THBS2对宫颈鳞癌SiHa细胞生物特性的影响
发布时间：2020-04-25 01:52
【摘要】：目的:探讨血小板蛋白2(thrombospondin2,THBS2)在人宫颈鳞癌SiHa细胞中的表达水平及其细胞生物学功能。方法:构建NC及THBS2的慢病毒载体即NC-LV及THBS2-LV,分别感染SiHa细胞,Western blot及荧光定量PCR对比感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa细胞中THBS2的表达水平;采用CCK-8法、Transwell实验和划痕实验对比感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa细胞增殖、迁移、侵袭能力的区别;流式细胞仪检测感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa细胞的细胞周期及细胞凋亡情况。结果:感染THBS2-LV的SiHa细胞的THBS2表达增高;感染THBS2-LV后宫颈鳞癌SiHa细胞的增殖、侵袭、迁移能力均下降;感染THBS2-LV后宫颈鳞癌SiHa细胞凋亡增高。结论:THBS2抑制宫颈鳞癌SiHa细胞的增殖、侵袭与迁移,THBS2可能是宫颈鳞癌的一个抑癌基因,可作为该疾病的潜在治疗靶点。
【图文】：
细胞呈长梭形。如图2-1：图 2-1 显微镜下 SiHa 细胞的形态Figure 2-1 The morphology of SiHa cells under a microscope.(2)荧光显微镜下经过嘌呤霉素筛选后的 SiHa 细胞的形态，如图 2-2：图 2-2 荧光显微镜下经过嘌呤霉素筛选后的 SiHa 细胞的形态Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening.2.2 Western Blot 检测 SiHa 细胞中 THBS2 蛋白表达提取 NC 组、NC-LV 组、THBS2-LV 组每组细胞的总蛋白，THBS2 用鼠抗人抗体、内参 GAPDH 用鼠抗人抗体作为一抗的抗体进行 Western Blot实验。结果如图所示。在 SiHa 细胞中过表达 THBS2 组（即 THBS2-LV 组）中，其灰度值明显高于 NC 组以及 NC-LV 组，通过 SPSS 17.0 统计得出p<0.001，由此证明：SiHa 细胞过表达 THBS2 成功。200×200×
40图 2-2 荧光显微镜下经过嘌呤霉素筛选后的 SiHa 细胞的形态Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening..2 Western Blot 检测 SiHa 细胞中 THBS2 蛋白表达提取 NC 组、NC-LV 组、THBS2-LV 组每组细胞的总蛋白，THBS抗人抗体、内参 GAPDH 用鼠抗人抗体作为一抗的抗体进行 Western 验。结果如图所示。在 SiHa 细胞中过表达 THBS2 组（即 THBS2-LV，其灰度值明显高于 NC 组以及 NC-LV 组，通过 SPSS 17.0 统计得0.001，由此证明：SiHa 细胞过表达 THBS2 成功。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33
【图文】：
细胞呈长梭形。如图2-1：图 2-1 显微镜下 SiHa 细胞的形态Figure 2-1 The morphology of SiHa cells under a microscope.(2)荧光显微镜下经过嘌呤霉素筛选后的 SiHa 细胞的形态，如图 2-2：图 2-2 荧光显微镜下经过嘌呤霉素筛选后的 SiHa 细胞的形态Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening.2.2 Western Blot 检测 SiHa 细胞中 THBS2 蛋白表达提取 NC 组、NC-LV 组、THBS2-LV 组每组细胞的总蛋白，THBS2 用鼠抗人抗体、内参 GAPDH 用鼠抗人抗体作为一抗的抗体进行 Western Blot实验。结果如图所示。在 SiHa 细胞中过表达 THBS2 组（即 THBS2-LV 组）中，其灰度值明显高于 NC 组以及 NC-LV 组，通过 SPSS 17.0 统计得出p<0.001，由此证明：SiHa 细胞过表达 THBS2 成功。200×200×
40图 2-2 荧光显微镜下经过嘌呤霉素筛选后的 SiHa 细胞的形态Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening..2 Western Blot 检测 SiHa 细胞中 THBS2 蛋白表达提取 NC 组、NC-LV 组、THBS2-LV 组每组细胞的总蛋白，THBS抗人抗体、内参 GAPDH 用鼠抗人抗体作为一抗的抗体进行 Western 验。结果如图所示。在 SiHa 细胞中过表达 THBS2 组（即 THBS2-LV，其灰度值明显高于 NC 组以及 NC-LV 组，通过 SPSS 17.0 统计得0.001，由此证明：SiHa 细胞过表达 THBS2 成功。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33
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本文编号：2639647
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