MicroRNA-210调节Treg细胞在子痫前期免疫发病机制的研究

发布时间：2020-06-04 22:50

【摘要】：目的评估子痫前期患者调节性T细胞(Treg)数量,探讨子痫前期中microRNA-210(miR-210)、叉头样转录因子p3(Foxp3)基因表达水平,进而揭示miR-210与Foxp3在子痫前期中的调控机制。方法采用酶联免疫吸附法检测子痫前期29例、正常孕妇27例及健康非妊娠妇女20例血清细胞因子(IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β1)的表达水平。采用流式细胞术分析外周血CD4~+CD25~+CD127low/-细胞。采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测子痫前期患者和正常孕妇胎盘组织中Foxp3和维甲酸相关孤儿受体C(RORc)、miR-210的表达水平。蛋白质印迹法检测胎盘中Foxp3蛋白的表达。结果⑴子痫前期患者血清IL-6、IL-17和TGF-β1浓度较正常孕妇明显升高,Treg细胞因子IL-10水平低于正常孕妇(P 0. 05)。⑵子痫前期患者外周血CD4~+CD25~+CD127-/CD4~+T细胞百分率明显低于正常妊娠组及健康非妊娠妇女(P 0. 001)。⑶子痫前期患者胎盘组织中表现为Foxp3 mRNA水平明显低于正常孕妇,子痫前期患者的RORc mRNA水平明显高于正常孕妇,miRNA-210在子痫前期患者组的表达增强(P 0. 01)。⑷子痫前期患者胎盘组织Foxp3蛋白表达降低(P 0. 05)。结论子痫前期患者存在Treg细胞数量减少和Treg/Th17失衡,这些变化破坏母体对胎儿的免疫耐受。在子痫前期患者胎盘组织中Foxp3表达水平明显降低,且Foxp3的表达与miR-210的表达水平有关。
【图文】：

图1健康非妊娠妇女、正常妊娠妇女和子痫前期患者血浆中的细胞因子浓度比较A:IL-6;B:IL-17;C:TGF-β1;D:IL-10;与正常妊娠组比较，aP＜0.05，bP＜0.01常孕妇无胎儿生长受限，41.4%的子痫前期孕妇有胎儿生长受限，差异有统计学意义(P＜0.01)，12例孕妇(41.4%)合并重度子痫前期，11例(37.9%)发生早产儿(＜37周)。见表1。2．2子痫前期患者血浆中细胞因子的表达变化子痫前期患者血浆中细胞因子IL-6、IL-17和TGF-β1水平高于正常孕妇(P=0.0021、P=0.015、P=0.019)，Treg细胞因子IL-10水平明显低于正常孕妇(P=0.0012)。见图1。2．3外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+的水平子痫前期患者外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+T细胞百分率明显低于正常妊娠组［(6.34±0.28)%vs(9.10±0.28)%，，P＜0.001］和健康非妊娠组图2子痫前期患者、正常妊娠和健康非妊娠妇女外周血CD4+CD25+CD127－细胞和CD4+CD25+T细胞的百分比A:代表流式细胞仪分析CD4+CD25+CD127－/CD4+T细胞人群的结果;B:CD4+CD25+T细胞在CD4+T细胞中所占的相对比率，与子痫前期组比较，aP＜0.01［(6.34±0.28)%vs(8.74±0.37)%，P＜0.001］。健康非妊娠组和正常妊娠组CD4+CD25+CD127－/CD4+T细胞比例相似(P＞0.05)。正常妊娠组CD4+CD25+T细胞相对水平明显高于健康非妊娠妇女［(46.27±1.11)%vs(42.71±0.72)%，P＜0.001］。然而，与正常孕妇、健康非妊娠妇女相比，子痫前期患者CD4+CD25+T/CD4+细胞比例明显减少(P＜0

锴捌冢?11例(37.9%)发生早产儿(＜37周)。见表1。2．2子痫前期患者血浆中细胞因子的表达变化子痫前期患者血浆中细胞因子IL-6、IL-17和TGF-β1水平高于正常孕妇(P=0.0021、P=0.015、P=0.019)，Treg细胞因子IL-10水平明显低于正常孕妇(P=0.0012)。见图1。2．3外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+的水平子痫前期患者外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+T细胞百分率明显低于正常妊娠组［(6.34±0.28)%vs(9.10±0.28)%，P＜0.001］和健康非妊娠组图2子痫前期患者、正常妊娠和健康非妊娠妇女外周血CD4+CD25+CD127－细胞和CD4+CD25+T细胞的百分比A:代表流式细胞仪分析CD4+CD25+CD127－/CD4+T细胞人群的结果;B:CD4+CD25+T细胞在CD4+T细胞中所占的相对比率，与子痫前期组比较，aP＜0.01［(6.34±0.28)%vs(8.74±0.37)%，P＜0.001］。健康非妊娠组和正常妊娠组CD4+CD25+CD127－/CD4+T细胞比例相似(P＞0.05)。正常妊娠组CD4+CD25+T细胞相对水平明显高于健康非妊娠妇女［(46.27±1.11)%vs(42.71±0.72)%，P＜0.001］。然而，与正常孕妇、健康非妊娠妇女相比，子痫前期患者CD4+CD25+T/CD4+细胞比例明显减少(P＜0.001)。见图2。2．4子痫前期患者和正常孕妇胎盘组织中Treg/Th17细胞转录因子mＲNA的表达水平子痫前期患者的Foxp3mＲNA水平明显低于正常孕妇(0.713±0.088vs1.105±0.136，P=0.019)。子痫前期患者的ＲOＲcmＲNA水平明显高于正常孕妇(0.599±0.069vs0.380±0.046，P=0.0127)。与正常

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