BRAP在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及临床意义

发布时间：2020-05-15 03:30

【摘要】：目的:1.检测BRAP(BRCA1 associated protein)在慢性宫颈炎(chronic cervicitis)、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈鳞癌(Cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表达情况。2.结合临床病理特征资料,分析BRAP的表达与临床病理特征的关系,为宫颈癌的临床诊断、治疗及判断预后提供理论依据。方法:1.实验标本取自2016年9月-2017年9月在我院(山西医科大学第二医院)妇产科行阴道镜活检、宫颈锥切术、子宫全切术的90例宫颈组织标本。经过我院病理医师检查证实,LSIL、HSIL、CSCC各30例,根据国际妇产科联合会(FIGO)2009修订的宫颈癌临床分期:I期11例,IIa期19例;宫颈癌组织学分级:高中分化16例,低分化14例;有淋巴结转移5例,无淋巴结转移25例;患者年龄28-69岁,平均年龄48岁,其中48岁18例,≥48岁12例;另外选取同期因子宫肌瘤、子宫腺肌症、子宫脱垂等良性病变切除的慢性宫颈炎30例作为对照。2.采用qRT-PCR(SYBR Green法)检测BRAP mRNA在不同宫颈病变组织中的表达,以GAPDH为参照,采用公式2~(-△△Ct)计算各组BRAP mRNA的相对表达量。3.采用Western-blot法检测BRAP蛋白表达情况。4.收集120例患者临床病理特征(患者年龄、肿瘤最大直径、组织分化程度、临床分期、是否有淋巴结转移),分析BRAP的表达与临床病理特征的关系。5.采用SPSS19.0统计软件对所得数据进行分析,BRAP相对表达量采用均数±标准差(?X+S),不同宫颈病变组间差异性的比较采用one-way ANOVA检验;宫颈癌中BRAP的表达量与各临床病理特征之间的关系比较采用Two-sample t-test;P0.05表示差异具有统计学意义。结果:1.实时荧光定量PCR结果显示:BRAP mRNA在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL、CSCC中均有表达,其中CSCC组BRAP mRNA的表达量高于慢性宫颈炎组的3倍,差异具有统计学意义(P0.05);LSIL组、HSIL组分别与慢性宫颈炎组相比BRAP mRNA表达量较高,差异具有统计学意义(P0.05);LSIL组BRAP mRNA的表达量低于HSIL组,差异具有统计学意义(P0.05);LSIL组、HSIL组分别与CSCC组相比表达量较低,差异具有统计学意义(P0.05)。2.Western-blot结果显示:BRAP蛋白在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL、CSCC中均有表达,其中CSCC组BRAP蛋白的表达量高于慢性宫颈炎组的3倍,差异具有统计学意义(P0.05);LSIL组、HSIL组分别与慢性宫颈炎组相比BRAP蛋白表达量较高,差异具有统计学意义(P0.05);LSIL组BRAP蛋白的表达量低于HSIL组,差异具有统计学意义(P0.05);LSIL组、HSIL组分别与CSCC组相比表达较低,差异具有统计学意义(P0.05)。3.BRAP在年龄48岁和≥48岁组中表达量为(2.90±0.17;3.01±0.23),差异没有统计学意义(P0.05);在肿瘤直径大小≤4cm和4cm组中表达量为(3.01±0.23;3.51±0.22),差异具有统计学意义(P0.05);在不同组织分化程度中的表达分别是高/中分化组(2.33±0.09)、低分化组(3.48±0.15),差异具有统计学意义(P0.05);在临床分期中的表达分别是I期(2.32±0.11)、IIa期(3.30±0.16),差异具有统计学意义(P0.05);在是否有淋巴结转移组中的表达分别为有(2.67±0.13)、无(3.68±0.22),差异具有统计学意义(P0.05)。结论:1.BRAP mRNA及蛋白在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL、CSCC中均有表达,且表达水平呈现逐渐增高的趋势。2.BRAP的表达与肿瘤直径大小、宫颈癌组织分化程度、临床分期、是否淋巴结转移等临床病理参数相关,提示BRAP可能在宫颈癌的发生、发展、浸润及转移过程中起着不可忽视的重要作用。3.检测BRAP的表达可作为宫颈癌前病变及宫颈癌的分子生物学指标,为宫颈癌的诊断、分子靶向治疗及预后判断提供科学的理论依据。
【图文】：

扩增曲线,统计学意义,宫颈病变,组分

图 2-1 qRT-PCR 扩增曲线图 2-2 qRT-PCR 溶解曲线2.2 BRAP mRNA 在不同宫颈病变组中的表达以 GAPDH 为参照，采用公式 2-△△Ct计算比较各组 BRAP mRNA 的相对表达（表 2-1，图 2-3）。可见 BRAP mRNA 在正常对照组、LSIL、HSIL、CSCC 中有表达，其中 CSCC 组 BRAP mRNA 的表达量高于正常对照组的 3 倍，差异具有计学意义（P＜0.05）；LSIL 组、HSIL 组分别与正常对照组相比 BRAP mRNA 达量较高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；LSIL 组 BRAP mRNA 的表达量低HSIL 组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；LSIL 组、HSIL 组分别与 CSCC 组比表达量较低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。表 2-1 不同宫颈病变组中 BRAP mRNA 表达量（ X+S）分组 n BRAP 表达量 F P

溶解曲线,统计学意义,宫颈病变,组分

图 2-1 qRT-PCR 扩增曲线图 2-2 qRT-PCR 溶解曲线2.2 BRAP mRNA 在不同宫颈病变组中的表达以 GAPDH 为参照，采用公式 2-△△Ct计算比较各组 BRAP mRNA 的相对表达（表 2-1，图 2-3）。可见 BRAP mRNA 在正常对照组、LSIL、HSIL、CSCC 中有表达，其中 CSCC 组 BRAP mRNA 的表达量高于正常对照组的 3 倍，，差异具有计学意义（P＜0.05）；LSIL 组、HSIL 组分别与正常对照组相比 BRAP mRNA 达量较高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；LSIL 组 BRAP mRNA 的表达量低HSIL 组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；LSIL 组、HSIL 组分别与 CSCC 组比表达量较低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。表 2-1 不同宫颈病变组中 BRAP mRNA 表达量（ X+S）分组 n BRAP 表达量 F P
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33

【参考文献】