miR-16对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响

发布时间：2020-05-20 05:08

【摘要】：目的:本实验探讨miR-16在宫颈癌Hela细胞中表达及顺铂敏感性的关系。方法:脂质体lipofectamine2000介导miR-16成熟体模拟物(mimics)及阴性对照片段(NC)分别转染宫颈癌Hela细胞。实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-16的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的顺铂细胞存活率;蛋白印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白、Bax蛋白、caspase-3蛋白的表达。结果:1.qRT-PCR结果显示,转染miR-16在Hela细胞中高表达。2.MTT结果表明miR-16表达能明显增加Hela细胞对顺铂的敏感性。3.Western blot结果提示,与对照组比较,miR-16的Hela细胞中Bcl-2表达水平下降,Bax、caspases-3表达水平升高。结论:MiR-16增强宫颈癌Hela细胞对顺铂的敏感性,miR-16可能靶向下调宫颈癌Hela细胞Bcl-2蛋白表达,并协同上调Bax、caspase-3蛋白的表达,从而为宫颈癌的治疗提供新靶点。
【图文】：

第四章 结 果iR-16在宫颈癌Hela细胞中转染后表达了观察miR-16在宫颈癌Hela细胞中表达，，本实验采用实时qRT-组为：空白对照组（Hela细胞组）、溶剂对照组（Lip2000+HelamiR-16 NC+Hela细胞）、miR-16过表达组（miR-16 mimics+Hel、B、C、D四组，观察其表达差异。结果显示：与A组相比，D明显升高，为A组的2倍，有显著性差异((p<0．01，n=4)，而与A表达量未见明显差异，差异无统计学意义(p＞0．05，n=4)。实iR-16转染后在Hela细胞中表达明显高于空白对照组。(如图4.1.1所

分为空白对照组（Hela细胞组）、溶剂对照组（Lip2000+Hela载组（miR-16 NC+Hela细胞）、miR-16过表达组（miR-16 mimics+Hel经不同浓度的顺铂处理，顺铂的浓度为：0、0．5、1、2、4umol/l，分别48h后。结果显示：D组分别与A、B、C组比较，细胞活性值明显降低有统计学意义（ p<0.05，n =4），与A组相比，B、C组细胞活性无明显异无统计学意义（p>0.05，n =4）。由此可知，miR-16+Hela/DDP细胞活性值明显降低，提示转染miR-16后的Hela细胞对顺铂敏感性明显提高度的增高，转染miR-16后的Hela细胞活性下降，随着时间延长，转染miHela细胞活性也下降。（如图4.2.1、4.2.2所示）
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33

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本文编号：2672112