LIMK2在卵巢癌中表达及对细胞生物学行为的影响

发布时间：2020-04-23 10:21

【摘要】：目的:本研究在组织水平上分别检测在高级别浆液性卵巢癌及正常卵巢组织中LIM激酶2(LIMK2)的表达,在CAOV3及OVCAR-3卵巢癌细胞系中,应用siRNA下调LIMK2基因表达后,观察细胞生物学行为的变化,进而探讨LIMK2在高级别浆液性卵巢癌发生、发展过程中的作用。方法:利用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测在41例高级别浆液性卵巢癌及30例正常卵巢组织中LIMK2的蛋白表达,实时荧光定量PCR(RT-PCT)方法检测LIMK2 mRNA的表达,并分析其表达与临床病理参数的关系。在细胞水平分别构建观察组LIMK2-siRNA,阴性对照组N-siRNA及空白对照组。应用RT-PCR、Western Blot方法检测转染效率,细胞划痕实验检测细胞转染前后细胞迁移能力的变化,MTT方法检测细胞增殖能力改变,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力改变,流式细胞学检测细胞凋亡。结果:(1)LIMK2在高级别浆液性卵巢癌表达较正常卵巢组织表达明显增高。(2)LIMK2表达与FIGO分期、血清CA125水平相关(P0.05),与年龄、淋巴结转移、肿瘤大小及腹水量无明显差异(P0.05)。(3)在细胞水平研究发现,与阴性对照组N-siRNA及空白对照组相比,观察组LIMK2-siRNA组细胞迁移、侵袭能力明显降低(P0.05),细胞增殖及凋亡能力与对照组及空白对照组无明显差异(P0.05)。结论:LIMK2可以促进卵巢癌细胞的迁移及侵袭能力,可能成为卵巢癌治疗的新靶点。
【图文】：

3 结果3.1 免疫组化检测 LIMK2 蛋白在不同卵巢组织中的表达LIMK2 蛋白表达产物主要定位于细胞浆，在高级别浆液性卵巢癌组织中 LIMK2阳性表达率（75.6%）明显高于正常卵巢组织（13.3%），两组比较差异有统计学意义（p＜0.05），，见表 1、图 1。表 1：LIMK2 在高级别浆液性卵巢癌及正常卵巢组织中的表达roup n - + ++ +++ Positive Rate(%) Pmal 30 26 3 1 0 4 13.3%<0.cer 41 9 4 10 18 31 75.6%

2：高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)和正常卵巢(N)组织中的 LIMK2 mRNA rn blot 检测 LIMK2 蛋白在不同卵巢组织中的表达 blot 结果显示，高级别浆液性卵巢癌中 LIMK2 蛋白表达较正明显增高（P<0.05），见图 3。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.31

【参考文献】

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本文编号：2637628