干细胞移植对去卵巢大鼠骨质疏松的影响

发布时间：2020-06-19 05:56

【摘要】：目的:1、观察不同剂量骨髓间充质干细胞(BMSCs)的移植对去卵巢大鼠骨质疏松的疗效;2、探讨BMSCs自噬水平的变化对移植疗效的影响,及BMSCs改善绝经后骨质疏松的可能作用机制。方法:80只雌性SD大鼠被随机分为假手术组10只(Sham组)和去卵巢组70只。造模成功后,将70只去卵巢大鼠随机分为单纯去卵巢组(OVX组)、雌激素组(E_2组)、低剂量BMSCs移植组(BMSCs 2×10~6 LS组)、中剂量BMSCs移植组(BMSCs4×10~6 MS组)、高剂量BMSCs移植组(BMSCs 6×10~6 HS组)、雷帕霉素干预组(Rapa+BMSCs 4×10~6 Rapa组)及3-MA干预组(3-MA+BMSCs 4×10~6 3-MA组),每组各10只。各BMSCs移植组分别给予对应的BMSCs经尾静脉一次性移植入体内。移植后2到4个月,,每个月均予双能X线法测量骨密度。移植4个月后,提取每组的血清予ELISA法测量骨代谢标志物,取双侧胫骨近端予HE染色观察骨微结构及形态,取各组的BMSCs予茜素红染色和油红O染色比较各组BMSCs的成骨和成脂分化差异。结果:1、移植不同剂量BMSCs的研究:(1)全身骨密度检测结果:各干细胞移植组的骨密度在干预后第二个月开始升高。在同一个时间点,各干细胞移植组的全身BMD均大于OVX组(P0.05),且随着移植剂量的增多而增高;当移植(6×10~6)BMSCs时,其全身BMD与E_2组相当。(2)胫骨近端HE染色结果:OVX组骨小梁稀疏,干细胞移植后,骨小梁占骨髓腔面积的比例随移植剂量的增加而增加(P0.05);当移植(6×10~6)BMSCs时,其值与E_2组的差异无统计学意义(P0.05)。(3).血清骨代谢标志物检测结果:各BMSCs移植组的血清P1NP水平高于Sham组(P0.001)和OVX组(P0.001),且随着BMSCs移植剂量的增多而增高;各BMSCs移植组的CTX均高于Sham组(P0.001)而低于OVX组(P0.05),随着移植剂量的增高而减少。OVX组的CTX水平最高、P1NP水平最低。(4).分化潜能测定:BMSCs移植后,大鼠体内的BMSCs成骨分化的潜能增强、成脂分化的潜能减弱。2.移植不同自噬水平BSMCs的研究:(1).全身骨密度检测结果:Rapa组的全身BMD高于MS组及3-MA组(P0.05),而3-MA组的BMD低于Rapa组及MS组(P0.05)。(2).胫骨近端HE染色、结果:Rapa组的骨小梁占骨髓腔的比例高于MS组(P0.05)及3-MA组(P0.05),3-MA组的则低于MS组(P0.05)。(3).血清骨代谢标志物检测结果:Rapa组的P1NP高于MS组(P0.05)及3-MA组(P0.05),而3-MA组则低于MS组(P0.05)。Rapa组的的CTX低于MS组(P0.05)及3-MA组(P0.05),而3-MA组则高于MS组(P0.05)。(4).分化潜能测定:Rapa组的BMSCs与MS组及3-MA组相比较时其成骨分化潜能增强而成脂分化潜能减弱(P0.05)。3-MA组较MS组的成骨分化潜能减弱而成脂分化潜能增强。结论:1、移植BMSCs可以明显地改善去卵巢大鼠的骨质疏松,且随着所移植BMSCs数量的增加可以获得更好及更长久的疗效。2、BMSCs移植改善去卵巢大鼠的骨质疏松的机制可能是以增加骨形成与降低骨吸收来起作用。3、干细胞移植后,其BMSCs成骨分化潜能增强而成脂分化潜能减弱。4、增强所移植BMSCs的自噬水平可以增强BMSCs移植治疗绝经后骨质疏松模型大鼠的疗效,抑制移植前BMSCs的自噬水平则会减弱其疗效。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R580;R711.75
【图文】：

去卵巢,体重

齐性检验的资料采用 Kruskal-Wallis H 检验。数据以均数±标准差表示。P为差异有统计学意义。3.结果3.1 去卵巢 3 个月后体重去卵巢手术前，Sham 组与 OVX 组两组间的体重无明显差异（P>0.05巢去除 3 个月后，Sham 组及 OVX 组两者的体重均增加，但 Sham 组体重的增较于 OVX 组的体重明显低，两者差异明显（P<0.001）。表 1.1.1 造模三个月后大鼠体重（单位：g）（ x±s）组别例数体重假手术组 10 324±30去卵巢组 70 411±20*

去卵巢大鼠,去卵巢,大鼠

注：与 Sham 组比较，*P<0.0.01。Sham 组：假手术组 OVX 组：去卵巢组3.2 去卵巢 3 个月后两组的全身骨密度去卵巢 3 个月后从 70 只去卵巢大鼠中随机选取 10 只及假手术组 10 只测量其全身 BMD，去卵巢组大鼠的全身 BMD 明显地低于 Sham 组 (P<0.001).表 1.1.2 干预前假手术组和去卵巢大鼠全身 BMD（g/cm2）（ x±s）组别例数全身 BMD假手术组 10 0.191±0.0040去卵巢大鼠 10 0.171±0.0026*

【参考文献】