两种冷冻方法对小鼠卵巢组织冷冻复苏及自体移植的影响

发布时间：2020-04-27 17:12

【摘要】：目的:应用不同冷冻方法对小鼠卵巢组织进行冷冻,通过检测小鼠动情周期、血清AMH水平及凋亡卵泡率的变化评估两种冷冻方法对小鼠卵巢组织冻存及自体移植的影响,为临床上患癌女性的生育力保存提供实验依据。方法:将90只小鼠随机分为三组,每组30只。A组为对照组;B组、C组为实验组。A组:切除卵巢后直接将其自体移植。B组:切除卵巢后应用程序化冷冻法冻存21天后行自体移植。C组:切除卵巢后应用玻璃化冷冻法冻存21后行自体移植。于切除卵巢前、移植卵巢前、移植卵巢后21天取血,检测AMH水平,同时分别留取新鲜、解冻后、移植后的卵巢组织,用TUNEL法检测卵泡凋亡率。实验期间每日观察小鼠的动情周期。结果:实验组两组小鼠在切除卵巢后、移植卵巢前动情周期消失,于移植卵巢后又恢复动情周期,恢复动情周期的天数C组明显长于B组(P0.05)。三组小鼠移植卵巢后的动情周期天数明显长于切除卵巢前(P0.05)。实验组两组小鼠血清AMH水平在移植卵巢前均明显低于切除卵巢前(P0.05),在移植卵巢后出现明显回升(P0.05),且B组明显高于C组(P0.05)。三组小鼠血清AMH水平在移植卵巢后均明显低于切除卵巢前(P0.05)。移植后实验组两组始基卵泡、窦卵泡凋亡率明显高于对照A组(P0.05),移植后C组窦前卵泡凋亡率明显高于A组和B组(P0.05)。A组小鼠卵巢组织移植后始基卵泡、窦前卵泡凋亡率明显低于新鲜卵巢组织(P0.05)。B、C组小鼠卵巢组织始基卵泡、窦前卵泡及窦卵泡凋亡率在解冻后和移植后均明显低于冷冻前(P0.05)。结论:1.程序化冷冻和玻璃化冷冻均会损伤小鼠的卵泡,并延长其动情周期。2.程序化冷冻和玻璃化冷冻均会造成小鼠卵巢窦卵泡的凋亡,从而影响AMH的分泌。但程序化冷冻的影响程度要小于玻璃化冷冻。3.冷冻对小鼠卵巢结构和功能的影响在移植后可以得到恢复,但不能达到去卵巢前水平。4.两种冷冻方法相比,程序化冷冻在冷冻小鼠卵巢组织方面更具优势。
【图文】：

动情周期,小鼠,对照组

1 小鼠动情周期变化（Diff-Quik，×4hange of complete estrous in mice (Diff-Proestrus; B: Estrus; C: Metestrus; D: Die 组（对照组）小鼠卵巢组织卵泡凋亡ion of follicular apoptosis in the ovarian t group)A: Pre-transplantation(TUNEL, ×

动情周期,小鼠,对照组

图 1 小鼠动情周期变化（Diff-Quik，×40）Fig.1 The change of complete estrous in mice (Diff-Quik, ×40)A: Proestrus; B: Estrus; C: Metestrus; D: Diestrus
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R714.8

【参考文献】