建新;;~(252)锎中子放疗对宫颈癌细胞凋亡和增殖的影响[A];中华医学会第一届全球华人妇产科学术大会暨第三次全国妇产科中青年医师学术会议论文汇编[C];2007年

5 夏咸梅;;宫颈癌细胞学筛查在基层的试行及推广[A];中华护理学会全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2010年

6 陈红;陈惠祯;吴绪峰;杨庆忆;刘诗权;;环孢菌素逆转宫颈癌细胞耐药性的研究[A];全国子宫颈癌暨湖北省妇科肿瘤专业委员会第五次妇科肿瘤学术会议论文汇编[C];2006年

7 张金亮;宗铖;郑晓姗;徐梦溪;任斌;;拉曼光谱用于宫颈癌细胞中生物分子的研究[A];第十八届全国光散射学术会议摘要文集[C];2015年

8 郭菲;汪泱;缪丽芳;余娜莎;刘丝荪;;氯化镧抑制宫颈癌细胞转移的作用及机制[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年

9 郑秀惠;李力;陈竹钦;;~(252)锎中子放疗对宫颈癌细胞凋亡和增殖的影响[A];中华医学会第九次全国妇科肿瘤学术会议论文汇编[C];2006年

10 熊洁琦;刘丝荪;冯年花;娄远蕾;郭菲;;二氧化硒对宫颈癌细胞的抑制作用及机制[A];细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉论文摘要集[C];2013年

相关重要报纸文章 前5条

1 范杉珊;宁夏首次发现枸杞中有抗癌功效的物质[N];华兴时报;2008年

2 记者 戴湘宏;抗癌路上大风歌[N];湘潭日报;2005年

3 孙莉莉 茅清;从群众最切身的利益出发[N];中国人口报;2010年

4 浙江省嘉兴市妇幼保健院信息科 陆菲;医院信息化：简单即快乐[N];计算机世界;2009年

5 宁静;人体中的抗癌液[N];民族医药报;2006年

相关博士学位论文 前10条

1 刘明珠;小檗碱对宫颈癌细胞抑制作用及放射增敏性研究[D];郑州大学;2018年

2 周琛斐;TWIST2通过miR-221-3p靶向THBS2促进宫颈癌淋巴结转移的分子机制[D];南方医科大学;2018年

3 杨臻;GRSF1介导miR-G-1通过上调TMED5和LMNB1促进宫颈癌细胞的恶性行为及核自噬[D];天津医科大学;2018年

4 王路芳;β-榄香烯通过介导β-catenin/TCF7/Sox2信号通路抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭及上皮间质变的转化[D];中国医科大学;2018年

5 李琳;垂体瘤转化基因1调控miR-3666介导的ZEB1增强宫颈癌细胞侵袭的机制研究[D];吉林大学;2018年

6 王金铭;microRNA-1266通过靶向调控DAB2IP对宫颈癌细胞生物学行为影响的研究[D];郑州大学;2019年

7 漆云翔;宫颈癌细胞EGFR核转位介导的放射抵抗的潜在机制及临床研究[D];广西医科大学;2017年

8 李波;卵巢癌和宫颈癌细胞对二氯乙酸盐的抵抗机制及增敏措施研究[D];第三军医大学;2017年

9 夏丽;Rad21基因干扰对宫颈癌细胞生物学行为的影响及其致癌机制的研究[D];郑州大学;2018年

10 刘佳妹;CircRNA8924竞争性抑制miR-518d/519-5p家族调控CBX8影响宫颈癌细胞生物学行为的机制研究[D];中国医科大学;2018年

相关硕士学位论文 前10条

1 刘剑英;nsPEFs诱导宫颈癌细胞免疫原性死亡及消融实体瘤激发免疫应答的研究[D];遵义医科大学;2019年

2 洪汉卿;Circ_0104541-miR-4429/320a-FoxM1轴调控宫颈癌细胞侵袭转移的机制研究[D];郑州大学;2019年

3 胡卉;基于迁移学习的女性癌症医疗图像识别应用研究[D];天津工业大学;2019年

4 李换男;基于AKT通路研究蟾酥内酯对宫颈癌细胞的影响及其分子机制[D];成都中医药大学;2018年

5 张剑;宫颈癌细胞中miR-130a-TNF-a-NF-κB通路的研究[D];天津医科大学;2013年

6 王艳丽;宫颈癌细胞中miR-181b通过靶定AC9参与由NF-κB调控的正反馈环路[D];天津医科大学;2013年

7 胡启明;MiR-146a前体多态性可能通过调节IRAK1和TRAF6促进宫颈癌细胞的增殖[D];南京医科大学;2016年

8 毛轶凡;MIR218靶向作用于APC抑制宫颈癌细胞行为的研究[D];皖南医学院;2018年

9 陈颖;PRPS2在宫颈癌发生发展中的作用及其机制研究[D];山东大学;2018年

10 李正义;基于强特征CNN-SVM的宫颈癌细胞检测[D];北京交通大学;2018年

本文编号：2636522